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公開番号2025066741
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-04-23
出願番号2025002927,2023577980
出願日2025-01-08,2022-07-14
発明の名称ヒトインターロイキン-2変異体およびその使用
出願人ドラコターピンバイオメディスンエルエルシー
代理人個人,個人
主分類C07K 14/55 20060101AFI20250416BHJP(有機化学)
要約【課題】ヒトインターロイキン-2変異体およびその使用を提供する。
【解決手段】高親和性受容体IL-2Rα/β/γとの親和性が消失または低下し、中親和性受容体IL-2Rβ/γとの親和性が維持されている、IL-2変異体(またはその誘導体)が提供される。また、IL-2変異体およびヒト抗体フラグメントを含む組換えタンパク質/融合タンパク質も提供される。IL-2変異体の活性は向上しており、野生型ヒトIL-2の活性に近くなる。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
成熟野生型ヒトインターロイキン－２（ＩＬ－２）と比較してアミノ酸変異を含むヒト
ＩＬ－２変異体であって、前記変異は、置換、欠失および付加の少なくとも１つであり、
好ましくは、前記成熟野生型ヒトＩＬ－２は、ＳＥＱＩＤＮｏ．１に示されるとおり
であり、前記変異は、
前記成熟野生型ヒトＩＬ－２の３１～４５位におけるアミノ酸残基のＳＥＱＩＤＮ
ｏ．１１に示す配列への変異、
前記成熟野生型ヒトＩＬ－２の３５～４１位におけるアミノ酸残基のＳＥＱＩＤＮ
ｏ．１２または１４に示す配列への変異、
前記成熟野生型ヒトＩＬ－２の３５～４３位におけるアミノ酸残基のＳＥＱＩＤＮ
ｏ．１３に示す配列への変異、
前記成熟野生型ヒトＩＬ－２の３１～３２位におけるアミノ酸残基のＧＧへの変異、
前記成熟野生型ヒトＩＬ－２の４３～４５位におけるアミノ酸残基のＧへの変異、
前記成熟野生型ヒトＩＬ－２の１２５位におけるアミノ酸残基のＡへの変異、
任意選択で、前記成熟野生型ヒトＩＬ－２のＮ末端におけるＭの付加
からなる群から選択される、ＩＬ－２変異体。
続きを表示（約 2,000 文字）【請求項２】
前記ＩＬ－２変異体は、
ＳＥＱＩＤＮｏ．２～１０、ＳＥＱＩＤＮｏ．１５、
Ｎ末端にＭが付加されたＳＥＱＩＤＮｏ．２～１０、およびＮ末端にＭが付加され
たＳＥＱＩＤＮｏ．１５、
からなる群から選択される配列で示されるとおりである、請求項１に記載のＩＬ－２変異
体。
【請求項３】
前記ＩＬ－２変異体は、ＩＬ－２Ｒαとの低下した親和性を有し、および／または、
前記ＩＬ－２変異体は、ＩＬ－２Ｒβとの変化していないかまたは増加した親和性を有
し、および／または、
前記ＩＬ－２変異体は、ＩＬ－２Ｒγとの変化していないかまたは増加した親和性を有
し、
好ましくは、前記ＩＬ－２変異体は、ＩＬ－２Ｒα／β／γとの低下した親和性を有し
、およびＩＬ－２Ｒβ／γとのＩＬ－２変異体の親和性は、維持されるか増加する、
請求項１または２に記載のＩＬ－２変異体。
【請求項４】
ＰＥＧ化、グリコシル化、アルブミンへの接合、Ｆｃへの接合、ヒドロキシエチル化、
脱Ｏ－グリコシル化、
からなる群から選択される修飾を有し、
好ましくは、前記Ｆｃへの接合は、請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ－２変
異体のＣ末端へのヒトＩｇＧ１Ｆｃの接合を指し、
前記ＰＥＧ化は、ＩＬ－２変異体のＮ末端でのＰＥＧの結合を指し、
好ましくは、前記ＰＥＧは、５ｋＤ～８０ｋＤの分子量を有し、
より好ましくは、前記ＰＥＧは、１０ｋＤ～２０ｋＤの分子量を有し、
請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ－２変異体を含む、ＩＬ－２変異体の誘導体
。
【請求項５】
第１の成分と、
第２の成分と、
を含む接合体であって、
前記第１の成分は、前記第２の成分に、直接的に接合するかまたはリンカーを介して間
接的に接合し、
