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公開番号2025061494
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-04-10
出願番号2025007733,2023026217
出願日2025-01-20,2019-02-07
発明の名称治療用タンパク質送達のための方法および組成物
出願人リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド,REGENERON PHARMACEUTICALS, INC.
代理人個人,個人
主分類A61K 48/00 20060101AFI20250403BHJP(医学または獣医学;衛生学)
要約【課題】CNSに効率的に治療を提供する方法を提供する。
【解決手段】一態様では、本発明は、治療用タンパク質を、対象の中枢神経系(CNS)に送達する方法を提供し、細胞表面受容体(CSR)結合タンパク質(CSR-BP)にコンジュゲートされた治療用タンパク質(tpCSR-BP)をコードするヌクレオチド組成物を、CNS中に治療有効量のtpCSR-BPを提供するのに十分な肝臓標的送達方法を介して、対象に投与することを含む。一実施形態では、CSR-BPは、CSRに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片である。別の実施形態では、治療用タンパク質はリソソーム酵素である。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
図面に記載の発明。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
ＥＦＳ－ＷＥＢを介してテキストファイルとして提出された配列表への参照
１０４５７ＷＯ０１＿ＳＴ２５．ｔｘｔファイルに記述されている配列表は、３３．５キロバイトであり、２０１９年１月２９日に作成され、参照により本明細書に組み込まれる。
続きを表示（約 6,000 文字）【０００２】
本出願は一般に、リソソーム蓄積症の治療など、ＣＮＳを損なう疾患および障害を治療するために、治療用タンパク質を中枢神経系（ＣＮＳ）に送達するための組成物および方法を対象とする。本出願は、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過する一つまたは複数の送達ドメインにコンジュゲートされた治療用タンパク質をコードするヌクレオチド組成物の治療有効量を提供することを目的としている。
【背景技術】
【０００３】
薬物送達アプローチは、ナノ担体など、血液脳関門（ＢＢＢ）を克服するために開発されてきたが、欠点がある。担体は、血液循環の不安定性および望ましくない生体分布プロファイルを示している（ＧｅｌｐｅｒｉｎａＳ、ｅｔａｌ．、２００５、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ．１７２（１２）：１４８７－９０。参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。また、ＢＢＢでの輸送機構、およびＣＮＳ疾患状態が関門の完全性を変えているかどうかによっても、標的化効率が低下している。標的化部分または担体の適切な選択は、これらの輸送機構に影響を与える神経炎症状態を考慮しなければならない。
肝臓または他の組織におけるＤＮＡ発現を介した治療用タンパク質の送達により、タンパク質のボーラス注射の必要性を排除し、したがって、免疫原性の懸念を軽減する便利なアプローチが提供される。受容体結合タンパク質、特に細胞特異的受容体にコンジュゲートした治療用タンパク質は、特定の組織に対する標的化治療薬の問題を解決する。しかしながら、ＣＮＳに効率的に治療を提供する方法を提供する必要性が依然として存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
ＧｅｌｐｅｒｉｎａＳ、ｅｔａｌ．、２００５、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ．１７２（１２）：１４８７－９０
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
