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公開番号2024059646
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-05-01
出願番号2024014317,2020558493
出願日2024-02-01,2019-04-29
発明の名称カンナビノイド受容体1型(CB1)結合性タンパク質及びその使用
出願人武田薬品工業株式会社
代理人弁理士法人清原国際特許事務所
主分類C12N 15/13 20060101AFI20240423BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】抗CB1抗体またはその抗原結合性断片を含む、天然に存在しない単離された操作CB1結合性タンパク質を提供する。CB1結合性タンパク質は、CB1媒介性の容態、疾患及び障害の処置及び診断において有用性を有する。
【解決手段】可変重(VH)ドメイン配列のCDR及び可変軽(VL)ドメイン配列のCDRを含む、ヒトカンナビノイド1型受容体(CB1)に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片を提供する。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
ヒトカンナビノイド１型受容体（ＣＢ１）（配列番号１）に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片であって、その結合性タンパク質が６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）：ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含み、その際、
ＣＤＲ－Ｈ１は、アミノ酸配列Ｇ－Ｙ－Ｔ－Ｆ－Ｔ－Ｄ－Ｙ－Ｗ（配列番号３２９の残基２６～３３）または少なくとも１個のアミノ酸残基の置換による前記アミノ酸配列の改変形態を有し、その際、１位でのＧの置換はＳであり；３位でのＴの置換はＥであり；５位でのＴの置換はＳまたはＮであり；６位でのＤの置換はＲまたはＹであり；７位でのＹの置換はＨであり；かつ８位でのＷの置換はＡまたはＮであり；
ＣＤＲ－Ｈ２は、アミノ酸配列Ｉ－Ｙ－Ｐ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｄ－Ｔ（配列番号３２９の残基５１～５８）または少なくとも１個のアミノ酸残基の置換による前記アミノ酸配列の改変形態を有し、その際、１位でのＩの置換はＦであり；２位でのＹの置換はＤ、Ｓ、またはＴであり；３位でのＰの置換はＴであり；４位でのＹの置換はＧ、Ｄ、またはＳであり；５位でのＤの置換はＹまたはＳであり；６位でのＧの置換はＳであり；７位でのＤの置換はＥ、Ｇ、またはＲであり；かつ８位でのＴの置換はＡ、Ｓ、またはＩであり；
ＣＤＲ－Ｈ３は、アミノ酸配列Ａ－Ｒ－Ｇ－Ｘ
１
－Ｘ
２
－Ｘ
３
－Ｘ
４
－Ｘ
５
－Ｘ
６
－Ｘ
７
－Ｘ
８
－Ｘ
９
－Ｗ－Ｘ
１０
－Ｘ
１１
－Ｙ（配列番号３２９の残基９８～１１３）または少なくとも１個のアミノ酸残基の置換による前記アミノ酸配列の改変形態を有し、その際、１位でのＡの置換はＳであり；３位でのＧの置換はＳであり；４位でのＸ
１
はＱ、Ｙ、Ｋ、Ｒ、もしくはＧであるか、または存在せず；５位でのＸ
２
はＥ、Ｙ、ＬもしくはＧであるか、または存在せず；６位でのＸ
３
はＹもしくはＰであるか、または存在せず；７位でのＸ
４
はＹ、Ｒ、もしくはＥであるか、または存在せず；８位でのＸ
５
はＧであるか、または存在せず；９位でのＸ
６
はＴであるか、または存在せず；１０位でのＸ
７
はＮもしくはＤであるか、または存在せず；１１位でのＸ
８
はＹ、Ｎ、Ａ、もしくはＧであるか、または存在せず；１２位でのＸ
９
はＮ、Ｙ、Ｓ、Ａ、もしくはＲであるか、または存在せず；１３位でのＷの置換はＹ、Ａ、またはＰであり；１４位でのＸ
１０
はＬ、Ｍ、Ｆ、もしくはＧであるか、または存在せず；１５位でのＸ
１１
はＰ、Ｄ、Ａ、もしくはＴであるか、または存在せず；１６位でのＹの置換はＶであり；
ＣＤＲ－Ｌ１は、アミノ酸配列Ｑ－Ｘ
１
－Ｉ－Ｓ－Ｓ－Ｘ
２