前記第１の成分は、請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ-２変異体、または請
求項４に記載のＩＬ-２変異体の誘導体であり、
好ましくは、前記第２の成分は、抗体またはその抗原結合断片であり、
より好ましくは、前記抗体またはその抗原結合断片は、腫瘍抗原を標的とする、
接合体。
【請求項６】
請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ-２変異体、または請求項４に記載のＩＬ-
２変異体の誘導体、または請求項５に記載の接合体、
薬学的に許容される希釈剤、担体または賦形剤
を含有する、医薬組成物。
【請求項７】
請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ-２変異体、請求項４に記載のＩＬ-２変異
体の誘導体、または請求項５に記載の接合体をコードする核酸分子。
【請求項８】
請求項７に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
【請求項９】
請求項８に記載の発現ベクターを含むこと、
請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ-２変異体を発現すること、
請求項４に記載のＩＬ-２変異体の誘導体を発現すること、
請求項５に記載の接合体を発現すること、
のいずれかを含むまたは発現する、宿主細胞であって、
好ましくは、前記宿主細胞は、原核細胞または真核細胞であり、
好ましくは、前記宿主細胞は、細菌細胞、酵母細胞、哺乳類細胞からなる群から選択さ
れ、
最も好ましくは、前記宿主細胞は、サッカロミケス・セレビシエ細胞または大腸菌細胞
である、
宿主細胞。
【請求項１０】
薬剤の調製における、請求項１から３のいずれか一項に記載のＩＬ-２変異体、請求項
４に記載のＩＬ-２変異体の誘導体、請求項５に記載の接合体から選択されるいずれかの
使用であって、
前記薬剤は、増殖性疾患、増殖性疾患の転移、免疫疾患からなる群から選択される疾患
を予防または治療するためのものであり、
好ましくは、前記増殖性疾患は、腫瘍または癌であり、
好ましくは、前記免疫疾患は、糖尿病、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマ
トーデス、湿疹、喘息、自己免疫疾患および臓器移植後の自己免疫反応からなる群から選
択され、
好ましくは、前記腫瘍または癌は、上皮細胞癌、内皮細胞癌、扁平上皮癌、パピローマ
ウイルスによる癌、腺癌、黒色腫、肉腫、奇形腫、肺癌、転移性肺癌、リンパ腫および転
移性腎細胞癌腫からなる群から選択される、
使用。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０２１年７月３０日に出願された特許出願（出願番号２０２１１０８６８
４０９５）および２０２２年６月１日に出願された特許出願（２０２２１０６２１４２５
９）の優先権を主張する。
続きを表示（約 2,500 文字）【０００２】
本開示は、１つ以上のアミノ酸変異を有するヒトインターロイキン-２（ＩＬ-２）変異
体（ｖａｒｉａｎｔ）またはその誘導体に関する。ＩＬ－２変異体またはその誘導体は、
高親和性受容体（ＩＬ－２Ｒα／β／γ）との消失または低下した親和性を有し、中親和
性受容体（ＩＬ－２Ｒβ／γ）との親和性を維持する。本開示はまた、ヒトＩＬ－２変異
体、コードポリヌクレオチド、ベクター、宿主細胞、医薬組成物、を含む免疫接合体、そ
れらの調製方法、治療方法および使用に関する。
【技術背景】
【０００３】
ヒトインターロイキン－２（ＩＬ－２）は、Ｔ細胞増殖因子（ＴＣＧＦ）としても知ら
れる。ＩＬ－２遺伝子は、第４染色体（４ｑ２７）上に位置し、合計約７ｋｂの配列を含
む。ＩＬ－２は、約１３３個のアミノ酸から構成され、約１５ｋＤの分子量を有する。Ｄ
ｏｒｉｓＭｏｒｇａｎら、１９７６年および１９７７年は、活性化されたＴ細胞の培養
液がＴ細胞の増殖を促進し得ることをそれぞれ発見した。培養液中の刺激因子は精製され
、ＩＬ－２と同定された。
【０００４】
第１のｉｎｖｉｔｒｏ細胞実験では、Ｔ細胞がＴＣＲおよびＣＤ２８によって活性化
された後、ＩＬ－２を分泌し、細胞表面にＩＬ－２受容体（ＩＬ－２Ｒ）を発現し得るこ
