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公開番号2023113888
公報種別公開特許公報(A)
公開日2023-08-16
出願番号2023094901,2022200549
出願日2023-06-08,2017-12-20
発明の名称多量体ポリペプチド、ホモ二量体及び医薬組成物
出願人キューバイオファーマ, インコーポレイテッド
代理人個人,個人
主分類C07K 19/00 20060101AFI20230808BHJP(有機化学)
要約【課題】変異免疫調節ポリペプチド、及び変異免疫調節ペプチドを含む融合ポリペプチドを提供する。
【解決手段】多量体ポリペプチドであって、i)ヒトパピローマウイルス(HPV)エピトープ、及びii)β2-マイクログロブリン(β2M)ポリペプチドである、第1のクラスI/主要組織適合抗原複合体(MHC)ポリペプチドを含む第1のポリペプチドと、i)MHCクラスI/HLA-A重鎖ポリペプチドである、第2のクラスI/MHCポリペプチド、ii)少なくとも1つの免疫調節ポリペプチド、及びiii)免疫グロブリン(Ig)Fcポリペプチドを含む第2のポリペプチドとを含むヘテロ二量体を含んでいる、多量体ポリペプチドである。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
多量体ポリペプチドであって、
ｉ）ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）エピトープ、及び
ｉｉ）β２－マイクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドである、第１のクラスＩ主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む第１のポリペプチドと、
ｉ）ＭＨＣクラスＩＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチドである、第２のクラスＩＭＨＣポリペプチド、
ｉｉ）配列番号４４に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％のパーセントアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む少なくとも１つの免疫調節ポリペプチドであって、アミノ酸１６はＡｌａであり、アミノ酸４２はＡｌａであり、パーセント配列同一性はＢＬＡＳＴを用いてなされる配列のアライメントにより決定可能である、少なくとも１つの免疫調節ポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含む第２のポリペプチドと
を含むヘテロ二量体を含んでいる、
多量体ポリペプチド。
続きを表示（約 1,100 文字）【請求項２】
前記ＨＰＶエピトープは、ＨＰＶＥ７エピトープである、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３】
前記β２Ｍポリペプチドは、配列番号９５のアミノ酸２１～１１９に対して少なくとも９５％のパーセントアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項４】
前記β２Ｍポリペプチドは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項５】
前記ＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチドは、配列番号１９に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％のパーセントアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでおり、パーセント配列同一性はＢＬＡＳＴを用いてなされる配列のアライメントにより決定可能である、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項６】
前記ＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチドは、配列番号１９に示される番号付けに基づくと、前記ＭＨＣクラスＩＨＬＡ－Ａ重鎖ポリペプチドの残基２３６にＣｙｓを含む、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項７】
前記ＩｇＦｃポリペプチドは、配列番号５７に対して少なくとも９５％のパーセントアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでおり、パーセント配列同一性はＢＬＡＳＴを用いてなされる配列のアライメントにより決定可能である、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項８】
前記ＩｇＦｃポリペプチドは、配列番号５７に示されるアミノ酸の番号付けに基づいたＬ１４Ａ置換及びＬＩ５Ａ置換を含む、請求項７に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項９】
変異ＩＬ－２ポリペプチドの２つのコピーを含んでおり、各コピーは配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１０】
前記第１のポリペプチドは、前記ＨＰＶエピトープと前記β２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含んでおり、
前記第２のポリペプチドは、
ａ）前記変異ＩＬ－２ポリペプチドの第１のコピー、及び前記変異ＩＬ－２ポリペプチドの第２のコピー、
ｂ）前記変異ＩＬ－２ポリペプチドの２つのコピーのうちの１つ、及び前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド、並びに、
ｃ）前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチド、及び前記ＩｇＦｃポリペプチド、
の１つまたは複数の間に独立的に選択されたペプチドリンカーを含む、
請求項９に記載の多量体ポリペプチド。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【背景技術】
【０００１】
適応免疫応答は、Ｔ細胞の表面に存在するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と、主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ；ヒトにおいてはヒト白血球抗原（ＨＬＡ）複合体とも称される）によって抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面に非共有結合で存在する小さなペプチド抗原との結合を伴う。この結合は、免疫系の標的化機構に相当するものであり、Ｔ細胞の調節（活性化または抑制）及びエフェクター機能に必要な分子相互作用である。エピトープ特異的な細胞標的化に続き、ＡＰＣに見られる共刺激タンパク質と、Ｔ細胞の対応する共刺激タンパク質との結合を介して標的化Ｔ細胞が活性化される。
続きを表示（約 7,100 文字）【０００２】
