特許ウォッチ

公開番号2025016451
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-02-04
出願番号2024168632,2022156496
出願日2024-09-27,2017-03-01
発明の名称優性網膜色素変性の治療のためのAAVベクター
出願人ユニバーシティオブフロリダリサーチファンデーションインコーポレーティッド,ザトラスティーズオブザユニバーシティオブペンシルバニア
代理人個人,個人
主分類C12N 15/113 20100101AFI20250128BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】対象における網膜色素変性(例えば、優性網膜色素変性)を治療するための組成物および方法を提供する。
【解決手段】対象において内在性rho遺伝子の対立遺伝子(網膜色素変性に関連する変異rho対立遺伝子)の一方または両方の発現を減少させるために、干渉核酸(例えば干渉RNA)を対象に送達するための組成物および方法を提供する。いくつかの実施形態において、干渉核酸に耐性のある置換rho遺伝子もまた、対象に送達される。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
ａ）配列ＣＵＧＣＣＵＡＣＡＵＧＵＵＵＣＵＧＣＵ（配列番号１）のセンス鎖および配列ＡＧＣＡＧＡＡＡＣＡＵＧＵＡＧＧＣＡＧ（配列番号２）のアンチセンス鎖；
ｂ）配列ＣＣＵＡＣＡＵＧＵＵＵＣＵＧＣＵＧＡＵ（配列番号３）のセンス鎖および配列ＡＵＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＡＵＧＵＡＧＧ（配列番号４）のアンチセンス鎖；
ｃ）配列ＧＣＡＵＧＧＵＣＡＵＣＡＵＣＡＵＧＧＵ（配列番号５）のセンス鎖および配列ＡＣＣＡＵＧＡＵＧＡＵＧＡＣＣＡＵＧＣ（配列番号６）のアンチセンス鎖；または
ｄ）配列ＧＵＧＧＣＡＵＵＣＵＡＣＡＵＣＵＵＣＡ（配列番号７）のセンス鎖および配列ＵＧＡＡＧＡＵＧＵＡＧＡＡＵＧＣＣＡＣ（配列番号８）のアンチセンス鎖：
を含む、合成リボ核酸（ＲＮＡ）分子。
続きを表示（約 850 文字）【請求項２】
ＲＮＡが低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）である、請求項１に記載の合成ＲＮＡ分子。
【請求項３】
ＲＮＡが低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）である、請求項１に記載の合成ＲＮＡ分子。
【請求項４】
配列ＵＣＡＡＧＡＧ（配列番号９）のＲＮＡ、または配列ＵＧＵＧＣＵＵ（配列番号１０）のＲＮＡを含むループを有する、請求項３に記載のｓｈＲＮＡ。
【請求項５】
ＲＮＡが人工マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）である、請求項１に記載の合成ＲＮＡ分子。
【請求項６】
人工ｍｉＲＮＡが配列ＵＧＣＵＧＵＵＧＡＣＡＧＵＧＡＧＣＧＡ（Ｘ）
ｎ
ＵＡＧＵＧＡＡＧＣＣＡＣＡＧＡＵＧＵＡ（Ｙ）
ｎ
ＣＵＧＣＣＵＡＣＵＧＣＣＵＣＧＧＡ（配列番号１９）のＲＮＡを含み、
ａ）（Ｘ）
ｎ
が配列番号１を含み、（Ｙ）
ｎ
が配列番号２を含む；
ｂ）（Ｘ）
ｎ
が配列番号３を含み、（Ｙ）
ｎ
が配列番号４を含む；
ｃ）（Ｘ）
ｎ
が配列番号５を含み、（Ｙ）
ｎ
が配列番号６を含む；または
ｄ）（Ｘ）
ｎ
が配列番号７を含み、（Ｙ）
ｎ
が配列番号８を含む：
請求項５に記載の人工ｍｉＲＮＡ。
【請求項７】
さらに５’末端および／または３’末端に不対合突出配列を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の合成ＲＮＡ。
【請求項８】
不対合突出配列が反復塩基配列を含む、請求項７に記載の合成ＲＮＡ。
【請求項９】
反復塩基配列が反復ウラシル（Ｕ）塩基を含む、請求項８に記載の合成ＲＮＡ。
【請求項１０】
