公開番号2024069225 公報種別公開特許公報(A) 公開日2024-05-21 出願番号2024022097,2022054101 出願日2024-02-16,2016-08-04 発明の名称標的分子に対する抗原結合コンストラクト 出願人イマジナブ・インコーポレーテッド 代理人個人,個人,個人 主分類C07K 7/06 20060101AFI20240514BHJP(有機化学) 要約【課題】抗原結合コンストラクト(例えば、あらゆるscFv融合タンパク質、例えばミニボディ等)におけるヒンジ構造、及び抗原結合コンストラクトそれ自体、及びそれらを使用するための方法を提供する。 【解決手段】所望の標的に結合する抗原結合コンストラクトが開示され、例えば、標的分子に結合し、開示されたヒンジの1つ又は複数を有する抗体フラグメント(例えばscFv及びミニボディ等)等の抗体が本明細書に記載される。使用方法が本明細書に記載される。 【選択図】なし 特許請求の範囲【請求項１】 SEQ ID NO:1(X n1 CX n2 X n3 CX n4 X n5 C)の配列を含むアミノ酸ヒンジ領域であって、式中、X n1 は、共有結合による架橋結合を天然に形成しない任意のアミノ酸であってよく、X n2 は、A、R、N、D、E、Q、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W、Y、又はVの1つであり、X n3 は、任意のアミノ酸であってよく、X n4 は、任意のアミノ酸であってよく、X n5 は、任意のアミノ酸であってよい、アミノ酸ヒンジ領域。 続きを表示（約 800 文字）【請求項２】 X n1 が、別のアミノ酸と共有結合による架橋結合を形成しない(SEQ ID NO:191)、請求項1に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項３】 X n1 が、システインではない(SEQ ID NO:192)、請求項1又は2に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項４】 X n1 が、A、R、N、D、E、Q、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W、Y、又はVの1つである(SEQ ID NO:193)、請求項1から3のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項５】 X n2 が、P、V、又はEである(SEQ ID NO:194)、請求項1から4のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項６】 X n2 が、P又はVである(SEQ ID NO:195)、請求項1から5のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項７】 X n4 が、P、V、又はEである(SEQ ID NO:196)、請求項1から6のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項８】 X n4 が、P又はVである(SEQ ID NO:197)、請求項1から7のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項９】 X n3 が、P又はEである(SEQ ID NO:198)、請求項1から8のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 【請求項１０】 X n5 が、P又はEである(SEQ ID NO:199)、請求項1から9のいずれか一項に記載のアミノ酸ヒンジ領域。 （【請求項１１】以降は省略されています） 発明の詳細な説明【技術分野】 【０００１】 関連出願の相互参照 本出願は、本明細書にその全体が参照により援用される2015年8月7日付けで出願された米国仮出願第62/202,665号の利益を主張する。 続きを表示（約 13,000 文字）【０００２】 配列リストへの参照 本出願は、電子フォーマットで配列リストと共に出願されている。配列リストは、IGNAB030WOSEQUENCE.TXTというタイトルのファイルとして提供され、これは2016年8月3日に作成され最終更新され、そのサイズは、270,446バイトである。電子配列リスト中の情報は、本明細書にその全体が参照により援用される。 【０００３】 分野 本明細書に記載される実施形態は、一般的に、抗原結合コンストラクト(例えば、あらゆるscFv融合タンパク質、例えばミニボディ等)におけるヒンジ構造、及び抗原結合コンストラクトそれ自体、及びそれらを使用するための方法に関する。 【背景技術】 【０００４】 当業界には公知の多種多様の抗原結合コンストラクトがある。このようなコンストラクトはしばしば、そのCDRセクションの配列によって異なっていることが多く、そのフレームワーク領域及び抗体の他のセクション(例えばC H 3及びヒンジ領域等)における変動によって異なっていることはそれほど多くない。 