出願人らは、治療用タンパク質、特に補充酵素が、受容体結合タンパク質と関連付けられた場合、中枢神経系に効果的に送達されうることを発見し、ただしそれは循環血中レベルが経時的に一貫したレベルを達成することを条件としている。マルチドメイン治療用タンパク質は、治療用タンパク質および結合タンパク質複合体のコード配列を担持する遺伝子療法ベクターを介して肝臓に送達されうる。
【０００６】
一態様では、本発明は、治療用タンパク質を、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に送達する方法を提供し、細胞表面受容体（ＣＳＲ）結合タンパク質（ＣＳＲ－ＢＰ）にコンジュゲートされた治療用タンパク質（ｔｐＣＳＲ－ＢＰ）をコードするヌクレオチド組成物を、ＣＮＳ中に治療有効量のｔｐＣＳＲ－ＢＰを提供するのに十分な肝臓標的送達方法を介して、対象に投与することを含む。
【０００７】
一実施形態では、ＣＳＲ－ＢＰは、ＣＳＲに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片である。別の実施形態では、治療用タンパク質はリソソーム酵素である。
【０００８】
一実施形態では、酵素は、グリコシラーゼ、例えばアルファ－グルコシダーゼまたはアルファ－ガラコシダーゼＡなどのグリコシダーゼなどのヒドロラーゼ活性を有する。一実施形態では、細胞表面受容体（ＣＳＲ）結合タンパク質（ＣＳＲ－ＢＰ）は、内部移行受容体に結合する抗原結合タンパク質である。一実施形態では、内部移行受容体は、エンドサイトーシスされてリソソームに輸送される細胞表面分子である。特定の一実施形態では、内部移行受容体はＣＤ６３分子である。一実施形態では、内部移行受容体はＩＴＧＡ７分子である。特定の一実施形態では、ＣＳＲ－ＢＰは、抗体、抗体断片、またはｓｃＦｖ、例えばＣＤ６３またはＩＴＧＡ７に結合する単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）などである。
【０００９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるマルチドメイン治療用タンパク質は、一つまたは複数の送達ドメインおよび酵素ドメインを含み、一つまたは複数の送達ドメインは、ヒトトランスフェリン受容体（ｈＴｆＲ）に結合する。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、内部移行エフェクターに結合する第二の送達ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、第二の送達ドメインは、（ｉ）ＣＤ６３、インテグリンアルファ７（ＩＴＧＡ７）、ＭＨＣ－Ｉ、Ｋｒｅｍｅｎ－１、Ｋｒｅｍｅｎ－２、ＬＲＰ５、ＬＲＰ６、ＬＲＰ８、トランスフェリン受容体、ＬＤＬ受容体、ＬＤＬ関連タンパク質１受容体、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、アミロイド前駆体タンパク質様タンパク質２（ＡＰＬＰ２）、アペリン受容体（ＡＰＬＮＲ）、ミエリンおよびリンパ球タンパク質（ＭＡＬ）、ＩＧＦ２Ｒ、液胞型Ｈ＋ＡＴＰアーゼ、ジフテリア毒素受容体、葉酸受容体、グルタミン酸受容体、グルタチオン受容体、レプチン受容体、スカベンジャー受容体Ａ１－５（ＳＣＡＲＡ１－５）、ＳＣＡＲＢ１－３、およびＣＤ３６からなる群から選択される内部移行エフェクター；（ｉｉ）ＣＤ６３、ＭＨＣ－Ｉ、液泡型Ｈ＋ＡＴＰアーゼ、ＩＧＦ２Ｒ、インテグリンアルファ７（ＩＴＧＡ７）、ＬＲＰ５、ＬＲＰ６、ＬＲＰ８、Ｋｒｅｍｅｎ－２、ＬＤＬ受容体、ＬＤＬ関連タンパク質１受容体、アミロイド前駆体タンパク質様タンパク質２（ＡＰＬＰ２）、アペリン受容体（ＡＰＬＮＲ）、ＰＲＬＲ、ＭＡＬ（ミエリンおよびリンパ球タンパク質（ＭＡＬ）、ジフテリア毒素受容体、ＨＢＥＧＦ（ヘパリン結合性ＥＧＦ様成長因子）、グルタチオン受容体、グルタミン酸受容体、レプチン受容体、および葉酸受容体からなる群から任意に選択される、いくつかの組織タイプで発現する内部移行エフェクター；（ｉｉｉ）コラーゲンＸ、インテグリンアルファ１０（ＩＴＧＡ１０）、線維芽細胞成長因子受容体３（ＦＧＦＲ３）、線維芽細胞成長因子受容体アイソフォームＣ（ＦＧＦＲ３Ｃ）、ヒアルロナンおよびプロテオグリカンリンクタンパク質１（ＣＲＴＬ１）、アグリカン、コラーゲンＩＩ、およびＫｒｅｍｅｎ－１からなる群から任意に選択される、骨および／または軟骨によって優先的に発現される内部移行エフェクター；（ｉｖ）スカベンジャー受容体Ａ１－５（ＳＣＡＲＡ１－５）、ＳＣＡＲＢ１－３、ＣＤ３６、ＭＳＲ１（マクロファージスカベンジャー受容体１）