Ｔ細胞の特異性及び活性化または抑制を誘導するためには、エピトープ／ＴＣＲ結合と、ＡＰＣの共刺激タンパク質及びＴ細胞の共刺激タンパク質の結合との両方のシグナルが必要である。ＴＣＲは所与のエピトープに特異的であるが、共刺激タンパク質はエピトープ特異的ではなく、代わりに、すべてのＴ細胞または大きなＴ細胞サブセットに一般に発現する。
【発明の概要】
【０００３】
本開示は、変異免疫調節ポリペプチド、及び変異免疫調節ペプチドを含む融合ポリペプチドを提供する。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド、及びＴ細胞調節多量体ポリペプチドを含む組成物を提供し、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、本開示の変異免疫調節ポリペプチドを含む。
【０００４】
本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、及び核酸を含む宿主細胞を提供する。本開示は、Ｔ細胞の活性の調節方法を提供し、この方法は、Ｔ細胞と、本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドとの接触を含む。
【図面の簡単な説明】
【０００５】
Ａ～Ｄは、本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドのさまざまな実施形態を模式的に示す。これらの実施形態では、別々のポリペプチドに存在するＭＨＣ（例えば、ＨＬＡ）ポリペプチドの間にジスルフィド結合が形成される。
Ａ～Ｄは、野生型ヒトＩＬ－２のアミノ酸配列（Ａ）、及び変異ＩＬ－２ポリペプチドのアミノ酸配列（Ｂ～Ｄ）を示す。
Ｅ～Ｈは、変異ＩＬ－２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
Ｉ～Ｌは、変異ＩＬ－２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
Ｍ～Ｐは、変異ＩＬ－２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
Ｑは、変異ＩＬ－２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
Ａ及びＢは、ＩＬ－２受容体のアルファ鎖、及びＩＬ－２受容体のベータ鎖のアミノ酸配列を示す。
Ｃは、ＩＬ－２受容体のガンマ鎖のアミノ酸配列を示す。
免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
Ａ及びＢは、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。シグナル配列には下線が引かれている。
Ｃは、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。シグナル配列には下線が引かれている。
Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ＮＰ＿００４０３９．１；配列番号９５）、Ｐａｎｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ（ＮＰ＿００１００９０６６．１；配列番号９６）、Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ（ＮＰ＿００１０４０６０２．１；配列番号９７）、ＢｏｓＴａｕｒｕｓ（ＮＰ＿７７６３１８．１；配列番号９８）、及びＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（ＮＰ＿０３３８６５．２；配列番号９９）に由来するベータ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）前駆体（すなわち、リーダー配列を含む）の複数のアミノ酸配列のアライメントを示す。アミノ酸１～２０は、シグナルペプチドである。
一過性の遺伝子導入の後の本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ（「Ｃｕｅ－ＩＬ－２－ａ」及び「Ｃｕｅ－ＩＬ－２－ｂ」）の産生（未精製収量）を示す。
一過性の遺伝子導入の後の本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ（「Ｃｕｅ－ＩＬ－２－ａ」及び「Ｃｕｅ－ＩＬ－２－ｂ」）の産生（精製産物）を示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの産生を示し、これらのＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃでは、ＩＬ－２ポリペプチドは、軽鎖（ＭＨＣクラスＩ分子の軽鎖（例えば、β２Ｍ）を含むポリペプチド鎖）または重鎖（ＭＨＣクラスＩ分子の重鎖を含むポリペプチド鎖）に存在する。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの産生を示し、これらのＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃでは、ＩＬ－２ポリペプチドは、軽鎖（ＭＨＣクラスＩ分子の軽鎖（例えば、β２Ｍ）を含むポリペプチド鎖）または重鎖（ＭＨＣクラスＩ分子の重鎖を含むポリペプチド鎖）に存在する。
ＩＬ－２／ｓｙｎ－Ｔａｃの発現レベルを示し、これらのＩＬ－２／ｓｙｎ－Ｔａｃでは、ＩＬ－２は、野生型（ｗｔ）であるか、またはＦ４２Ａ、Ｄ２０Ｋ、Ｑ１２６Ａ、Ｅ１５Ａ、Ｙ４５Ａ、及びＨ１６Ａのさまざまな組み合わせを含む。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの発現を示し、これらのＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃでは、ＩＬ－２の１つのコピー（１Ｘ）、２つのコピー（２Ｘ）、または３つのコピー（３Ｘ）がｓｙｎＴａｃに存在する。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃによる抗原特異的ＣＤ８
+
Ｔ細胞及び非特異的ＣＤ８
+
Ｔ細胞のインビトロの刺激を示し、ここでは、Ｆ４２Ａ置換及びＨ１６Ａ置換を含むＩＬ－２変異体の２つのコピーがｓｙｎＴａｃに存在する。
特異的（リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ））ＣＤ８
+
Ｔ細胞または非特異的（ＯＴ１（オボアルブミン認識））ＣＤ８
+
Ｔ細胞に対するＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの結合を示す。
抗原特異的（ＬＣＭＶ）ＣＤ８
+
Ｔ細胞または非特異的（ＢＬ６）ＣＤ８
＋
Ｔ細胞におけるＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ介在性のシグナル伝達を示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃをさまざまなＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いてＣＤ８
+
抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞またはＣＤ８
+
非特異的（ＢＬ６）細胞を刺激した後のリン酸化シグナル伝達兼転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃをさまざまなＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いてＣＤ８