－Ｙ（配列番号３３０の残基２７～３３）または少なくとも１個のアミノ酸残基の置換による前記アミノ酸配列の改変形態を有し、その際、１位でのＱの置換はＳまたはＥであり；２位でのＸ
１
はＥ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｇ、またはＲであり；３位でのＩの置換はＶであり；４位でのＳの置換はＡ、Ｒ、またはＧであり；５位でのＳの置換はＧ、Ｎ、またはＴであり；６位でのＸ
２
はＳ、Ｎ、ペプチドＦ－Ｒ－Ｙ－Ｓであるか、または存在せず；かつ７位でのＹの置換はＦ、Ｄ、またはＮであり；
ＣＤＲ－Ｌ２は、アミノ酸配列：Ｘ
１
－Ｔ－Ｓ（配列番号３３０の残基５１～５３）または少なくとも１個のアミノ酸残基の置換による前記アミノ酸配列の改変形態を有し、その際、１位でのＸ
１
はＡ、Ｙ、Ｇ、Ｒ、Ｄ、またはＳであり；２位でのＴの置換はＡであり；３位でのＳの置換はＲであり；かつ
ＣＤＲ－Ｌ３は、アミノ酸配列：Ｑ－Ｑ－Ｙ－Ｘ
１
－Ｓ－Ｘ
２
－Ｐ－Ｙ－Ｔ（配列番号３３０の残基９１～９９）または少なくとも１個のアミノ酸残基の置換による前記アミノ酸配列の改変形態を有し、その際、１位でのＱの置換はＬまたはＨであり；２位でのＱの置換はＨであり；３位でのＹの置換はＳまたはＧであり；４位でのＸ
１
はＳ、Ｗ、Ｈ、Ｙ、Ｎ、またはＩであり；５位でのＳの置換はＥ、Ｒ、Ｇ、Ｔ、またはＮであり；６位でのＸ
２
はＹ、Ｉ、Ｓ、Ｔ、Ｌ、またはＷであり；かつ８位でのＹの置換はＰ、Ｌ、Ｆであるか、または存在せず；かつその際、少なくとも１個のアミノ酸残基の前記置換、付加、または欠失が、ヒトＣＢ１に結合する前記抗体またはその抗原結合性断片の能力を阻害しない、前記単離抗体またはその抗原結合性断片。
続きを表示（約 3,600 文字）【請求項２】
ヒトカンナビノイド１型受容体（ＣＢ１）（配列番号１）に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片であって、前記抗体が可変重（ＶＨ）ドメイン配列のＣＤＲ及び可変軽（ＶＬ）ドメイン配列のＣＤＲを含み、その際、前記ＶＨドメイン配列が、配列番号１８、３０、４２、５４、６６、７８、９０、１０２、１１４、１２６、１３８、１５０、１６２、１７４、１８６、１９８、２１０、２２２、２３４、２４６、２５８、２７０、２８２、２９４、３０６、及び３１８からなる群から選択され、及び／または前記ＶＬドメインが、配列番号２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、１２０、１３２、１４４、１５６、１６８、１８０、１９２、２０４、２１６、２２８、２４０、２５２、２６４、２７６、２８８、３００、３１２、及び３２４からなる群から選択される、前記単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項３】
ヒトカンナビノイド１型受容体（ＣＢ１）（配列番号１）に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片であって、前記抗体が可変重（ＶＨ）ドメイン配列及び可変軽（ＶＬ）ドメイン配列を含み、その際、前記ＶＨドメイン配列が、配列番号１８、３０、４２、５４、６６、７８、９０、１０２、１１４、１２６、１３８、１５０、１６２、１７４、１８６、１９８、２１０、２２２、２３４、２４６、２５８、２７０、２８２、２９４、３０６、及び３１８からなる群から選択され、及び／または前記ＶＬドメインが、配列番号２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、１２０、１３２、１４４、１５６、１６８、１８０、１９２、２０４、２１６、２２８、２４０、２５２、２６４、２７６、２８８、３００、３１２、及び３２４からなる群から選択される、前記単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項４】
配列番号１８／２４、３０／３６、４２／４８、５４／６０、６６／７２、７８／８４、９０／９６、１０２／１０８、１１４／１２０、１２６／１３２、１３８／１４４、１５０／１５６、１６２／１６８、１７４／１８０、１８６／１９２、１９８／２０４、２１０／２１６、２２２／２２８、２３４／２４０、２４６／２５２、２５８／２６４、２７０／２７６、２８２／２８８、２９４／３００、３０６／３１２、及び３１８／３２４からなる群から選択されるＶＨ／ＶＬ対の重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む、請求項３に記載の単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項５】
