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公開番号2025020154
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-02-12
出願番号2024180515,2023030980
出願日2024-10-16,2018-07-31
発明の名称抗CD19/CD20免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
出願人レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド,LENTIGEN TECHNOLOGY, INC.
代理人弁理士法人深見特許事務所
主分類C12N 15/62 20060101AFI20250204BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】特異的かつ有効な抗腫瘍効果を示し得る手法を使用する、B-ALLならびに他のCD19および/またはCD20発現B細胞悪性腫瘍の処置のための新規の組成物および方法を提供する。
【解決手段】CD19/CD20またはCD20/CD19抗原結合性ドメインを含有するキメラ抗原受容体が開示される。キメラ抗原受容体に関する核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞、抗原結合性断片、および医薬組成物も開示される。対象においてがんを処置または予防する方法、およびキメラ抗原受容体T細胞を作製する方法も開示される。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
ＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメインを含む少なくとも１つの細胞外抗原結合性ドメイン、少なくとも１つの膜貫通ドメイン、および少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインを含むＣＤ１９／ＣＤ２０タンデムキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする、単離された核酸分子であって、前記ＣＤ１９／ＣＤ２０タンデムキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）が配列番号１または３を含むヌクレオチド配列によりコードされる、単離された核酸分子。
続きを表示（約 1,100 文字）【請求項２】
コードされる前記少なくとも１つのＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメインが、ＣＤ１９／ＣＤ２０に結合する抗体の少なくとも１つの単鎖可変断片を含む、請求項１に記載の単離された核酸分子。
【請求項３】
コードされる前記少なくとも１つのＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメインが、ＣＤ１９／ＣＤ２０に結合する抗体の少なくとも１つの重鎖可変領域を含む、請求項１に記載の単離された核酸分子。
【請求項４】
コードされる前記少なくとも１つのＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメイン、前記少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメイン、またはその両方が、リンカーまたはスペーサードメインによって膜貫通ドメインに接続されている、請求項１に記載の単離された核酸分子。
【請求項５】
コードされる前記リンカーまたはスペーサードメインが、ＣＤ８またはＣＤ２８の細胞外ドメインに由来し、膜貫通ドメイン連結されている、請求項４に記載の単離された核酸分子。
【請求項６】
コードされる前記細胞外ＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメインに、リーダーペプチドをコードするリーダーヌクレオチド配列が先行する、請求項１に記載の単離された核酸分子。
【請求項７】
前記リーダーヌクレオチド配列が、配列番号１２のリーダーアミノ酸配列をコードする配列番号１１を含むヌクレオチド配列を含む、請求項６に記載の単離された核酸分子。
【請求項８】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のアルファ、ベータもしくはゼータ鎖、ＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ１９／ＣＤ２０、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８３、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４、およびＴＮＦＲＳＦ１９、またはそれらの任意の組合せを含むタンパク質の膜貫通ドメインを含む、請求項１に記載の単離された核酸分子。
