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公開番号
2025024779
公報種別
公開特許公報(A)
公開日
2025-02-21
出願番号
2023129033
出願日
2023-08-08
発明の名称
細胞周期同調が可能な油脂生産酵母変異株
出願人
学校法人帝京大学
代理人
個人
主分類
C12N
1/16 20060101AFI20250214BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約
【課題】温度変化により、油脂生産効率の高い特定の細胞周期に同調停止させることができる油脂生産酵母変異株を提供する。
【解決手段】前記変異株は、23~26℃での予備培養後、32~35℃での本培養によりG1期に同調停止するリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株、あるいは、20~23℃での予備培養後、30~32℃での本培養によりG2/M期に同調停止するリポミセス スターキー菌株である。
【選択図】なし
特許請求の範囲
【請求項1】
23~26℃での予備培養後、32~35℃での本培養によりG1期に同調停止するリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
続きを表示(約 450 文字)
【請求項2】
受託番号がNITE BP-03941である、請求項1に記載のリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
【請求項3】
20~23℃での予備培養後、30~32℃での本培養によりG2/M期に同調停止するリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
【請求項4】
受託番号がNITE BP-03942又はNITE BP-03943である、請求項3に記載のリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
【請求項5】
請求項1~4のいずれか一項に記載の菌株を用いることを特徴とする、油脂蓄積誘導方法。
【請求項6】
請求項1~4のいずれか一項に記載の菌株を20~26℃で予備培養した後、続いて、30~35℃で培養する工程
を含む、油脂蓄積誘導方法。
発明の詳細な説明
【技術分野】
【0001】
本発明は、細胞周期同調が可能な油脂生産酵母変異株に関する。
続きを表示(約 2,300 文字)
【背景技術】
【0002】
油脂生産酵母であるリポミセス(Lipomyces)属は、単細胞当たり70%もの油脂を蓄積し、その油脂成分がパーム油に近いことから、バイオ燃料だけでなく、食品や化粧品の代替油脂として利用が見込まれており、急速に研究が進められている。
本発明者は、リポミセスの油脂生産の分子メカニズムの解明を進めたところ、細胞周期G1期で同調することで油脂蓄積量が1.4倍に増加することを見出した(非特許文献1)。
しかしながら、油脂生産効率の高い油脂生産微生物および油脂生産方法への要求は、変わることなく続いている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0003】
Morimoto Y. et al., Journal of Cell Science (2022) 135 (16), jcs259996
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
本発明の課題は、温度変化により、油脂生産効率の高い特定の細胞周期に同調停止させることができる油脂生産酵母変異株を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0005】
前記課題は、以下の本発明により、解決することができる。
[1]23~26℃での予備培養後、32~35℃での本培養によりG1期に同調停止するリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
[2]受託番号がNITE BP-03941である、[1]のリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
[3]20~23℃での予備培養後、30~32℃での本培養によりG2/M期に同調停止するリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
[4]受託番号がNITE BP-03942又はNITE BP-03943である、[3]のリポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)菌株。
[5][1]~[4]のいずれかの菌株を用いることを特徴とする、油脂蓄積誘導方法。
[6][1]~[4]のいずれかの菌株を20~26℃で予備培養した後、続いて、30~35℃で培養する工程を含む、油脂蓄積誘導方法。
【発明の効果】
【0006】
本発明によれば、高価な薬剤処理や特殊な機器を必要とすることなく、温度変化だけで、油脂生産効率の高い特定の細胞周期に同調停止させることができ、この変異株を利用することにより、油脂蓄積の増量を達成することができる。
【図面の簡単な説明】
【0007】
後述の参考例で実施した薬剤処理によるリポミセス スターキーの細胞周期同調において、細胞内トリアシルグリセロール定量の結果を示すグラフである。
後述の実施例2で実施したLs100株、Ls76株、Ls63株、Ls93株のFACS解析による細胞内DNA含量を測定した結果を示すヒストグラムである。
後述の実施例3で実施したLs100株、Ls76株、Ls63株、Ls93株の細胞内トリアシルグリセロール定量の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0008】
(本発明の油脂蓄積酵母変異株)
本発明の油脂蓄積酵母変異株は、リポミセス スターキー(
Lipomyces
starkeyi
)の変異株であり、通常温度での予備培養後、培養中の温度を通常より高く上げると、特定の細胞周期で同調停止させることができる。
本発明の第一の油脂蓄積酵母変異株は、予備培養を23~26℃で行った後、32~35℃に温度を上げ、本培養を行うことにより、G1期に同調停止させることができる。
本発明の第二の油脂蓄積酵母変異株は、予備培養を20~23℃で行った後、30~35℃に温度を上げ、本培養を行うことにより、G2/M期に同調停止させることができる。
【0009】
本発明の第一の油脂蓄積酵母変異株としては、リポミセス スターキーLs76株(受託番号NITE BP-03941)株を挙げることができる。本発明の第二の油脂蓄積酵母変異株としては、Ls63株(受託番号NITE BP-03942)、及びLs93株(受託番号NITE BP-03943)を挙げることができる。これらの変異株は、従来公知のリポミセス属よりも高い油脂蓄積量を示し、効率的な油脂生産菌として使用することができる。前記Ls76株、Ls63株、及びLs93株の菌学的性状は、出芽酵母であり、23℃では良く増殖するが、30℃を越えると増殖停止を引き起こす。
【0010】
(本発明の油脂蓄積誘導方法)
本発明の油脂蓄積誘導方法は、本発明の油脂生産酵母変異株を使用すること、前記変異株を所望の細胞周期(特にはG1期またはG2/M期)で同調停止できる条件で培養を行うこと以外は、従来公知の油脂蓄積誘導方法に従って実施することができる。
例えば、本発明の油脂蓄積誘導方法では、予め予備培養を行っておき、その培養物を適当な油脂蓄積誘導培地に植菌することにより本培養を実施することができる。培養温度は、20~35℃で実施することができ、1~7日間程度振とう培養する。
(【0011】以降は省略されています)
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