【先行技術文献】 【特許文献】 【０００５】 米国特許第4,946,778号 米国特許第4,816,567号 【非特許文献】 【０００６】 Remington: The Science and Practice of Pharmacy 第21版、Univ. of Sciences in Philadelphia (USIP)、Lippincott Williams & Wilkins、Philadelphia、PA, 2005 Kuby、Immunology、第4版、第4章. 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Immunol.、Vol.7, 8号、622～632頁、2007 【発明の概要】 【課題を解決するための手段】 【０００７】 一部の態様において、SEQ ID NO:1(X n1 CX n2 X n3 CX n4 X n5 C)の配列を含むアミノ酸ヒンジ領域が提供される。X n1 は、共有結合による架橋結合を天然に形成しない任意のアミノ酸であってよい。X n2 は、A、R、N、D、E、Q、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W、Y、又はVの1つである。X n3 は、任意のアミノ酸であってよい。X n4 は、任意のアミノ酸であってよい。X n5 は、任意のアミノ酸であってよい。 【０００８】 一部の態様において、X n1 は、別のアミノ酸と共有結合による架橋結合を形成しない(SEQ ID NO:191)。一部の態様において、X n1 は、システインではない(SEQ ID NO:192)。一部の態様において、X n1 は、A、R、N、D、E、Q、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W、Y、又はV(SEQ ID NO:193)の1つである。一部の態様において、X n2 は、P、V、又はEである(SEQ ID NO:194)。一部の態様において、X n2 は、P又はVである(SEQ ID NO:195)。一部の態様において、X n4 は、P、V、又はEである(SEQ ID NO:196)。一部の態様において、X n4 は、P又はVである(SEQ ID NO:197)。一部の態様において、X n3 は、P又はEである(SEQ ID NO:198)。一部の態様において、X n5 は、P又はEである(SEQ ID NO:199)。一部の態様において、X n3 は、P又はEである(SEQ ID NO:200)。一部の態様において、X n2 X n3 は、VEである(SEQ ID NO:201)。一部の態様において、X n2 X n3 は、PPである(SEQ ID NO:202)。一部の態様において、X n4 X n5 は、VEである(SEQ ID NO:203)。一部の態様において、X n4 X n5 は、PPである(SEQ ID NO:204)。一部の態様において、X n2 X n3 は、VEであり、X n4 X n5 は、PPである(SEQ ID NO:205)。一部の態様において、X n2 X n3 は、PPであり、X n4 X n5 は、PP又はVEである(SEQ ID NO:206)。一部の態様において、X n2 X n3 は、VEであり、X n4 X n5 は、VE又はPPである(SEQ ID NO:207)。一部の態様において、ヒンジは、X n1 CX n2 X n3 CX n4 X n5 C(SEQ ID NO:1)における最後のシステインのC末端に、伸長又は下部ヒンジ(lower hinge)配列を更に含む。一部の態様において、伸長又は下部ヒンジ配列は、S、G、A、P、又はVのうちの少なくとも1つを含む。一部の態様において、伸長配列は、少なくともGGGSSGGGSG(SEQ ID NO:59)を含む。一部の態様において、リンカー配列は、少なくともAPPVAGP(SEQ ID NO:60)を含む。一部の態様において、請求項1に記載のヒンジ領域は、コアヒンジ領域の一部である。一部の態様において、ヒンジは、コアヒンジ領域に隣接する上部ヒンジ(upper hinge)領域を更に含む。一部の態様において、ヒンジは、コアヒンジ領域に隣接する、下部ヒンジ又は伸長領域を更に含む。一部の態様において、ヒンジは、コアヒンジ領域に隣接する上部ヒンジ領域を更に含む。一部の態様において、X n1 は、セリン、スレオニン、又はアラニンを含む(SEQ ID NO:209)。一部の態様において、X n1 は、セリンを含む(SEQ ID NO:210)。一部の態様において、X n1 は、アラニンを含む(SEQ ID NO:211)。一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域は、以下の配列:SCVECPPCP(SEQ ID NO:56)又はTCPPCPPC(SEQ ID NO:166)のうちの少なくとも1つを含む。一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域は、以下の配列:ERKSCVECPPCP(SEQ ID NO:167)、EPKSSDKTHT(SEQ ID NO:46)、及びCPPCPPC(SEQ ID NO:52)のうちの少なくとも1つを含む。