配列番号１８／２４、３０／３６、４２／４８、５４／６０、６６／７２、７８／８４、９０／９６、１０２／１０８、１１４／１２０、１２６／１３２、１３８／１４４、１５０／１５６、１６２／１６８、１７４／１８０、１８６／１９２、１９８／２０４、２１０／２１６、２２２／２２８、２３４／２４０、２４６／２５２、２５８／２６４、２７０／２７６、２８２／２８８、２９４／３００、３０６／３１２、及び３１８／３２４からなる群から選択されるＶＨ／ＶＬ対を含む、請求項４に記載の単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項６】
（２０、２１、２２）；（３２、３３、３４）；（４４、４５、４６）；（５６、５７、５８）；（６８、６９、７０）；（８０、８１、８２）；（９２、９３、９４）；（１０４、１０５、１０６）；（１１６、１１７、１１８）；（１２８、１２９、１３０）；（１４０、１４１、１４２）；（１５２、１５３、１５４）；（１６４、１６５、１６６）；（１７６、１７７、１７８）；（１８８、１８９、１９０）；（２００、２０１、２０２）；（２１２、２１３、２１４）；（２２４、２２５、２２６）；（２３６、２３７、２３８）；（２４８、２４９、２５０）；（２６０、２６１、２６２）；（２７２、２７３、２７４）；（２８４、２８５、２８６）；（２９６、２９７、２９８）；（３０８、３０９、３１０）；及び（３２０、３２１、３２２）からなる群から選択されるＨＣＤＲセット（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）ならびに（２６、２７、２８）；（３８、３９、４０）；（５０、５１、５２）；（６２、６３、６４）；（７４、７５、７６）；（８６、８７、８８）；（９８、９９、１００）；（１１０、１１１、１１２）；（１２２、１２３、１２４）；（１３４、１３５、１３６）；（１４６、１４７、１４８）；（１５８、１５９、１６０）；（１７０、１７１、１７２）；（１８２、１８３、１８４）；（１９４、１９５、１９６）；（２０６、２０７、２０８）；（２１８、２１９、２２０）；（２３０、２３１、２３２）；（２４２、２４３、２４４）；（２５４、２５５、２５６）；（２６６、２６７、２６８）；（２７８、２７９、２８０）；（２９０、２９１、２９２）；（３０２、３０３、３０４）；（３１４、３１５、３１６）；及び（３２６、３２７、３２８）からなる群から選択されるＬＣＤＲセット（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を含む、請求項３に記載の単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項７】
配列番号（２０、２１、２２／２６、２７、２８）；（３２、３３、３４／３８、３９、４０）；（４４、４５、４６／５０、５１、５２）；（５６、５７、５８／６２、６３、６４）；（６８、６９、７０／７４、７５、７６）；（８０、８１、８２／８６、８７、８８）；（９２、９３、９４／９８、９９、１００）；（１０４、１０５、１０６／１１０、１１１、１１２）；（１１６、１１７、１１８／１２２、１２３、１２４）；（１２８、１２９、１３０／１３４、１３５、１３６）；（１４０、１４１、１４２／１４６、１４７、１４８）；（１５２、１５３、１５４／１５８、１５９、１６０）；（１６４、１６５、１６６／１７０、１７１、１７２）；（１７６、１７７、１７８／１８２、１８３、１８４）；（１８８、１８９、１９０／１９４、１９５、１９６）；（２００、２０１、２０２／２０６、２０７、２０８）；（２１２、２１３、２１４／２１８、２１９、２２０）；（２２４、２２５、２２６／２３０、２３１、２３２）；（２３６、２３７、２３８／２４２、２４３、２４４）；（２４８、２４９、２５０／２５４、２５５、２５６）；（２６０、２６１、２６２／２６６、２６７、２６８）；（２７２、２７３、２７４／２７８、２７９、２８０）；（２８４、２８５、２８６／２９０、２９１、２９２）；（２９６、２９７、２９８／３０２、３０３、３０４）；（３０８、３０９、３１０／３１４、３１５、３１６）；及び（３２０、３２１、３２２／３２６、３２７、３２８）からなる群から選択される（ＨＣＤＲセット／ＬＣＤＲセット）対を含む、請求項６に記載の単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項８】
