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公開番号2024156657
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-11-06
出願番号2024103513,2022059697
出願日2024-06-27,2018-12-14
発明の名称a-syn/IGF1Rに対する二重特異抗体およびその用途
出願人エービーエルバイオインコーポレイテッド
代理人園田・小林弁理士法人
主分類C07K 16/46 20060101AFI20241029BHJP(有機化学)
要約【課題】アルファ-シヌクレインおよびIGF1Rに対する二重特異抗体を提供する。
【解決手段】本発明は、アルファ-シヌクレインおよびIGF1Rに特異的に結合する二重特異抗体を提供し、前記二重特異抗体を用いてアルファ-シヌクレインまたはその凝集体に関連する疾病であるシヌクレイン病の予防、治療および/または診断用途として使用し、アルファ-シヌクレイン抗体またはその抗原結合断片を血液脳関門を通過できるようにして脳でその作用を発揮することができるようにし、半減期を延長して薬効を長期間維持することができるようにする。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
抗ａ－Ｓｙｎ抗体またはその抗原結合断片；および抗ＩＧＦ１Ｒ抗体またはその抗原結合断片を含む、抗ａ－Ｓｙｎ／抗ＩＧＦ１Ｒの二重特異抗体であって、
前記抗ＩＧＦ１Ｒ抗体は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、
前記重鎖可変領域は、配列番号１～配列番号９のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ１（Ｈ－ＣＤＲ１）、配列番号１０～配列番号４９のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ２（Ｈ－ＣＤＲ２）、および配列番号５０～配列番号８０のアミノ酸配列のうちの一つを重鎖ＣＤＲ３（Ｈ－ＣＤＲ３）を含み、
前記軽鎖可変領域は、配列番号９６～配列番号１１３のアミノ酸配列のうちの一つを含む軽鎖ＣＤＲ１（Ｌ－ＣＤＲ１）、配列番号１１４～配列番号１３２のアミノ酸配列のうちの一つを含む軽鎖ＣＤＲ２（Ｌ－ＣＤＲ２）、および配列番号１３３～配列番号１６１のアミノ酸配列のうちの一つを含む軽鎖ＣＤＲ３（Ｌ－ＣＤＲ３）を含むものである、二重特異抗体。
続きを表示（約 3,300 文字）【請求項２】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体またはその抗原結合断片は、ヒトアルファ－シヌクレインタンパク質のＣ－末端領域に特異的に結合するものである、請求項１に記載の二重特異抗体。
【請求項３】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１２６のアミノ酸配列で、Ｎ－末端から１１０番残基～１２０番残基を含む連続する少なくとも１１個のアミノ酸を含むペプチド、または１１１番残基～１２２番残基を含む連続する少なくとも１２個のアミノ酸を含むペプチドに特異的に結合するものである、請求項１に記載の二重特異抗体。
【請求項４】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体またはその抗原結合断片は、
配列番号１および配列番号６のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ１（Ｈ－ＣＤＲ１）、配列番号２～４および配列番号７～８のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ２（Ｈ－ＣＤＲ２）、配列番号５および配列番号９のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ３（Ｈ－ＣＤＲ３）、配列番号１０および配列番号１３のアミノ酸配列のうちの一つを含む軽鎖ＣＤＲ１（Ｌ－ＣＤＲ１）、配列番号１１および配列番号１４のアミノ酸配列のうちの一つを含む軽鎖ＣＤＲ２（Ｌ－ＣＤＲ２）、および
配列番号１２および配列番号１５のアミノ酸配列のうちの一つを含む軽鎖ＣＤＲ３（Ｌ－ＣＤＲ３）を含むものである、請求項１に記載の二重特異抗体。
【請求項５】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体またはその抗原結合断片は、
配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（Ｈ－ＣＤＲ１）、配列番号２～４のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ２（Ｈ－ＣＤＲ２）、および配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３（Ｈ－ＣＤＲ３）を含む重鎖可変領域；および
配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１（Ｌ－ＣＤＲ１）、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２（Ｌ－ＣＤＲ２）、および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３（Ｌ－ＣＤＲ３）を含む軽鎖可変領域を含むものである、請求項４に記載の二重特異抗体。
【請求項６】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体またはその抗原結合断片は、
配列番号６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（Ｈ－ＣＤＲ１）、配列番号７～８のアミノ酸配列のうちの一つを含む重鎖ＣＤＲ２（Ｈ－ＣＤＲ２）、および配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３（Ｈ－ＣＤＲ３）を含む重鎖可変領域；および