、ＭＲＣ１（マクロファージマンノース受容体１）、ＶＳＩＧ４（Ｖセットおよびイムノグロブリンドメイン含有タンパク質４）、ＣＤ６８（マクロシアリン）、およびＣＳＦ１Ｒ（マクロファージコロニー刺激因子１受容体）からなる群から任意に選択される、単球、マクロファージ、またはマイクログリアによって優先的に発現される内部移行エフェクター；（ｖ）ＣＤＨ１６（Ｃａｄｈｅｒｉ－１６）、ＣＬＤＮ１６（Ｃｌａｕｄｎ－１６）、ＫＬ（Ｋｌｏｔｈｏ）、ＰＴＨ１Ｒ（副甲状腺ホルモン受容体）、ＳＬＣ２２Ａ１３（溶質輸送体ファミリー２２メンバー１３）、ＳＬＣ５Ａ２（ナトリウム／グルコース共輸送体２）、およびＵＭＯＤ（ウロモジュリン）からなる群から任意に選択される、腎臓細胞によって優先的に発現される内部移行エフェクターに結合する。他の特定の実施形態では、内部移行エフェクターは、ＢＭＰＲ１Ａ（骨形態形成タンパク質受容体１Ａ）、ｍ－カドヘリン、ＣＤ９、ＭｕＳＫ（筋肉特異的キナーゼ）、ＬＧＲ４／ＧＰＲ４８（Ｇタンパク質結合受容体４８）、コリン作動性受容体（ニコチン性）アルファ１、ＣＤＨ１５（Ｃａｄｈｅｒｉ－１５）、ＩＴＧＡ７（インテグリンアルファ７）、ＣＡＣＮＧ１（Ｌ型カルシウムチャネルサブユニットガンマ１）、ＣＡＣＮＡＩＳ（Ｌ型カルシウムチャネルサブユニットアルファ１５）、ＣＡＣＮＧ６（Ｌ型カルシウムチャネルサブユニットガンマ６）、ＳＣＮ１Ｂ（ナトリウムチャネルサブユニットベータ１）、ＣＨＲＮＡ１（ＡＣｈ受容体サブユニットアルファ）、ＣＨＲＮＤ（ＡＣｈ受容体サブユニットデルタ）、ＬＲＲＣ１４Ｂ（ロイシンリッチリピート含有タンパク質１４Ｂ）、ジストログリカン（ＤＡＧ１）、およびＰＯＰＤＣ３（Ｐｏｐｅｙｅドメイン含有タンパク質３）などの筋肉特異的インターナライザー；（ｖｉ）任意にＡＳＧＲ１またはＡＳＧＲ２など、肝臓細胞によって優先的に発現される内部移行エフェクター；（ｖｉｉ）ＢＭＰＲ１Ａ（骨形態形成タンパク質受容体１Ａ）、ｍ－カドヘリン、ＣＤ９、ＭｕＳＫ（筋肉特異的キナーゼ）、ＬＧＲ４／ＧＰＲ４８（Ｇタンパク質結合受容体４８）、コリン作動性受容体（ニコチン性）アルファ１、ＣＤＨ１５（Ｃａｄｈｅｒｉ－１５）、ＩＴＧＡ７（インテグリンアルファ７）、ＣＡＣＮＧ１（Ｌ型カルシウムチャネルサブユニットガンマ１）、ＣＡＣＮＡｌＳ（Ｌ型カルシウムチャネルサブユニットアルファ１５）、ＣＡＣＮＧ６（Ｌ型カルシウムチャネルサブユニットガンマ６）、ＳＣＮ１Ｂ（ナトリウムチャネルサブユニットベータ１）、ＣＨＲＮＡ１（ＡＣｈ受容体サブユニットアルファ）、ＣＨＲＮＤ（ＡＣｈ受容体サブユニットデルタ）、ＬＲＲＣ１４Ｂ（ロイシンリッチリピート含有タンパク質１４Ｂ）、ジストログリカン（ＤＡＧ１）、およびＰＯＰＤＣ３（Ｐｏｐｅｙｅドメイン含有タンパク質３）からなる群から任意に選択される、筋肉細胞によって優先的に発現される内部移行エフェクター；および／または（ｖｉｉｉ）ＩＴＧＡ７、ＣＤ９、ＣＤ６３、ＡＬＰＬ２、ＭＳＲ１、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、またはＰＲＬＲからなる群から選択される内部移行エフェクタータンパク質である。いくつかの実施形態では、第二の送達ドメインは、内部移行エフェクターＣＤ６３に結合する。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の送達ドメインの少なくとも一つは、抗原結合タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の送達ドメインの各々は、抗原結合タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の送達ドメインの少なくとも一つは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の送達ドメインの少なくとも一つは、半抗体を含む。いくつかの実施形態では、ｈＴｆＲに結合する送達ドメインはｓｃＦｖであり、半抗体はＣＤ６３に結合し、酵素ドメインはＧＡＡであり、ＧＡＡはＣＤ６３に結合する半抗体のカルボキシ末端にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、一つまたは複数の送達ドメインの各々は、ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも一つのｓｃＦｖは、Ｆｃに融合される。