特許ウォッチ

公開番号2025078752
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-05-20
出願番号2025033936,2022187437
出願日2025-03-04,2017-12-11
発明の名称腫瘍を標的にする合成アデノウイルスおよびその使用
出願人ソークインスティテュートフォーバイオロジカルスタディーズ
代理人個人,個人,個人,個人,個人
主分類C12N 15/861 20060101AFI20250513BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】腫瘍を標的にする合成アデノウイルスおよびその使用を提供すること。
【解決手段】肝臓脱標的化変異を有し、アデノウイルス34型(Ad34)ファイバータンパク質、またはAd34ノブドメインを有するキメラファイバータンパク質を発現する合成アデノウイルスが記載される。合成アデノウイルスは腫瘍部位に移動する。診断用または治療用トランスジーンを腫瘍に送達するための合成アデノウイルスの使用も記載される。アデノウイルス34型(Ad34)ノブドメインを有するファイバータンパク質を発現する肝臓脱標的化合成アデノウイルスは、腫瘍部位に向かうことができるという知見が、本明細書において記載される。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
図面に記載の発明。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１６年１２月１２日に出願された米国仮出願番号第６２／４３３，１４０号の利益を主張しており、この仮出願は、その全体が参考として本明細書に援用される。
続きを表示（約 2,800 文字）【０００２】
分野
この開示は、腫瘍部位に移動するキメラファイバータンパク質および肝臓脱標的化変異を有する合成アデノウイルスに関する。この開示は、腫瘍において診断用または治療用トランスジーンを発現させるための、合成アデノウイルスの使用にさらに関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
アデノウイルス（Ａｄ）は、天然の多重遺伝子発現ビヒクルである。ウイルスのある特定のコード領域、例えば、Ｅ１、Ｅ３およびＥ４領域は、培養における複製に必要でないかまたは利用可能な細胞株によって補完され得る。したがって、これらの領域はそれぞれ、単一ウイルスから複数のトランスジーンの発現を駆動するように、非ウイルス遺伝子と置き換えることができる。６８種の異なるヒトアデノウイルス血清型が存在し、それらはそれぞれ異なる特質を有する。Ａｄ５は、基礎研究、遺伝子治療および腫瘍溶解性ウイルス療法において使用される主なＡｄベクターであった。しかし、Ａｄ５は限定された指向性を有し、ウイルス取り込みのためのコクサッキーアデノウイルス受容体（ＣＡＲ）受容体を有する上皮細胞のみに感染する。さらに、静脈内注射されると、Ａｄ５は血液因子に結合するが、この血液因子は、肝臓においてＡｄ５が隔離される原因となるものであり、肝臓において、Ａｄ５は、潜在的に、炎症および毒性の制限を誘発することがある。したがって、静脈内投与後に特定の細胞型に感染することができる修飾されたアデノウイルスベクターに対する必要性は依然として存在する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
要旨
アデノウイルス３４型（Ａｄ３４）ノブドメインを有するファイバータンパク質を発現する肝臓脱標的化合成アデノウイルスは、腫瘍部位に向かうことができるという知見が、本明細書において記載される。合成アデノウイルスは、腫瘍間質細胞を含む腫瘍細胞において、診断用または治療用トランスジーンを送達し発現させるために使用することができる。
【０００５】
被験体の腫瘍細胞においてトランスジーンを発現させる方法が、本明細書において提供される。一部の実施形態では、方法は、トランスジーン、合成アデノウイルスを肝臓から脱標的化する本来のまたは修飾されたキャプシド、ならびにＡｄ３４ファイバータンパク質、またはアデノウイルス５型（Ａｄ５）シャフトドメインおよびＡｄ３４ノブドメインを含むキメラファイバータンパク質を含む合成アデノウイルスを被験体に投与することを含む。トランスジーンは、例えば、診断用トランスジーンまたは治療用トランスジーンであり得る。