【請求項９】
前記ＣＤ１９／ＣＤ２０タンデムキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列が、配列番号１もしくは３を含むヌクレオチド配列、またはそれに対して８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有する配列によりコードされる、請求項１に記載の単離された核酸分子。
【請求項１０】
コードされる前記少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ゼータ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１に記載の単離された核酸分子。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）の下で、その全内容が参照により本明細書に組み込まれる、２０１７年７月３１日出願の米国仮特許出願第６２／５３９，４８３号に対する優先権の利益を主張する。
続きを表示（約 5,100 文字）【０００２】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された、その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる配列表を含む。２０１８年７月３１日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーはＳｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔと名付けられ、６４キロバイトのサイズである。
【０００３】
本開示の分野
本出願は、がんの分野、特に、ＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメイン、およびこのようなＣＤ１９／ＣＤ２０抗原結合性ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、およびその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
背景
がんは、ヒトの健康に対する最も致命的な脅威の１つである。米国だけで、がんは毎年ほぼ１３０万人の新たな患者が罹患し、心血管疾患に次いで２番目に多い死因であり、死亡数の約４分の１を占めている。固形腫瘍が、これらの死亡のほとんどの原因である。ある特定のがんの医学的処置においては顕著な進歩があったものの、全てのがんについての５年全生存率は過去２０年間で約１０％しか改善しなかった。がんまたは悪性腫瘍は、制御されずに迅速に転移および成長するため、処置は非常に困難である。
【０００５】
ＣＤ１９は、８５～９５ｋＤａの膜貫通細胞表面糖タンパク質受容体である。ＣＤ１９は、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーのタンパク質のメンバーであり、２つの細胞外Ｉｇ様ドメイン、膜貫通および細胞内シグナル伝達ドメインを含有する（ＴｅｄｄｅｒＴＦ、Ｉｓａａｃｓ，ＣＭ、１９８９年、ＪＩｍｍｕｎｏｌ１４３巻：７１２～１７１頁）。ＣＤ１９は、Ｂ細胞受容体シグナル伝達を修飾し、抗原についてのＢ細胞受容体の誘発閾値を低下させ（Ｃａｒｔｅｒ，ＲＨおよびＦｅａｒｏｎ，ＤＴ、１９９２年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５６巻：１０５～１０７頁）、ＣＤ８１およびＣＤ２１と協調して、この本質的なＢ細胞シグナル伝達複合体を調節する（Ｂｒａｄｂｕｒｙ，ＬＥ、ＫａｎｓａｓＧＳ、ＬｅｖｙＳ、ＥｖａｎｓＲＬ、ＴｅｄｄｅｒＴＦ、１９９２年、ＪＩｍｍｕｎｏｌ、１４９巻：２８４１～５０頁）。Ｂ細胞発生中、ＣＤ１９は、抗原受容体とは独立にプロＢ、プレ－プレＢ細胞、プレＢ、初期Ｂ細胞段階においてシグナル伝達することができ、Ｓｒｃファミリータンパク質チロシンキナーゼと会合し、チロシンリン酸化され、細胞内カルシウム動員およびイノシトールリン脂質シグナル伝達の両方を誘導する（ＵｃｋｕｎＦＭ、ＢｕｒｋｈａｒｄｔＡＬ、ＪａｒｖｉｓＬ、ＪｕｎＸ、ＳｔｅａｌｙＢ、ＤｉｂｉｒｄｉｋＩ、ＭｙｅｒｓＤＥ、Ｔｕｅｌ－ＡｈｌｇｒｅｎＬ、ＢｏｌｅｎＪＢ、１９８３年、ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２６８巻：２１１７２～８４頁）。Ｂ細胞悪性腫瘍の処置に関連する重要な点は、ＣＤ１９が、ＩｇＨ遺伝子再配置の段階における初期Ｂ細胞前駆体、成熟Ｂ細胞に限定され、しかし造血幹細胞または成熟血漿細胞上では発現されないように厳しく調節された様式で正常Ｂ細胞上で発現されことである（Ａｎｄｅｒｓｏｎ，ＫＣ、Ｂａｔｅｓ，ＭＰ、Ｓｌａｕｇｈｅｎｈｏ
ｕｔＢＬ、ＰｉｎｋｕｓＧＳ、ＳｃｈｌｏｓｓｍａｎＳＦ、ＮａｄｌｅｒＬＭ、１９８４年、Ｂｌｏｏｄ６３巻：１４２４～１４３３頁）。
【０００６】