とが示された。ＩＬ－２のＩＬ－２Ｒへの結合は、Ｔ細胞の増殖およびＴ細胞への影響を
引き起こし得る。ＩＬ－２は、Ｔ細胞免疫応答において中心的な役割を果たす分子である
。ｉｎｖｉｖｏ実験では、ＩＬ－２またはその受容体をノックアウトした後、動物は自
己免疫を発症することが判明した。ＩＬ－２はエフェクター細胞（Ｔ細胞およびＮＫ細胞
など）だけでなく制御性Ｔ細胞も活性化し、それによって自己に対する過剰な免疫を抑制
する。
【０００５】
ＩＬ－２は、ＩＬ－２Ｒを通じて作用する。ＩＬ－２Ｒは、ＩＬ－２Ｒα（つまりＣＤ
２５）、ＩＬ－２Ｒβ（つまりＣＤ１２２）、およびＩＬ－２Ｒγ（つまりＣＤ１３２）
の３つのサブユニットからなる。３つのサブユニットは、３つの形態の受容体を形成し得
、高親和性受容体は、すべての３つのサブユニットのＩＬ－２Ｒα／β／γを備え、中親
和性受容体は、ＩＬ－２Ｒβ／γを備え、低親和性受容体は、ＩＬ－２Ｒαを備える。Ｉ
Ｌ－２ＲβおよびＩＬ－２Ｒγは、ＩＬ－２による下流シグナル伝達経路の活性化に必要
である。ＩＬ－２がＩＬ－２ＲβおよびＩＬ－２Ｒγに同時に結合するとき、２つの受容
体サブユニットは、ヘテロ二量体を形成して細胞内ＳＴＡＴ５をリン酸化し、これは、核
に入り、それによって対応する遺伝子の転写および発現を引き起こす。ＩＬ－２Ｒαは、
シグナル伝達には必要ないが、ＩＬ－２ＲβおよびＩＬ－２ＲγへのＩＬ－２の結合を促
進し得る。
【０００６】
ＩＬ－２Ｒγは、すべての免疫細胞で発現される。ＩＬ－２Ｒβは、ＣＤ８＋Ｔ細胞、
ＮＫ細胞、制御性Ｔ細胞で発現し、発現レベルは、Ｔ細胞の活性化後に増加する。ＩＬ－
２Ｒαは、制御性Ｔ細胞で持続的に高発現し、活性化されたＣＤ８＋Ｔ細胞で一時的に発
現し、その後発現レベルが下方制御される。
【０００７】
ＩＬ－２は、主に活性化Ｔ細胞、特にＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞によって合成される。Ｔ
細胞の増殖および分化を刺激し、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の産生と末梢血リンパ
球の細胞傷害性細胞とリンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞への分化を誘導し、Ｔ細
胞によるサイトカインおよび細胞溶解性分子の発現を促進し、Ｂ細胞の増殖および分化、
およびＢ細胞による免疫グロブリン合成を促進し、ならびにナチュラルキラー（ＮＫ）細
胞の産生、増殖、活性化を刺激する。ｉｎｖｉｖｏでリンパ球集団を拡大しこれらの細
胞のエフェクター機能を向上するＩＬ－２の能力は、その抗腫瘍効果につながり、ＩＬ－
２免疫療法は、特定の転移性癌患者に対する治療選択肢となる。現在、高用量のＩＬ－２
は、転移性腎細胞癌および悪性黒色腫の治療に承認されている。
【０００８】
国際公開第２００９／１３５６１５号に開示されるＩＬ－２変異体は、２０位、８８位
、または１２６位に変異を有する。国際公開第２０１２／０６２２２８号に開示されるＩ
Ｌ－２変異体は、３８位、４２位、４５位、６２位、６８位、または８８位の少なくとも
１つに変異を有する。米国特許第８９０６３５６号明細書に開示されるＩＬ－２変異体は
、９１位および１２６位に変異を有する。米国特許第９７３２１３４号明細書に開示され
るＩＬ－２変異体は、１５位、１６位、２２位、８４位、８８位または９５位の少なくと
も１つに変異を有する。米国特許７８０３３６１号明細書および米国特許８１２４０６６
号明細書に開示されるＩＬ－２変異体は、変異Ｒ３８Ｗを含む。
【発明の概要】
【０００９】
本開示は、１つ以上のアミノ酸変異を有するＩＬ－２変異体（またはその誘導体）、そ
の接合体に関し、さらにはＩＬ－２変異体の使用および調製方法にも関する。
【００１０】
（ＩＬ－２変異体またはその誘導体）
第１の態様では、本開示は、成熟野生型ヒトＩＬ-２（ＳＥＱＩＤＮｏ．１）と比
較して１つ以上のアミノ酸変異を含むＩＬ-２変異体（またはその誘導体）を提供する。
（【００１１】以降は省略されています）

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