【０００６】
また、腫瘍を有すると被験体を診断する方法が、本明細書において提供される。一部の実施形態では、方法は、診断用トランスジーン、合成アデノウイルスを肝臓から脱標的化する本来のまたは修飾されたキャプシド、ならびにＡｄ３４ファイバータンパク質、またはＡｄ５シャフトドメインおよびＡｄ３４ノブドメインを含むキメラファイバータンパク質を含む合成アデノウイルスを被験体に投与することを含む。一部の実施例では、診断用トランスジーンは、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）のレポーター遺伝子である。他の実施例では、診断用トランスジーンは、蛍光タンパク質または酵素をコードする。
【０００７】
被験体の腫瘍を処置する方法が、本明細書においてさらに提供される。一部の実施形態では、方法は、治療用トランスジーン、合成アデノウイルスを肝臓から脱標的化する本来のまたは修飾されたキャプシド、ならびにＡｄ３４ファイバータンパク質、またはＡｄ５シャフトドメインおよびＡｄ３４ノブドメインを含むキメラファイバータンパク質を含む合成アデノウイルスを被験体に投与することを含む。一部の実施例では、治療用トランスジーンは、腫瘍間質細胞を破壊または殺滅する抗がん剤または薬剤をコードする。
【０００８】
配列番号２または配列番号５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する合成アデノウイルスゲノムはまた、本開示によって提供される。
【０００９】
本開示の上述およびその他の目的および特性は、以下の詳細な説明、続いて添付の図面への参照により、さらに明らかとなろう。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
ＡｄＳｙｎ－ＣＯ１７６は膵腫瘍に向かう。（図１Ａ）Ｃｒｅ－ＬｏｘＰＫｒａｓ
Ｇ１２Ｄ
／ｐ５３膵腫瘍モデルの概要。「Ｋｒａｓ；ｐ５３／ｐ５３」と示されるマウスは、ＬｏｘＰ－終止コドン－ＬｏｘＰをコードする配列の下流にＫｒａｓ
Ｇ１２Ｄ
発癌遺伝子をコードする。終止コドンは、Ｃｒｅリコンビナーゼの非存在下で、Ｋｒａｓ
Ｇ１２Ｄ
の発現を遮断する。しかし、Ｃｒｅリコンビナーゼの存在下では、終止コドンは除去され、Ｋｒａｓ
Ｇ１２Ｄ
発癌遺伝子の発現を可能とする。これらの同一マウスでは、ｐ５３遺伝子の両方の対立遺伝子にＬｏｘＰ部位が隣接している（ＬｏｘＰ－ｐ５３－ＬｏｘＰ）。「ｐ５３／ｐ５３；Ｃｒｅ」と示したマウスは、ｐ５３遺伝子の両方の対立遺伝子にＬｏｘＰ部位が隣接しており（ＬｏｘＰ－ｐ５３－ＬｏｘＰ）、また、膵臓および十二指腸ホメオボックス１（Ｐｄｘ１）プロモーターによって駆動されるＣｒｅリコンビナーゼトランスジーンも発現する。Ｐｄｘ１は、膵臓細胞において特異的に発現される遺伝子であり、したがって、ｐ５３の両方のコピーは膵臓細胞において欠失する。系統間の掛け合わせによって、Ｐｄｘ１プロモーターによって駆動されるＣｒｅが膵臓細胞における腫瘍抑制因子ｐ５３の両方の対立遺伝子の欠失および変異体Ｋｒａｓ
Ｇ１２Ｄ
の活性化を媒介する子孫を生じる。「Ｋｒａｓ；ｐ５３／ｐ５３；Ｃｒｅ」と示したホモ接合性マウスは、５～７週で膵腫瘍を生じる。（図１Ｂ）Ａｄ３４ノブドメインを含むキメラファイバータンパク質を有する合成ウイルスであるＡｄＳｙｎ－ＣＯ１７６を、Ｋｒａｓ；ｐ５３／ｐ５３およびＫｒａｓ；ｐ５３／ｐ５３；Ｃｒｅマウスに静脈内注射した。ウイルス注射の７２時間後、組織を収集し、ルシフェリンと共に５分間インキュベートし、次いで、ＩＶＩＳ（商標）画像化システムを使用して５分間スキャンした。Ｋｒａｓ；ｐ５３／ｐ５３マウスは正常な膵臓を有し、ルシフェラーゼシグナルは主に脾臓に由来した。Ｋｒａｓ；ｐ５３／ｐ５３；Ｃｒｅマウスは膵腫瘍を有し、シグナルは主に膵腫瘍に由来した。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許