特許ウォッチ

公開番号2025016538
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-02-04
出願番号2024185456,2023530940
出願日2024-10-21,2021-11-22
発明の名称二重特異性抗体及びその使用
出願人康諾亜生物医薬科技(成都)有限公司,KEYMED BIOSCIENCES (CHENGDU) CO., LTD.
代理人弁理士法人ユニアス国際特許事務所
主分類C07K 16/46 20060101AFI20250128BHJP(有機化学)
要約【課題】二重特異性抗体での重鎖間のミスマッチを解決する手段を提供する。
【解決手段】がんの治療における二重特異性抗体又はその抗原結合断片、そのコード核酸、前記核酸を含む細胞、前記二重特異性抗体又はその抗原結合断片、核酸及び/又は細胞を含む組成物、及び、前記二重特異性抗体又はその抗原断片の関連使用を開示する。異なるタイプの軽鎖κλ二重特異性抗体設計及び全長IgGコンフォメーションを採用する新規なT細胞アダプターを開示し、そのうち、標的細胞及びT細胞CD3に結合する抗体アームは、それぞれκ軽鎖及びλ軽鎖を採用し、その同種の重鎖と対合すると共に、相補的な電荷対を導入して正確な対形成の効率を高め、アフィニティーを最適化する。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
（ａ）第１の抗原結合部分又はその抗原結合断片であって、前記第１の抗原結合部分は、第１の軽鎖及び第１の重鎖を含み、前記第１の軽鎖は、κ型軽鎖であり、前記第１の抗原結合部分は、第１の抗原に結合する第１の結合ドメインを含む、第１の抗原結合部分又はその抗原結合断片、
前記第１の抗原は、ＢＣＭＡ抗原であり、
前記第１の結合ドメインの第１の軽鎖ＣＤＲは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：９９又は１３４で示されるアミノ酸配列からなる第１の軽鎖ＣＤＲ１、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１００又は１３５で示されるアミノ酸配列からなる第１の軽鎖ＣＤＲ２、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１０１で示されるアミノ酸配列からなる第１の軽鎖ＣＤＲ３であり、
前記第１の結合ドメインの重鎖ＣＤＲは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：９６で示されるアミノ酸配列からなる第１の重鎖ＣＤＲ１、
ＳＥＱＩＤＮＯ：９７で示されるアミノ酸配列からなる第１の重鎖ＣＤＲ２、
ＳＥＱＩＤＮＯ：９８で示されるアミノ酸配列からなる第１の重鎖ＣＤＲ３であり、及び、
（ｂ）第２の抗原結合部分又はその抗原結合断片であって、前記第２の抗原結合部分は、第２の軽鎖及び第２の重鎖を含み、前記第２の軽鎖は、λ型軽鎖であり、前記第２の抗原結合部分は、第２の抗原に結合する第２の結合ドメインを含む、第２の抗原結合部分又はその抗原結合断片、を含む二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
続きを表示（約 4,800 文字）【請求項２】
前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱＩＤＮＯ：９９、１００、１０１で示されるアミノ酸配列から選ばれ、又は前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１０１で示されるアミノ酸配列から選ばれ、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱＩＤＮＯ：９９、１００、１０１で示されるアミノ酸配列から選ばれ、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱＩＤＮＯ：９６、９７、９８で示されるアミノ酸配列から選ばれ、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１０１で示されるアミノ酸配列から選ばれ、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱＩＤＮＯ：９６、９７、９８で示されるアミノ酸配列から選ばれる、
請求項１に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項３】
前記第２の抗原は、ＣＤ３抗原であり、
前記第２の結合ドメインの第２の軽鎖ＣＤＲは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：７で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、
ＳＥＱＩＤＮＯ：８で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、
ＳＥＱＩＤＮＯ：２１で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ３であり、
前記第２の結合ドメインの重鎖ＣＤＲは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：２６で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、
ＳＥＱＩＤＮＯ：２７で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、
ＳＥＱＩＤＮＯ：２８で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ３である、
請求項１又は２に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項４】
前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、Ｇｌｎ
４２
Ｌｙｓ突然変異（Ｖκ
ＢＣＭＡ
：Ｇｌｎ
４２