不対合突出配列がＵＵである、請求項９に記載の合成ＲＮＡ。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、２０１６年３月１日に出願された米国仮特許出願第６２／３０２，１２２号、および２０１６年９月２２日に出願された米国仮特許出願第６２／３９８，４５１号の利益を主張するものであり、これらのそれぞれの内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
続きを表示（約 2,900 文字）【０００２】
政府の支援
本発明は、国立衛生研究所によって付与された補助金番号Ｒ２４－ＥＹ０２２０１２による政府の支援によってなされた。
【背景技術】
【０００３】
背景
常染色体優性網膜色素変性（ａｄＲＰ）は、１２，０００人に１人に発症する失明に至る疾病である。これらの個体のうちかなりの割合が、網膜の光受容細胞の集光性色素タンパク質である、ロドプシンの遺伝子（ｒｈｏ）に変異を有する。この疾患は、いずれかの親からの変異した遺伝子の遺伝が網膜の変性と最終的な失明につながるため、優性である。ｒｈｏで特定された１００を超える異なる変異が、失明につながる。現在のところ、ａｄＲＰに対する承認された薬物療法または遺伝子療法の治療はない。従って、ａｄＲＰおよび関連する症状の、ありとあらゆる原因に関する、有効な治療選択肢が必要である。
【発明の概要】
【０００４】
概要
本出願の局面は、対象における（例えば、ヒトにおける）網膜色素変性（例えば、優性網膜色素変性）を治療するための組成物および方法に関連する。いくつかの実施形態において、対象のロドプシン遺伝子（ｒｈｏ遺伝子）の対立遺伝子の一方または両方を、干渉ＲＮＡ分子を対象（例えば、網膜色素変性を有する対象であって、例としては優性網膜色素変性を有するヒト）に投与することによりサイレンシングする。いくつかの実施形態において、置換ｒｈｏ遺伝子もまた対象に投与して、対象に光受容細胞の機能を回復させる、機能性ＲＨＯタンパク質を提供する。いくつかの実施形態において、置換ｒｈｏ遺伝子は、内在性遺伝子の対立遺伝子と比較して１つ以上のヌクレオチド置換を有しており、これが、該置換遺伝子を干渉ＲＮＡの効果に対して耐性にする。いくつかの実施形態において、置換ｒｈｏ遺伝子は、ｒｈｏ遺伝子を、干渉ＲＮＡ分子により仲介される分解に対して耐性にする（「硬化する（ｈａｒｄｅｎｅｄ）」とも呼ばれる）、１つ以上の（例えば、１、２、３、４、５つ以上の）置換を含む、ヒトｒｈｏ遺伝子（例えば、野生型ヒトｒｈｏ遺伝子）である。いくつかの実施形態において、１つ以上のヌクレオチド置換は、ｒｈｏ遺伝子のコード配列に存在する。いくつかの実施形態において、１つ以上のヌクレオチド置換はサイレントである（例えば、ＲＨＯタンパク質のアミノ酸配列を変化させない）。いくつかの実施形態において、１つ以上の置換はアミノ酸の変化を導入するが、結果として生じるＲＨＯタンパク質は、（少なくとも部分的な視力または正常な視力を回復または維持するのに）治療的に有効であるために十分に機能する。
【０００５】
いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡおよび／または置換遺伝子は、任意の好適な技術を用いて対象に送達され得る。いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡは、干渉ＲＮＡをコードする遺伝子の形態で対象に提供される。いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡをコードする遺伝子は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）で対象に提供される。いくつかの実施形態において、置換遺伝子は、ｒＡＡＶで対象に提供される。いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡと置換遺伝子とをコードする遺伝子は、同一のｒＡＡＶで提供される（例としては、それらは両方とも、ＡＡＶ逆位末端反復配列（ＩＴＲ）が隣接する同一の組換えゲノム上にコードされている）。いくつかの実施形態において、両方の遺伝子は、同一のプロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態において、これらの遺伝子は、２つの異なるプロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡと置換遺伝子とをコードする遺伝子は、異なるｒＡＡＶで提供される。