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、野生型ヒトＩｇＧ４アイソタイプ、またはその誘導体を含む。いくつかの実施形態では、ＧＡＡは、Ｆｃのカルボキシ末端にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、抗ｈＴｆＲｓｃＦｖおよび抗ｈＣＤ６３ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、抗ｈＴｆＲｓｃＦｖおよび抗ｈＣＤ６３ｓｃＦｖは、両方ともそのカルボキシ末端で、単一のＧＡＡ酵素に連結されている。いくつかの実施形態では、送達ドメインは抗ｈＴｆＲｓｃＦｖであり、酵素ドメインは、ｓｃＦｖのＶＬドメインのカルボキシ末端に連結されている。いくつかの実施形態では、マルチドメインは、抗ｈＴｆＲｓｃＦｖのＶＨドメインのＮ末端に連結された第二の送達ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、第二の送達ドメインは、抗ｈＣＤ６３ｓｃＦＶである。いくつかの実施形態では、酵素ドメインは、配列番号１として記載されるアミノ酸配列を含む。
【００１０】
また、少なくとも二つの送達ドメインおよび少なくとも一つの酵素ドメインを含むマルチドメイン治療用タンパク質が提供され、二つの送達ドメインの各々は、抗体、半抗体、およびｓｃＦｖからなる群から独立して選択され、少なくとも一つまたは複数の送達ドメインは、少なくとも一つの酵素ドメインに関連付けられ、好ましくは、一つまたは複数の送達ドメインが、少なくとも一つの酵素ドメインに共有結合されている。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、二つ以下の送達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、送達ドメインのうちの一つのみが、少なくとも一つの酵素ドメインと関連付けられている。いくつかの実施形態では、少なくとも二つの送達ドメインの各々は、酵素ドメインに共有結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも二つの送達ドメインの各々は、同じ酵素ドメインに共有結合している。いくつかの実施形態では、少なくとも二つの送達ドメインの各々は、異なる酵素ドメインに共有結合している。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、二つ以下の送達ドメインを含み、第一の送達ドメインは半抗体を含み、第二の送達ドメインはｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖはＦｃに融合される。いくつかの実施形態では、半抗体は、そのカルボキシ末端で第一の酵素ドメインに共有結合され、および／またはｓｃＦｖは、そのカルボキシ末端でＦｃ、および任意で第二の酵素ドメインに共有結合される。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、二つ以下の送達ドメインを含み、第一および第二の送達ドメインはそれぞれｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、第一および第二のｓｃＦｖの両方は、酵素ドメインに共有結合している。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで：第一のｓｃＦｖ、第二のｓｃＦｖ、および酵素ドメインを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも一つの送達ドメインは、リソソーム輸送分子に結合し、少なくとも一つの送達ドメインはトランスサイトーシスエフェクターに結合する。いくつかの実施形態では、リソソーム輸送分子は、ＣＤ６３、ＩＴＧＡ７、ＣＤ９、ＣＤ６３、ＣＤ８１、ＣＤ８２、またはＣＤ１５１からなる群から選択され、トランスサイトーシスエフェクターは、ＬＤＬ受容体、ＩｇＡ受容体、トランスフェリン受容体、新生児Ｆｃ受容体、インスリン受容体、ＣＤ９８、およびベイシジンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、マルチドメイン治療用タンパク質は、図１Ｃ、図１Ｄ、図１Ｅ、または図１Ｆに示される構造を含む。
（【００１１】以降は省略されています）

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