Ｌｙｓ）を有し、及び／又は、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、Ｇｌｎ
３９
Ｇｌｕ突然変異（ＶＨ
ＢＣＭＡ
：Ｇｌｎ
３９
Ｇｌｕ）を有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項５】
前記第１の結合ドメインは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２又は１２４で示されるアミノ酸配列又はその任意の変異体の第１の軽鎖可変領域、及び、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８又は１２０で示されるアミノ酸配列又はその任意の変異体の第１の重鎖可変領域を含み、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２０で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２４で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２４で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２０で示されるアミノ酸配列である、
請求項１～４のいずれか１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項６】
前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０及び８４で示されるアミノ酸配列から選ばれ、及び／又は、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２及び８６で示されるアミノ酸配列から選ばれ、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６で示されるアミノ酸配列である、
請求項１～５のいずれか１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項７】
前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖可変領域は、Ｇｌｎ
４０
Ｇｌｕ突然変異（Ｖλ
ＣＤ３
：Ｇｌｎ
４０
Ｇｌｕ）を有し、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖可変領域は、Ｇｌｎ
３９
Ｌｙｓ突然変異（ＶＨ
ＣＤ３
：Ｇｌｎ
３９
Ｌｙｓ）を有する、請求項１～６のいずれか１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項８】
前記第２の結合ドメインは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８で示されるアミノ酸配列又はその任意の変異体の第２の軽鎖可変領域、及び、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０で示されるアミノ酸配列又はその任意の変異体の第２の重鎖可変領域を含み、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２で示されるアミノ酸配列であり、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２０で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１８で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：５０で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２４で示されるアミノ酸配列であり、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１８で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：５０で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２で示されるアミノ酸配列であり、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１８で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：５０で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２４で示されるアミノ酸配列であり、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２０で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１８で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：５０で示されるアミノ酸配列である、
請求項１～７のいずれか１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項９】
前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８で示されるアミノ酸配列であり、好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０で示されるアミノ酸配列であり、及び前基第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０で示されるアミノ酸配列であり、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８で示されるアミノ酸配列であり、