配列番号１７／２３、２９／３５、４１／４７、５３／５９、６５／７１、７７／８３、８９／９５、１０１／１０７、１１３／１１９、１２５／１３１、１３７／１４３、１４９／１５５、１６１／１６７、１７３／１７９、１８５／１９１、１９７／２０３、２０９／２１５、２２１／２２７、２３３／２３９、２４５／２５１、２５７／２６３、２６９／２７５、２８１／２８７、２８３／２８９、３０５／３１１、及び３１７／３２３からなる群から選択されるＨＣ／ＬＣ対を含む、請求項７に記載の単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項９】
ヒトカンナビノイド１型受容体（ＣＢ１）（配列番号１）に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片であって、前記抗体が可変重（ＶＨ）ドメイン配列のＣＤＲ及び可変軽（ＶＬ）ドメイン配列のＣＤＲを含み、その際、前記ＶＨドメイン配列が、配列番号１８、３０、４２、５４、６６、７８、９０、１０２、１１４、１２６、１３８、１５０、１６２、１７４、１８６、１９８、２１０、２２２、２３４、２４６、２５８、２７０、２８２、２９４、３０６、及び３１８からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を有し、及び／または前記ＶＬドメイン配列が、配列番号２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、１２０、１３２、１４４、１５６、１６８、１８０、１９２、２０４、２１６、２２８、２４０、２５２、２６４、２７６、２８８、３００、３１２、及び３２４からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を有する、前記単離抗体またはその抗原結合性断片。
【請求項１０】
前記ＶＨが配列番号１１４で示され、かつ前記ＶＬが配列番号１２０で示される、請求項９に記載の単離抗体またはその抗原結合性断片。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる２０１８年４月３０日出願の米国特許仮出願第６２／６６４，８８２号に対する優先権の利益を主張するものである。
続きを表示（約 2,500 文字）【０００２】
本発明は、カンナビノイド受容体１型（ＣＢ１）結合性タンパク質及びその使用に関する。
【０００３】
参照による組み込み
本出願を通じて引用され得るすべての引用参照文献（参考文献、特許、特許出願、及びウェブサイトを含む）の内容は、その全体があらゆる目的のために参照により明らかに本明細書に組み込まれ、そこで引用されている参照文献も同様である。本開示は、別段に示されていない限り、当技術分野で周知である免疫学、分子生物学、細胞生物学、医薬品開発及び薬物送達の従来の技術を使用することとする。
【背景技術】
【０００４】
カンナビノイド受容体１型（ＣＢ１）は、主に脳において、さらには末梢では肺、肝臓、腎臓、及び脂肪組織において発現するＧタンパク質共役受容体スーパーファミリーの７回膜貫通型細胞膜受容体である。ＣＢ１は、エンドカンナビノイドと呼ばれる体内で天然に生成するカンナビノイド（エイコシノイド（ｅｉｃｏｓｉｎｏｉｄ）など）、もしくは体内に導入されるカンナビノイド（カンナビスなど）、または関連合成化合物により活性化される。カンナビノイドは、ＣＢ１に可逆的に、かつ立体選択的に結合する。ＣＢ１に係合した後に、複数の細胞内シグナル伝達経路が活性化されて、アデニリルシクラーゼの阻害及びマイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼの活性化、プレシナプスＮ型及びＰ／Ｑ型カルシウムチャネル及びＤ型外向きカリウムチャネルの阻害、ならびに内向き整流及びＡ型外向きカリウムチャネルの活性化が生じる。ＣＢ１の発現は、過剰なニューロン活性の発生を阻止するように神経伝達物質の放出を調節して、疼痛及び他の炎症性症状を減少させ、さらには、食物摂取を調節すると考えられる。
【０００５】