【０００６】
いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡは：
ａ）配列ＣＵＧＣＣＵＡＣＡＵＧＵＵＵＣＵＧＣＵ（配列番号１）のセンス鎖および配列ＡＧＣＡＧＡＡＡＣＡＵＧＵＡＧＧＣＡＧ（配列番号２）のアンチセンス鎖；
ｂ）配列ＣＣＵＡＣＡＵＧＵＵＵＣＵＧＣＵＧＡＵ（配列番号３）のセンス鎖および配列ＡＵＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＡＵＧＵＡＧＧ（配列番号４）のアンチセンス鎖；
ｃ）配列ＧＣＡＵＧＧＵＣＡＵＣＡＵＣＡＵＧＧＵ（配列番号５）のセンス鎖および配列ＡＣＣＡＵＧＡＵＧＡＵＧＡＣＣＡＵＧＣ（配列番号６）のアンチセンス鎖；または
ｄ）配列ＧＵＧＧＣＡＵＵＣＵＡＣＡＵＣＵＵＣＡ（配列番号７）のセンス鎖および配列ＵＧＡＡＧＡＵＧＵＡＧＡＡＵＧＣＣＡＣ（配列番号８）のアンチセンス鎖：
を含む、合成リボ核酸（ＲＮＡ）分子である。
【０００７】
いくつかの実施形態において、合成ＲＮＡ分子は低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）である。いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡは低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）である。いくつかの実施形態において、ｓｈＲＮＡは配列ＵＣＡＡＧＡＧのＲＮＡ（配列番号９）、または、配列ＵＧＵＧＣＵＵのＲＮＡ（配列番号１０）を有するループを含む。
【０００８】
いくつかの実施形態において、合成ＲＮＡ分子は、人工マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）である。いくつかの実施形態において、人工ｍｉＲＮＡは、ＵＧＣＵＧＵＵＧＡＣＡＧＵＧＡＧＣＧＡ（Ｘ）
ｎ
ＵＡＧＵＧＡＡＧＣＣＡＣＡＧＡＵＧＵＡ（Ｙ）
ｎ
ＣＵＧＣＣＵＡＣＵＧＣＣＵＣＧＧＡ（配列番号１９）
のＲＮＡ配列を有し：
ａ）（Ｘ）ｎが配列番号１を含み、（Ｙ）ｎが配列番号２を含む；
ｂ）（Ｘ）ｎが配列番号３を含み、（Ｙ）ｎが配列番号４を含む；
ｃ）（Ｘ）ｎが配列番号５を含み、（Ｙ）ｎが配列番号６を含む；または
ｄ）（Ｘ）ｎが配列番号７を含み、（Ｙ）ｎが配列番号８を含む。
【０００９】
いくつかの実施形態において、上記または本明細書の他の箇所に記載された合成ＲＮＡは、さらに、５’末端および／または３’末端に不対合突出配列を含む。いくつかの実施形態において、不対合突出配列は反復塩基配列を含む。いくかの実施形態において、反復塩基配列は反復ウラシル（Ｕ）塩基を含む。いくつかの実施形態において、不対合突出配列はＵＵである。
【００１０】
いくつかの実施形態において、組成物（例えば、対象に投与するための組成物）は、上記または本明細書の他の箇所に記載された干渉ＲＮＡ（例えば、合成ＲＮＡ分子）の１つ以上（例えば、２、３、または４つ）を含む。いくつかの実施形態において、組成物（例えば、対象に投与するための組成物）は、上記または本明細書の他の箇所に記載された干渉ＲＮＡ(例えば、合成ＲＮＡ分子)の１つ以上（例えば、２、３、または４つ）をコードする核酸（例えば、ＤＮＡ）を含む。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許