配列番号１３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１（Ｌ－ＣＤＲ１）、配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２（Ｌ－ＣＤＲ２）、および配列番号１５のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３（Ｌ－ＣＤＲ３）を含む軽鎖可変領域を含むものである、請求項４に記載の二重特異抗体。
【請求項７】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体の重鎖可変領域は、
配列番号１６～１７および配列番号３５～４０のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ１のＮ－末端側に位置する重鎖可変領域フレームワーク１（Ｈ－ＦＲ１）、
配列番号１８～１９および配列番号４１～４４のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ１とＨ－ＣＤＲ２の間に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ２）、
配列番号２０～３１および配列番号４５～５０のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ２とＨ－ＣＤＲ３の間に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ３）、および
配列番号３２～３４および配列番号５１～５２のアミノ酸配列のうちの一つを含むＨ－ＣＤＲ３のＣ末端に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ４）を含むものである、請求項１に記載の二重特異抗体。
【請求項８】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体の軽鎖可変領域は、
配列番号５３～５８および配列番号７１～７７のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ１のＮ－末端側に位置する軽鎖可変領域フレームワーク１（Ｌ－ＦＲ１）、
配列番号５９～６１および配列番号７８～８１のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ１とＬ－ＣＤＲ２の間に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ２）、
配列番号６２～６７および配列番号８２～８８のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ２とＬ－ＣＤＲ３の間に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ３）、および
配列番号６８～７０および配列番号８９のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ３のＣ末端に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ４）を含むものである、請求項４に記載の二重特異抗体。
【請求項９】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体の重鎖可変領域は、
配列番号１６～のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ１のＮ－末端側に位置する重鎖可変領域フレームワーク１（Ｈ－ＦＲ１）、
配列番号１８～１９のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ１とＨ－ＣＤＲ２の間に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ２）、
配列番号２０～３１のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ２とＨ－ＣＤＲ３の間に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ３）、および
配列番号３２～３４のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ３のＣ末端に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ４）を含むものであり、
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体の軽鎖可変領域は、
配列番号５３～５８のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ１のＮ－末端側に位置する軽鎖可変領域フレームワーク１（Ｌ－ＦＲ１）、
配列番号５９～６１のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ１とＬ－ＣＤＲ２の間に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ２）、
配列番号６２～６７のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ２とＬ－ＣＤＲ３の間に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ３）、および
配列番号６８～７０のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ３のＣ末端に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ４）を含むものである、請求項５に記載の二重特異抗体。
【請求項１０】
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体の重鎖可変領域は、
配列番号３５～４０のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ１のＮ－末端側に位置する重鎖可変領域フレームワーク１（Ｈ－ＦＲ１）、
配列番号４１～４４のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ１とＨ－ＣＤＲ２の間に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ２）、