好ましくは、前記第１の抗原結合部分の第１の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４で示されるアミノ酸配列であり、前記第１の抗原結合部分の第１の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６で示されるアミノ酸配列であり、前記第２の抗原結合部分の第２の軽鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６で示されるアミノ酸配列であり、及び前記第２の抗原結合部分の第２の重鎖は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８で示されるアミノ酸配列である、
請求項１～８のいずれか１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
【請求項１０】
前記二重特異性抗体の第１の抗原結合部分及び／又は第２の抗原結合部分は、Ｓｅｒ
２２８
Ｐｒｏ、Ｌｅｕ
２３５
Ｇｌｕ及び／又はＰｒｏ
３２９
Ａｌａ突然変異をさらに有する、請求項１～９のいずれの１項に記載の二重特異性抗体又はその抗原結合断片。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本開示は、二重特異性抗体及びその使用、特にＣＤ３及び他の１種の抗原に結合する二重特異性な抗体及びその使用に関する。
続きを表示（約 4,300 文字）【背景技術】
【０００２】
Ｔ細胞二重特異性抗体（又はＴ細胞アダプターと呼ばれる）は、その一端を介して標的細胞の表面抗原（抗原アーム）を認識し、他端を介してＴ細胞のＣＤ３受容体（ＣＤ３アーム）に結合し、ＴＣＲ／ペプチド／ＨＬＡと類似する方式で、Ｔ細胞のＣＤ３を凝集させることで、Ｔ細胞を活性化させ、腫瘍を殺傷する特別な抗体分子である。前世紀８０年代、二重特異性抗体を利用して腫瘍細胞を殺傷することが報告されている（ＳｔａｅｒｚＵＤ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９８５Ａｐｒ１８－２４；３１４（６０１２）：６２８－３１；ＰｅｒｅｚＰ．ｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ．１９８５Ｊｕｌ２５－３１；３１６（６０２６）：３５４－６）。３０年以上の研究をしたところ、抗体のミスマッチという問題が基本的に解決され、３つの二重特異性抗体薬物は、次々と承認されている。承認された適応症に対して非常に優れた効果を示しているが、それに伴う副作用及び使用の制限により、これら二重特異性抗体を早期の広い範囲に使用するは、阻害されている。例えば、初期に承認されたカツマキソマブ（ｃａｔｕｍａｘｏｍａｂ）は、Ｆｃセグメントが肝臓Ｋｕｐｆｆｅｒ細胞に発現されるＦｃγ受容体に結合し、急速なサイトカイン放出を引き起こすため、現在、市販が廃止され、２０１４年に承認されたブリナツモマブ（ｂｌｉｎａｔｕｍｏｍａｂ）は、Ｆｖ抗体断片を採用するため、生物学的半減期が僅か２時間で、低用量で継続的な静脈内注入が必要であり、また、ＦＤＡは、サイトカイン放出症候群及び神経毒性に伴うブラックボックス警告を要求するようになった。
【０００３】
正常な免疫応答過程において、ＴＣＲは、低アフィニティー（約１～１００μＭ）で感染又は突然変異した細胞の外因性ペプチド－ヒト白血球抗原複合体（ＨＬＡ）に結合し、ＣＤ３シグナル伝達複合体（ＣＤ３εγ、ＣＤ３εδ及びＣＤ３ζζがある）を介して活性化シグナルを核内に伝達し、転写因子及びその下流タンパク質（サイトカイン、グランザイム、パーフォリン等）の発現を活性化させ、そのうち、ＴＣＲ複合体に産生されたシグナル強度は、Ｔ細胞の運命を決定するものである。初期に開発されたＣＤ３二重特異性抗体は、多くはＯＫＴ３、Ｌ２Ｋ、ＵＣＨＴ１及びＴＲ６６などの少数のマウス抗体に基づくものであり、アフィニティーが高いため、Ｔ細胞の過剰活性化につながり、多数のサイトカインを放出し、サイトカインストーム症候群を産生すると共に、高いアフィニティーにより二重特異性な抗体の二次リンパ器官における募集に致し、腫瘍組織への曝露を減らす。
【０００４】
抗体Ｆｃ部分のＦｃγ受容体への結合能力は、薬物の安全に影響を与えるもう１つの要因であり、Ｆｃγ受容体は、複数の正常な組織に発現されているため、二重特異性抗体は、Ｆｃにより細胞膜のＦｃγ受容体に結合した後、他端に結合したＣＤ３受容体がＦｃγ受容体の凝集により架橋されて活性化され、重篤なオフターゲット毒性をもたらす。Ｆｃγ受容体への結合能力が弱いヒトＩｇＧ２サブタイプ又はＩｇＧ４サブタイプを使用すること、或は、さらにＣＨ２の対応部位にアミノ酸置換を行い、例えば、Ａｒｍｏｕｒらは、ＩｇＧ１及びＩｇＧ４の第２３３～２３６位（ＥＵ配列番号）をＩｇＧ２の対応配列に置換することで、Ｆｃγ受容体への結合を減少し（ＡｒｍｏｕｒＫＬ，ｅｔａｌ，ＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎＩｇＧｍｏｌｅｃｕｌｅｓｌａｃｋｉｎｇＦｃｇａｍｍａｒｅｃｅｐｔｏｒＩｂｉｎｄｉｎｇａｎｄｍｏｎｏｃｙｔｅｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ．１９９９Ａｕｇ；２９（８）：２６１３－２４）、Ｎｅｗｍａｎらは、ＩｇＧ４に突然変異Ｓｅｒ２２８Ｐｒｏ及びＬｅｕ２３５Ｇｌｕを導入することで、ＩｇＧ４構造を安定させるとともに、Ｆｃγ受容体への結合を減少し（ＮｅｗｍａｎＲ，ｅｔａｌ，ＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＦｃｒｅｇｉｏｎｏｆａｐｒｉｍａｔｉｚｅｄＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｙｔｏｈｕｍａｎＣＤ４ｒｅｔａｉｎｓｉｔｓａｂｉｌｉｔｙｔｏｍｏｄｕｌａｔｅＣＤ４ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｂｕｔｄｏｅｓｎｏｔｄｅｐｌｅｔｅＣＤ４（＋）Ｔｃｅｌｌｓｉｎｃｈｉｍｐａｎｚｅｅｓ．ＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ．２００１Ｆｅｂ；９８（２）：１６４－７４）、Ｉｄｕｓｏｇｉｅらは、Ａｓｐ２７０、Ｌｙｓ３２２、Ｐｒｏ３２９又はＰｒｏ３３１をそれぞれＡｌａに置換することで、ＩｇＧ１の補体Ｃ１ｑへの結合を減らすことができることを見出した（ＩｄｕｓｏｇｉｅＥＥ，ｅｔａｌ，ＭａｐｐｉｎｇｏｆｔｈｅＣ１ｑｂｉｎｄｉｎｇｓｉｔｅｏｎｒｉｔｕｘａｎ，ａｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｂｏｄｙｗｉｔｈａｈｕｍａｎＩｇＧ１Ｆｃ．ＪＩｍｍｕｎｏｌ．２０００Ａｐｒ１５；１６４（８）：４１７８－８４）。