+
抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞またはＣＤ８
+
非特異的（ＢＬ６）細胞を刺激した後のリン酸化シグナル伝達兼転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃをさまざまなＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いてＣＤ８
+
抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞またはＣＤ８
+
非特異的（ＢＬ６）細胞を刺激した後のリン酸化シグナル伝達兼転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃをさまざまなＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いてＣＤ８
+
抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞またはＣＤ８
+
非特異的（ＢＬ６）細胞を刺激した後のリン酸化シグナル伝達兼転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃをさまざまなＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いてＣＤ８
+
抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞またはＣＤ８
+
非特異的（ＢＬ６）細胞を刺激した後のリン酸化シグナル伝達兼転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃをさまざまなＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いてＣＤ８
+
抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞またはＣＤ８
+
非特異的（ＢＬ６）細胞を刺激した後のリン酸化シグナル伝達兼転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃのインビボの活性を示す。左パネルは、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、組換えＩＬ－２（ｒＩＬ－２）、または本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃを投与した後の抗原特異的ＣＤ８
+
Ｔ細胞の数の倍率変化を示す。右パネルは、ＰＢＳ、ｒＩＬ－２、または本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃを投与した後の抗原特異的な応答及び抗原非特異的な応答を示す。
用量漸増による影響を示す。
投与経路による影響を示す。
腫瘍に対するインビボの効力に与えるＩＬ－２のコピー数の影響を示す。
腫瘍に対するインビボの効力に与えるＩＬ－２のコピー数の影響を示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃを１０ｍｇ／ｋｇのＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ量で腹腔内投与した後の、その血清半減期を示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃを１０ｍｇ／ｋｇのＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ量で腹腔内投与してから２時間後の、その安定性を示す。
本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃを４℃または３７℃で５日間保持した後のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃに関するサイズ排除クロマトグラフィーのデータを示す。
リーダーペプチドを含む本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｎ２９７Ａ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃを含む。
リーダーペプチドを含まない本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｎ２９７Ａ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃを含む。
図２１に示されるＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖をコードするヌクレオチド配列を示す。
図２３Ａの配列に対する説明を示す。
リーダーペプチドを含む本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃを含む。
リーダーペプチドを含まない本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃを含む。
図２４に示されるＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖をコードするヌクレオチド配列を示す。
図２６Ａの配列に対する説明を示す。
リーダーペプチドを含む本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ｆ置換、Ｌ２３５Ｅ置換、及びＰ３３１Ｓ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃを含む。
リーダーペプチドを含まない本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ｆ置換、Ｌ２３５Ｅ置換、及びＰ３３１Ｓ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃを含む。
図２７に示されるＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ重鎖をコードするヌクレオチド配列を示す。
図２９Ａの配列に対する説明を示す。
リーダーペプチドを含む本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの軽鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ軽鎖は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ７エピトープを含む。
リーダーペプチドを含まない本開示のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの軽鎖のアミノ酸配列を示し、ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ軽鎖は、ＨＰＶＥ７エピトープを含む。
図３０に示されるＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ軽鎖をコードするヌクレオチド配列を示す。