配列番号４５～５０のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ２とＨ－ＣＤＲ３の間に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ３）、および
配列番号５１～５２のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｈ－ＣＤＲ３のＣ末端に位置する重鎖可変領域フレームワーク（Ｈ－ＦＲ４）を含むものであり、
前記抗ａ－Ｓｙｎ抗体の軽鎖可変領域は、
配列番号７１～７７のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ１のＮ－末端側に位置する軽鎖可変領域フレームワーク１（Ｌ－ＦＲ１）、
配列番号７８～８１のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ１とＬ－ＣＤＲ２の間に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ２）、
配列番号８２～８８のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ２とＬ－ＣＤＲ３の間に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ３）、および
配列番号８９のアミノ酸配列のうちの一つを含む、Ｌ－ＣＤＲ３のＣ末端に位置する軽鎖可変領域フレームワーク（Ｌ－ＦＲ４）を含むものである、請求項６に記載の二重特異抗体。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、アルファ－シヌクレインおよびＩＧＦ１Ｒに対する二重特異抗体、前記二重特異抗体を含むシヌクレイン病（α－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ）の予防および／または治療用薬学的組成物、および前記二重特異抗体を含むアルファ－シヌクレイン凝集体検出またはシヌクレイン病診断のための情報を提供する方法に関するものである。
続きを表示（約 1,700 文字）【背景技術】
【０００２】
アルファ－シヌクレイン（α－Ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ、α－ｓｙｎ）は、ニューロンの前シナプス末端で主に発現し、正常状態では自然に折り畳まれていない状態の単量体として存在する。アルファ－シヌクレインは、随意および不随意運動の開始と停止を制御する重要な一種の神経伝達物質であるドーパミンの放出を規制することを助ける。特に、アルファ－シヌクレインの機能はシナプス活動の増加および年を取るにつれて重要であり、神経退化の重要な因子である。
【０００３】
しかし、病的な状態でアルファ－シヌクレインは、液滴（ｄｒｏｐｌｅｔ）、リン脂質二重膜または脂質膜などとの結合および相互作用により構造的変化を起こして折りたたまれた、またはフォールディングされたα－ヘリカル形態の２次構造を形成して、二量体（ｄｉｍｅｒ）、オリゴマー（ｏｌｉｇｏｍｅｒ）および／または線維状形態の分子を含む凝集体を形成するようになる。
【０００４】
このようなアルファ－シヌクレイン凝集体は、細胞に毒性を誘発することが知られており、パーキンソン病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅ、ＰＤ）、パーキンソン疾患性認知症（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅｄｅｍｅｎｔｉａ、ＰＤＤ）、多系統萎縮症（ｍｕｌｔｉｐｌｅｓｙｓｔｅｍａｔｒｏｐｈｙ、ＭＳＡ）、レビー小体認知症（ｄｅｍｅｎｔｉａｗｉｔｈＬｅｗｙｂｏｄｉｅｓ、ＤＬＢ）、その他多様な疾患の神経細胞内で発見される異常なタンパク質凝集体であるレビー小体の主成分である。また、アルファ－シヌクレインのリン酸化、またはユビキチン化のような翻訳後修飾も、アルファ－シヌクレインの凝集および神経毒性と関連があることが知られている。アルファ－シヌクレインは、動物実験および細胞実験でもドーパミン神経細胞を死滅させて炎症反応を誘発し、実験動物でパーキンソン病症と類似の運動症状を誘発することが知られている。また、アルファ－シヌクレイン凝集は、パーキンソン病、パーキンソン疾患性認知症、レビー小体認知症、多系統萎縮症およびその他多数の神経軸索疾患を含むシヌクレイン病（α－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ）と呼ばれる一群の神経退行性疾患の病因と関連があることが知られている。
【０００５】
アルファ－シヌクレインに対する抗体またはそのような抗体を誘導するためのアルファ－シヌクレインの切片は、シヌクレイン病に対する免疫療法の方法として提案されてきた。しかし、抗体の脳浸透は、血液脳関門（ＢＢＢ）によって制限されることがある。
【０００６】
また、高度－特異性のＢＢＢ輸送体の欠乏は、脳腫瘍および神経変性疾患を含む脳から起こる疾患のための新たな治療剤および診断剤の開発を遅延させている。ＢＢＢの生理学および恒常性を崩壊させないながら、脳に薬学的に効能のある投与量で治療剤および診断剤分子を伝達するための方法に対する必要性が明らかに存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の一例は、アルファ－シヌクレイン（ａ－Ｓｙｎ）に対する抗原結合部位およびＩＧＦ１Ｒに対する抗原結合部位を含むタンパク質複合体または前記タンパク質複合体の製造方法を提供する。
【０００８】
他の例は、前記タンパク質複合体をコーディングするポリヌクレオチド、これを含む組換えベクター、およびこれを含む組換え細胞を提供する。
【０００９】
また他の例は、前記タンパク質複合体から得られるａ－ＳｙｎおよびＩＧＦ１Ｒに対する二重特異抗体およびその製造方法を提供する。
【００１０】
また他の例は、前記ａ－ＳｙｎおよびＩＧＦ１Ｒに対する二重特異抗体と、薬学的に許容可能な賦形剤を含む、アルファ－シヌクレイン病（α－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ）の予防および／または治療用薬学的組成物を提供する。
（【００１１】以降は省略されています）

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