【０００５】
鎖間ミスマッチは、天然ＩｇＧ様二重特異性抗体の開発中の主なプロセスの困難点である。ＭｅｒｃｈａｎｔＡＭらに発明された共同軽鎖（ＭｅｒｃｈａｎｔＡＭ，ｅｔａｌ，ＡｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｒｏｕｔｅｔｏｈｕｍａｎｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃＩｇＧ．ＮａｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９９８．ＰＭＩＤ：９６６１２０４）、又は、ＦｉｓｃｈｅｒＮらがに開発された共同重鎖（ＦｉｓｃｈｅｒＮ，ｅｔａｌ，ＥｘｐｌｏｉｔｉｎｇｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｓｆｏｒｔｈｅｓｃａｌａｂｌｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｎｄｐｌａｔｆｏｒｍｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｎａｔｉｖｅｈｕｍａｎｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃＩｇＧ．ＮａｔＣｏｍｍｕｎ．２０１５Ｆｅｂ１２；６：６１１３）は、通常、複雑なタンパク質工学的改造を行うか、又は、遺伝子組み換え動物を利用して生産する必要がある（ＭｃＷｈｉｒｔｅｒＪ，ｅｔａｌ，Ｃｏｍｍｏｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｍｏｕｓｅ．ＷＯ２０１１０９７６０３．２０１１）、ＣａｒｔｅｒＰら（ＡｔｗｅｌｌＳ，ｅｔａｌ，Ｓｔａｂｌｅｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｓｆｒｏｍｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｔｈｅｄｏｍａｉｎｉｎｔｅｒｆａｃｅｏｆａｈｏｍｏｄｉｍｅｒｕｓｉｎｇａｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙｌｉｂｒａｒｙ，ＪＭｏｌＢｉｏｌ．１９９７Ｊｕｌ４；２７０（１）：２６－３５）。重鎖間のミスマッチを解決するために、抗体Ｆｃセグメントにｋｎｏｂｓ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅｓ相補突然変異を導入し、ＳｃｈａｅｆｅｒＧら（ＳｃｈａｅｆｅｒＷ，ｅｔａｌ，ＩｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｄｏｍａｉｎｃｒｏｓｓｏｖｅｒａｓａｇｅｎｅｒｉｃａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．２０１１）は、軽鎖ミスマッチという問題を解決するために、軽鎖、重鎖のＦａｂ部分又は全長を置換するＣｒｏｓｓＭａｂ技術を開発したが、正しいペアリングを実現するために、一部を置換するＣｒｏｓｓＭａｂ
ＶＨ－ＶＬ
及びＣｒｏｓｓＭａｂ
ＣＨ１－ＣＬ
に追加のペプチドセグメントを導入する必要があり、また、Ｆａｂ全長を置換するＣｒｏｓｓＭａｂ
Ｆａｂ
は、正確な対形成の効率が５０％未満である。
【発明の概要】
【０００６】
二重特異性抗体を発現させる過程において、本発明者らは、λ軽鎖を有するヒト化抗ＣＤ３抗体、及び、κ軽鎖を有する標的抗体を組み合わせると、抗ＣＤ３抗体のλ軽鎖が同種のＣＤ３重鎖と対合する傾向があり、標的抗体のκ軽鎖が同種の標的抗体の重鎖と対合する傾向があることを予期せず見出した。さらに、軽鎖と重鎖の間に相補的な電荷対を設定することで、正確な対形成の効率をさらに向上させることができる。また、ＣＤ２０、ＢＣＭＡ及びＧＰＣ３などの複数の標的抗体及びヒト化抗ＣＤ３抗体により構築された新規なＴ細胞アダプターは、３段階の精製によりいずれも９８～１００％の単量体純度を達成し、ミスマッチ割合が極めに低い（＜１％）と実証された。
【０００７】
本開示は、異なるタイプの軽鎖κλ二重特異性抗体設計及び全長ＩｇＧコンフォメーションを採用する新規なＴ細胞アダプターを提供し、そのうち、標的細胞及びＴ細胞ＣＤ３に結合する抗体アームは、それぞれκ軽鎖及びλ軽鎖を採用し、その同種の重鎖と対合すると共に、相補的な電荷対を導入して正確な対形成の効率を高め、アフィニティーを最適化することで、新規なＴ細胞アダプターは、低濃度で活性化Ｔ細胞を募集し、標的細胞に対して効果的な殺傷を生じ、標的細胞が存在しない場合、Ｔ細胞が活性化されず、また、新規なＴ細胞のκλ二重特異性抗体は、ＦｃγＲ受容体に結合せず、サイトカインストームのリスクを低減することができる。本開示に係る方法で構築された新規なＣＤ２０×ＣＤ３κλ二重特異性抗体、ＢＣＭＡ×ＣＤ３κλ二重特異性抗体及びＧＰＣ３×ＣＤ３κλ二重特異性抗体は、精製收率が高く、３段階精製で９９％超えの純度を達成することができる。動物は、新規なＣＤ２０－ＣＤ３κλ二重特異性抗体によく耐え、新規なＴ細胞アダプターの治療効果及び安全性は、同種類の抗体に優れている。
【０００８】
一の態様において、本開示は、二重特異性抗体又はその抗原結合部分を提供する。
【０００９】
別の態様において、本開示は、前記態様に係る二重特異性抗体又はその抗原結合部分をコードする核酸を提供する。
【００１０】
別の態様において、本開示は、前記態様に係る核酸を含むベクターを提供する。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許