ＣＤ２０（ＬＥＵ－１６、ＭＳ４Ａ１とも呼ばれる）は、プロＢ相から成熟Ｂ細胞相までＢ細胞の表面上に発現され、Ｂ細胞発達および分化において役割を果たす膜貫通４Ａファミリータンパク質である。ＣＤ２０抗原は、様々な血液腫瘍上でも発現され、様々なモノクローナル抗ＣＤ２０抗体は、ＣＤ２０陽性悪性腫瘍の処置に何年にもわたり適用されている（Ｌｉｍ、ＳｅａｎＨ．ら「Ａｎｔｉ－ＣＤ２０ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＨｉｓｔｏｒｉｃａｌａｎｄＦｕｔｕｒｅＰｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．」Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ９５．１巻（２０１０年）：１３５～１４３頁．ＰＭＣ．Ｗｅｂ．２０１７年７月３１日で概略される）。抗ＣＤ２０モノクローナル抗体リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））は、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）およびびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ならびに慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）の処置において広く使用されている（Ｒｉｔｕｘａｎ処方情報）。
【０００７】
Ｂ系統白血病およびリンパ腫のための伝統的な処置手法は、化学療法、放射線療法、および幹細胞移植に関連し得る（ワールドワイドウェブｍａｙｃｌｉｎｉｃ．ｏｒｇを参照）。これらの処置に関連する高い毒性、および再発、二次的悪性腫瘍またはＧＶＨＤなどの合併症リスクが、より良好な治療用代替物の探求を促す。成人および小児（プレＢ－ＡＬＬ）両方のＢ細胞悪性腫瘍においてＣＤ１９が発現することから、抗体およびキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）－Ｔ細胞ベースの療法の両方のためにこの標的を利用することとなった（ＫｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒＪＮ、ＷｉｌｓｏｎＷＨ、ＪａｎｉｋＪＥ、ＤｕｄｌｅｙＭＥ、Ｓｔｅｔｌｅｒ－ＳｔｅｖｅｎｓｏｎＭ、ＦｅｌｄｍａｎＳＡ、ＭａｒｉｃＩ、ＲａｆｆｅｌｄＭ、ＮａｔｈａｎＤＡ、ＬａｎｉｅｒＢＪ、ＭｏｒｇａｎＲＡ、ＲｏｓｅｎｂｅｒｇＳＡ、２０１０年、Ｂｌｏｏｄ１１６巻：４０９９～１０２頁；ＬｅｅＤＷ、ＫｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒＪＮ、Ｓｔｅｔｌｅｒ－ＳｔｅｖｅｎｓｏｎＭ、ＣｕｉＹＫ、ＤｅｌｂｒｏｏｋＣ、ＦｅｌｄｍａｎＳＡ、ＯｒｅｎｔａｓＲ、ＳａｂａｔｉｎｏＭ、ＳｈａｈＮＮ、ＳｔｅｉｎｂｅｒｇＳＭ、ＳｔｒｏｎｃｅｋＤ、ＴｓｃｈｅｒｎｉａＮ、ＹｕａｎＣ、ＺｈａｎｇＨ、ＺｈａｎｇＬ、ＲｏｓｅｎｂｅｒｇＳＡ、ＷａｙｎｅＡＳ、ＭａｃｋａｌｌＣＬ、２０１５年、Ｌａｎｃｅｔ３８５巻：５１７～２８頁）。さらに、リンパ腫（ＤＬＢＣＬ、ＦＬ）および白血病（ＣＬＬ）におけるＣＤ２０抗原の存在のために、ＣＤ２０抗原は、効率的な腫瘍排除のためおよび腫瘍抗原エスケープの予防のための魅力的なさらなる標的である。
【０００８】
Ｂ系統白血病のためのケアの現在の標準は、高用量の化学療法または高線量の放射線による寛解導入処置からなる場合があり、その後地固めが続き、必要に応じて幹細胞移植およびさらなる化学療法の過程を特徴とし得る（ワールドワイドウェブｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖを参照）。これらの処置に関連する高い毒性、および再発、二次的悪性腫瘍またはＧＶＨＤなどの合併症リスクが、より良好な治療用代替物の探求を促す。成人および小児（プレＢ－ＡＬＬ）両方のＢ細胞悪性腫瘍におけるＣＤ１９の発現から、抗体およびキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）－Ｔ細胞ベースの療法の両方のためにこの標的を利用することとなった（ＫｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒＪＮ、ＷｉｌｓｏｎＷＨ、ＪａｎｉｋＪＥ、ＤｕｄｌｅｙＭＥ、Ｓｔｅｔｌｅｒ－ＳｔｅｖｅｎｓｏｎＭ、ＦｅｌｄｍａｎＳＡ、ＭａｒｉｃＩ、ＲａｆｆｅｌｄＭ、ＮａｔｈａｎＤＡ、ＬａｎｉｅｒＢＪ、ＭｏｒｇａｎＲＡ、ＲｏｓｅｎｂｅｒｇＳＡ、２０１０年、Ｂｌｏｏｄ１１６巻：４０９９～１０２頁；ＬｅｅＤＷ、ＫｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒＪＮ、Ｓｔｅｔｌｅｒ－ＳｔｅｖｅｎｓｏｎＭ、ＣｕｉＹＫ、ＤｅｌｂｒｏｏｋＣ、ＦｅｌｄｍａｎＳＡ、ＯｒｅｎｔａｓＲ、ＳａｂａｔｉｎｏＭ、ＳｈａｈＮＮ、ＳｔｅｉｎｂｅｒｇＳＭ、