異常なＣＢ１活性は、脂質異常症、糖尿病、線維症、脂肪肝などの肝臓疾患、腎臓疾患、心臓血管疾患及びがんなどの肥満及び関連障害を含むいくつかの疾患に関係している。
【０００６】
プラダー・ウィリー症候群（ＰＷＳ）は、ある特定の父系遺伝子の欠損が原因の遺伝性障害であり、肥満、２型糖尿病、発育の遅れ、及び筋力低下により特徴づけられる。ＣＢ－１は、ＰＷＳにおいて、インバースアゴニストであるリモナバンの標的として確認された（Ｍｏｔａｇｈｅｄｉｅｔａｌ．（２０１１）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．５４：１４－１８）。リモナバン（ＳＲ１４１７１６、Ａｃｏｍｐｌｉａ、及びＺｉｍｕｌｔｉとも呼ばれる）は、経口中枢ＣＢ１アンタゴニストとしてＳａｎｏｆｉ－Ａｖｅｎｔｉｓにより開発及び発売された食欲抑制抗肥満薬であった。この製品は、食事及び運動と併せて、２型糖尿病または脂質異常症などの関連リスク因子を有する肥満及び過体重の患者の処置に適応とされた。２００６年６月に、この薬物はＥＭＥＡにより肥満について認可された。２００８年に、Ｓａｎｏｆｉ－Ａｖｅｎｔｉｓは、自殺念慮を含む重篤な精神医学的問題のリスクにより、この薬物のすべての開発及びマーケティングをすべての適応症について中断した。２００９年１月に、ＥＣは、この薬物の販売許可を停止した。
【０００７】
別のインバースアゴニストであるタラナバント（ＭＫ－０３６４）がＭｅｒｃｋにより研究されたが、その第３相治験は、うつ病及び不安を含む高レベルの副作用により中止された。数種の他のＣＢ１インバースアゴニスト（例えば、ＡＭ２５１、ＡＭ１３８７、及びＡＭ４１１３）及びアンタゴニスト（例えば、カンナビゲロール、イビピナバント、オテナバント、スリナバント、テトラヒドロカンナビバリン、及びビロダミン）が研究されているが、それらは研究の初期段階にあるか、またはＣＮＳ副作用により、非ヒト研究に格下げされている。
【０００８】
血液脳関門（ＢＢＢ）を超えるＣＢ－１インバースアゴニスト／アンタゴニストの能力を制限することにより、主に末梢で発現するＣＢ１を標的とする、いくつかのＣＢ－１インバースアゴニスト／アンタゴニストが開発中である。例えば、ＴＭ－３８８３７は、肥満及び代謝障害を処置するために７ＴＭＰｈａｒｍａＡ／Ｓが開発中の第１相のＣＢ１のインバースアゴニスト／アンタゴニストである。まだ臨床に入っていない別の末梢選択的サイレントアンタゴニストは、ＡＭ６５４５である。末梢選択的ＣＢ－１アンタゴニズムは、いくつかの組織における末梢エンドカンナビノイド作用、すなわち（１）肝臓－脂質生成、脂肪蓄積、及びグルコース分泌の減少；（２）筋肉－グルコース取り込み及び酸化の増加；（３）脂肪細胞－脂質生成及び脂肪蓄積の減少；アディポネクチン合成の減少；ならびに（４）胃腸（ＧＩ）－満腹、ＧＩ通過及び吸収の増加（ＫｌｏｅｔａｎｄＷｏｏｄｓ（２００９）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１５０：２５３１－２５３６）を標的とするための、より安全かつより有効な方法であり得る。
【０００９】
抗体及び関連結合性タンパク質などの生体分子は、治療薬を送達し、かつＣＮＳ障害及び副作用を回避するための、潜在的により安全かつ有効な方法を提供する。一般に、循環抗体のうちの約０．１％のみが、インタクトなＢＢＢを超える（Ｐｏｄｕｓｌｏｅｔａｌ．（１９９４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９１：５７０５－５７０９；ＹｕａｎｄＷａｔｔｓ（２０１３）Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔ．１０：４５９－４７２）。したがって、ＣＮＳへの機能性抗ＣＢ１生物製剤の本質的に低い曝露は、もっぱら末梢でＣＢ－１に係合し、それにより、ＣＮＳにおいて小分子の薬理により駆動される有害事象を制限する機会を提供する。
【００１０】
最近、ＣＢ１に対する抗体が当技術分野で記載されているが、臨床におけるそれらの利点は分かっていない。米国特許出願公開第２０１７０２１０７９７号及び同第２０１６０１４５３３３号を参照されたい。
（【００１１】以降は省略されています）

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