Ａ～Ｄは、野生型ヒトＩｇＧ１Ｆｃのアミノ酸配列（Ａ）、Ｌ２３４Ｆ置換、Ｌ２３５Ｅ置換、及びＰ３３１Ｓ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃのアミノ酸配列（Ｂ）、Ｎ２９７Ａ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃのアミノ酸配列（Ｃ）、ならびにＬ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換を有するＩｇＧ１Ｆｃのアミノ酸配列（Ｄ）を示す。
Ａ～Ｃは、β２－ミクログロブリン（Ｒ１２Ｃ）ポリペプチドのアミノ酸配列（Ａ）、変異ＩＬ－２（Ｈ１６Ａ、Ｆ４２Ａ）ポリペプチドのアミノ酸配列（Ｂ）、及びクラスＩＭＨＣ－Ｈ鎖Ａ０２０１（Ｙ８４Ａ、Ａ２３６Ｃ）のアミノ酸配列（Ｃ）を示す。
ヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８
+
Ｔ細胞のＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃ介在性の増殖を示す。
変異ＩＬ－２ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃの発現データ及び受容体結合データを示す。
ＨＰＶ１６Ｅ７（１１～２０）特異的初代ヒトＣＤ８
+
Ｔ細胞に対するＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの結合をフローサイトメトリーによって検出したものを示す。
ＨＰＶ１６Ｅ７（１１～２０）特異的初代ヒトＣＤ８
+
Ｔ細胞に対する変異ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの結合がＳＬＰ７６のリン酸化に与える影響を示す。
ＨＰＶ１６Ｅ７（１１～２０）特異的初代ヒトＴ細胞に対する変異ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの結合がＣＤ２５、グランザイムＢ、及びＣＤ１０７αの産生に与える影響を示す。
ＨＰＶ１６Ｅ７（１１～２０）特異的初代ヒトＣＤ８
+
Ｔ細胞に対する変異ＩＬ－２／ｓｙｎＴａｃの結合がＩＦＮ－γの産生に与える影響を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
「ポリヌクレオチド」及び「核酸」という用語は、本明細書で互換的に使用され、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのいずれかであり、長さが任意の重合形態のヌクレオチドを指す。したがって、この用語は、限定はされないが、一本鎖、二本鎖、または多鎖のＤＮＡまたはＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＤＮＡとＲＮＡとのハイブリッド、あるいはプリン塩基及びピリミジン塩基を含むポリマー、あるいは他の天然のヌクレオチド塩基、化学的もしくは生化学的に改変されたヌクレオチド塩基、非天然のヌクレオチド塩基、または誘導体化されたヌクレオチド塩基を含むポリマーを含む。
【０００７】
「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書で互換的に使用され、化学的または生化学的に改変または誘導体化されたアミノ酸であるコードアミノ酸及び非コードアミノ酸を含み得、長さが任意の重合形態のアミノ酸と、改変されたペプチド骨格を有するポリペプチドとを指す。
【０００８】
ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、別のポリヌクレオチドまたはポリペプチドに対してある一定パーセントの「配列同一性」を有し、このことは、アライメントがとられ、２つの配列が比較されると、その割合の塩基またはアミノ酸が同一であり、同一の相対位置に存在することを意味する。配列同一性は、多くの異なる方法において決定することができる。配列同一性を決定するために、さまざまな簡便な方法及びコンピュータープログラム（例えば、ＢＬＡＳＴ、Ｔ－ＣＯＦＦＥＥ、ＭＵＳＣＬＥ、ＭＡＦＦＴなど）を使用して配列のアライメントをとることができ、こうした方法及びコンピュータープログラムは、ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｌｉ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴ、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｔｃｏｆｆｅｅ／、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｍｕｓｃｌｅ／、ｍａｆｆｔ．ｃｂｒｃ．ｊｐ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／を含む、いくつかのサイトでワールドワイドウェブを通じて利用可能である。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．（１９９０），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｉ．２１５：４０３－１０を参照のこと。
【０００９】
「保存的アミノ酸置換」という用語は、同様の側鎖を有するアミノ酸残基の、タンパク質における互換性を指す。例えば、脂肪族側鎖を有するアミノ酸の一群は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンからなり、脂肪族－ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸の一群は、セリン及びスレオニンからなり、アミド含有側鎖を有するアミノ酸の一群は、アスパラギン及びグルタミンからなり、芳香族側鎖を有するアミノ酸の一群は、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンからなり、塩基性側鎖を有するアミノ酸の一群は、リジン、アルギニン、及びヒスチジンからなり、酸性側鎖を有するアミノ酸の一群は、グルタミン酸及びアスパラギン酸からなり、含硫側鎖を有するアミノ酸の一群は、システイン及びメチオニンからなる。保存的なアミノ酸置換群の例は、バリン－ロイシン－イソロイシン、フェニルアラニン－チロシン、リジン－アルギニン、アラニン－バリン－グリシン、及びアスパラギン－グルタミンである。
【００１０】
（例えば、Ｔ細胞に存在するポリペプチド（例えば、Ｔ細胞受容体）に対する本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの結合に関して）本明細書で使用される「結合」は、介在する非共有結合的な相互作用を指す。結合相互作用は、解離定数（Ｋ
D
）が１０
-6
Ｍ未満、１０
-7
Ｍ未満、１０
-8
Ｍ未満、１０
-9
Ｍ未満、１０
-10
Ｍ未満、１０
-11
Ｍ未満、１０
-12
Ｍ未満、１０
-13
Ｍ未満、１０
-14
Ｍ未満、または１０
-15
Ｍ未満であることによって一般に特徴付けられる。「親和性」は、結合強度を指し、結合親和性の上昇は、Ｋ
D
の低下と相関する。
（【００１１】以降は省略されています）

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