一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域は、以下の配列:ERKSCVECPPCPGGGSSGGGSG(SEQ ID NO:34)又はERKSCVECPPCPAPPVAGP(SEQ ID NO:33)又はEPKSSDKTHTCPPCPPCGGGSSGGGSG(SEQ ID NO:26)又はEPKSSDKTHTCPPCPPCAPELLGGP(SEQ ID NO:25)のうちの少なくとも1つを含む。 【０００９】 一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域が提供される。アミノ酸ヒンジ領域は、SEQ ID NO:2(X n1 X n2 X n3 X n4 X n5 X n6 CX n7 X n8 CX n9 X n10 C)の配列を含む。X n1 は、任意のm個のアミノ酸であってよい(ここでmは、任意のタイプのアミノ酸の任意の数である)。X n2 は、任意のアミノ酸であってよい。X n3 は、任意のアミノ酸であってよい。X n4 は、任意のアミノ酸であってよい。X n5 は、任意のアミノ酸であってよい。X n6 は、システイン以外の任意のアミノ酸であってよい。X n7 は、任意のアミノ酸であってよい。X n8 は、任意のアミノ酸であってよい。X n9 は、任意のアミノ酸であってよい。X n10 は、任意のアミノ酸であってよい(例えば、SEQ ID NO:212を参照)。一部の態様において、X n1 は、システインではない(例えば、SEQ ID NO:213を参照)。一部の態様において、X n2 は、システインではない(例えば、SEQ ID NO:214を参照)。一部の態様において、X n2 は、Dである(例えば、SEQ ID NO:215を参照)。一部の態様において、X n3 は、Kである(例えば、SEQ ID NO:216を参照)。一部の態様において、X n4 は、Tである(例えば、SEQ ID NO:217を参照)。一部の態様において、X n5 は、Hである(例えば、SEQ ID NO:218を参照)。一部の態様において、X n6 は、Tである(例えば、SEQ ID NO:219を参照)。一部の態様において、X n7 は、P又はVである(例えば、SEQ ID NO:220を参照)。一部の態様において、X n8 は、P又はEである(例えば、SEQ ID NO:221を参照)。一部の態様において、X n9 は、P又はVである(例えば、SEQ ID NO:222を参照)。一部の態様において、X n10 は、P又はEである(例えば、SEQ ID NO:223を参照)。一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域は、X n1 の前に位置するCXXC(例えば、SEQ ID NO:224を参照)又はCXXC(例えば、SEQ ID NO:225を参照)モチーフを更に含む 。 一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域は、SEQ ID NO:2においてC末端のシステインに直接付着したX n11 X n12 C配列を更に含み、式中、X n11 は、任意のアミノ酸であってよく、X n12 は、任意のアミノ酸であってよい(例えば、SEQ ID NO:226を参照)。一部の態様において、X n11 は、P又はVであり、X n12 は、P又はEである(例えば、SEQ ID NO:227を参照)。一部の態様において、X n1 は、セリンであり、X n2 は、Dであり、X n3 は、Kであり、X n4 は、Tであり、X n5 は、Hであり、X n6 は、Tであり、X n7 は、Pであり、X n8 は、Pであり、X n9 は、Pであり、X n10 は、Pである(例えば、SEQ ID NO:228を参照)。一部の態様において、ヒンジ領域は、以下の配列:CPPCPPC(SEQ ID NO:52)、CPPCVECPPC(SEQ ID NO:53)、又はCPPCPPCPPC(SEQ ID NO:54)のうちの少なくとも1つを含む。一部の態様において、ヒンジ領域は、以下の配列:EPKSSDKTHTCPPCPPC(SEQ ID NO:168)、EPKSSDKTHTCPPCVECPPC(SEQ ID NO:169)、又はEPKSSDKTHTCPPCPPCPPC(SEQ ID NO:170)のうちの少なくとも1つを含む。一部の態様において、ヒンジ領域は、以下の配列:EPKSSDKTHTCPPCPPCGGGSSGGGSG(SEQ ID NO:26)、EPKSSDKTHTCPPCVECPPCGGGSSGGGSG(SEQ ID NO:28)、又はEPKSSDKTHTCPPCPPCPPCGGGSSGGGSG(SEQ ID NO:30)のうちの少なくとも1つを含む。 【００１０】 一部の態様において、アミノ酸ヒンジ領域が提供される。ヒンジ領域は、ELKTPLGDTTHT(SEQ ID NO:48)又はEPKSSDKTHT(SEQ ID NO:46)の上部ヒンジ配列に連結された、CVECPPCP(SEQ ID NO:57)、CPPCPPC(SEQ ID NO:52)、又はCPPCPPCPPC(SEQ ID NO:54)、又はCPPCVECPPC(SEQ ID NO:53)のうちの少なくとも1つのコアヒンジ配列を含む。 （【００１１】以降は省略されています） この特許をJ-PlatPatで参照する
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