ＳｔｒｏｎｃｅｋＤ、ＴｓｃｈｅｒｎｉａＮ、ＹｕａｎＣ、ＺｈａｎｇＨ、ＺｈａｎｇＬ、ＲｏｓｅｎｂｅｒｇＳＡ、ＷａｙｎｅＡＳ、ＭａｃｋａｌｌＣＬ、２０１５年、Ｌａｎｃｅｔ３８５巻：５１７～２８頁）。
【０００９】
抗ＣＤ１９または抗ＣＤ２０結合性モチーフをＴ細胞結合性モチーフに連結する二重特異性抗体を含む、Ｂ細胞白血病およびリンパ腫を処置するためのいくつかの新規の手法が開発されている（即ち、フィラデルフィア染色体陰性再発性または難治性Ｂ細胞前駆体急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）の処置に適応となるブリナツモマブ、Ｂｌｉｎｃｙｔｏ（登録商標））。今日までに、ＣＡＲ構築物において使用されているＣＤ１９またはＣＤ２０についての結合性部分の多くは、マウス抗体に由来するドメインを利用する。ＮｏｖａｒｔｉｓおよびＫｉｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓにより開発されたものを含む、いくつかのこれらの製品は、現在、承認を検討されている。２０１７年４月に、Ｎｏｖａｒｔｉｓは、ＣＴＬ０１９（チサゲンレクロイセル）が、２以上の前療法に失敗した難治性または再発性（ｒ／ｒ）ＤＬＢＣＬ（びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫）を有する成人患者の処置のためのＦＤＡ画期的治療薬指定を受け、この指定をｒ／ｒＢ細胞急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）の処置に追加したことを発表した。これらの適応症は、それぞれ、フェーズＩＩＪＵＬＩＥＴ研究（ＮＣＴ０２４４５２４８）およびＥＬＩＡＮＡ研究（ＮＣＴ０２４３５８４９）に基づいた。ＪＵＬＩＥＴ試験は、３カ月で４５％の奏効率（ＯＲＲ）を示し、３７％の完全奏効（ＣＲ）および８％の部分奏効（ＰＲ）を有した。ＥＬＩＡＮＡ研究において、製品を注入された患者の８２％が、ＣＲまたは回復不完全を伴うＣＲを達成し、６カ月での無再発生存率は６０％であった。ＫｉｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓからのＣＡＲ－Ｔ製品（ＫＴＥ－Ｃ１９、アキシカブタゲンシロロイセル）は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、形質転換型濾胞性リンパ腫（ＴＦＬ）、および縦隔原発Ｂ細胞性リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）のための画期的治療薬指定を承認された。ｒ／ｒＡＬＬにおけるＫＴＥ－Ｃ１９のＫｉｔｅＺＵＭＡ－３フェーズＩＩ試験において、７３％のＣＲが報告された（２カ月以上で）。ＣＡＲ－Ｔ療法の抗体が利用されるかどうかにかかわらず、これらの療法により救済されない顕著な数の患者がまだ存在しており、治療的手法の改善についてかなりの余地がある。
【００１０】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、３つの本質的な単位を含むハイブリッド分子である：（１）細胞外抗原結合性モチーフ、（２）連結／膜貫通モチーフ、および（３）細胞内Ｔ細胞シグナル伝達モチーフ（ＬｏｎｇＡＨ、ＨａｓｏＷＭ、ＯｒｅｎｔａｓＲＪ．Ｌｅｓｓｏｎｓｌｅａｒｎｅｄｆｒｏｍａｈｉｇｈｌｙ－ａｃｔｉｖｅＣＤ２－ｓｐｅｃｉｆｉｃｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１３年；２巻（４号）：ｅ２３６２１頁）。ＣＡＲの抗原結合性モチーフは一般に、免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の最小の結合性ドメインである単鎖断片可変（ＳｃＦｖ）を基にして作られる。代替の抗原結合性モチーフとして、例えば、受容体リガンド（即ち、ＩＬ－１３は、腫瘍が発現するＩＬ－１３受容体に結合するように操作されている）、インタクトな免疫受容体、ライブラリー由来ペプチド、および自然免疫系エフェクター分子（例えば、ＮＫＧ２Ｄ）も操作されている。ＣＡＲ発現のための代替の細胞標的（例えば、ＮＫまたはガンマ－デルタＴ細胞）も開発中である（ＢｒｏｗｎＣＥらＣｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２０１２年；１８巻（８号）：２１９９～２０９頁；ＬｅｈｎｅｒＭらＰＬｏＳＯｎｅ．２０１２年；７巻（２号）：ｅ３１２１０頁）。ＣＡＲベクターを形質導入するための最も活性なＴ細胞集団を定義すること、最適な培養および増殖の技術を決定すること、ならびにＣＡＲタンパク質構造自体の分子的詳細を定義することに関して、いまだにかなりのかける労力を要している。
（【００１１】以降は省略されています）

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