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公開番号2024056938
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-04-23
出願番号2024022697,2020565492
出願日2024-02-19,2019-05-22
発明の名称抗OX40抗体及び使用方法
出願人ベイジーンリミテッド
代理人弁理士法人坂本国際特許商標事務所
主分類C12N 15/13 20060101AFI20240416BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】OX40のOX40Lとの相互作用を妨害せずに、OX40に特異的に結合するOX40アゴニスト抗体を提供すること。
【解決手段】ヒトOX40(ACT35、CD134又はTNFRSF4)に結合する抗体又はその抗原結合フラグメント、この抗体を含む医薬組成物、及び癌等の疾患を治療するためのこの抗体の使用又は組成物である。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
（ｉ）（ａ）配列番号３のＨＣＤＲ（重鎖相補性決定領域）１、（ｂ）配列番号２４のＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び（ｄ）配列番号２５のＬＣＤＲ（軽鎖相補性決定領域）１、（ｅ）配列番号１９のＬＣＤＲ２、（ｆ）配列番号８のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、
（ｉｉ）（ａ）配列番号３のＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８のＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び（ｄ）配列番号６のＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１９のＬＣＤＲ２、（ｆ）配列番号８のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、
（ｉｉｉ）（ａ）配列番号３のＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３のＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び（ｄ）配列番号６のＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７のＬＣＤＲ２、（ｆ）配列番号８のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は
（ｉｖ）（ａ）配列番号３のＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号４のＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号５のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び（ｄ）配列番号６のＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号７のＬＣＤＲ２、（ｆ）配列番号８のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、
ヒトＯＸ４０に特異的に結合する抗体又はその抗原結合フラグメント。
続きを表示（約 1,700 文字）【請求項２】
（ｉ）配列番号２６と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２８と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｉｉ）配列番号２０と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２２と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｉｉｉ）配列番号１４と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号１６と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、又は
（ｉｖ）配列番号９と少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号１１と少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、
請求項１に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
配列番号２６、２８、２０、２２、１４、１６、９及び／又は１１の中の１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個のアミノ酸が、挿入、削除又は置換されている、請求項２に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項４】
（ｉ）配列番号２６を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２８を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｉｉ）配列番号２０を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２２を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｉｉｉ）配列番号１４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号１６を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、又は
（ｉｖ）配列番号９を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号１１を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、
請求項１に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項５】
モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト遺伝子操作抗体、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、又はＦ（ａｂ’）
２
フラグメントである、請求項１～４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項６】
ＯＸ４０アゴニスト活性を有する、請求項１～５のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項７】
ヒトＯＸ４０のＨ１５３～Ｄ１７０からなる群から選択される１以上のアミノ酸残基を含むエピトープでヒトＯＸ４０に結合する、請求項１～６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項８】
ヒトＯＸ４０のＨ１５３、Ｔ１５４、Ｉ１６５、Ｅ１６７及びＤ１７０からなる群から選択される１以上のアミノ酸残基を含むエピトープでヒトＯＸ４０に結合する、請求項１～６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項９】
ヒトＯＸ４０のＨ１５３、Ｉ１６５及びＥ１６７からなる群から選択される１以上のアミノ酸残基を含むエピトープでヒトＯＸ４０に結合する、請求項１～６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
配列番号３０で、又は配列番号３０の内部でヒトＯＸ４０に結合する、請求項１～６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本明細書には、ヒトＯＸ４０に結合する抗体又はその抗原結合フラグメント、この抗体を含む組成物、及び癌の治療に使用する方法が開示される。
続きを表示（約 4,300 文字）【背景技術】
【０００２】
ＯＸ４０（ＡＣＴ３５、ＣＤ１３４又はＴＮＦＲＳＦ４とも呼ばれる）は、約５０ＫＤのＩ型膜貫通糖タンパク質であり、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）の一員である（Croft, 2010；Gough and Weinberg, 2009）。成熟したヒトＯＸ４０は、２４９アミノ酸（ＡＡ）残基で構成され、３７ＡＡの細胞質側末端と１８５ＡＡの細胞外領域を有する。ＯＸ４０の細胞外ドメインは、３つの完全なシステインリッチドメイン（ＣＲＤ）と１つの不完全なＣＲＤを含む。ＯＸ４０の細胞内ドメインは、１つの保存されたシグナル伝達関連ＱＥＥモチーフを含み、これは、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ３及びＴＲＡＦ５を含むいくつかのＴＮＦＲ関連因子（ＴＲＡＦ）への結合を媒介し、ＯＸ４０が細胞内キナーゼに結合できるようにする（Arch and Thompson, 1998；Willoughby et al., 2017)。
【０００３】
ＯＸ４０は、活性化されたラットＣＤ４
＋
Ｔ細胞上で最初に発見され、その後、Ｔ細胞からネズミとヒトの相同体がクローン化された（al-Shamkhani et al., 1996；Calderhead et al., 1993）。Ｔヘルパー（Ｔｈ）１細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１７細胞及び制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞を含む、活性化されたＣＤ４
＋
Ｔ細胞の上での発現に加えて、ＣＤ８
＋
Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞、好中球及びＮＫ細胞の表面上でも、ＯＸ４０発現が見られる（Croft, 2010）。対照的に、ナイーブＣＤ４
＋
Ｔ細胞、ナイーブＣＤ８
＋
Ｔ細胞、及びほとんどの休止メモリーＴ細胞の上で、低いＯＸ４０発現が見られる（Croft, 2010；Soroosh et al., 2007）。ナイーブＴ細胞上でのＯＸ４０の表面発現は一過性である。ＴＣＲの活性化後、Ｔ細胞上のＯＸ４０の発現は、２４時間以内に大幅に増加し、２～３日でピークに達し、５～６日間持続する（Gramaglia et al., 1998）。
【０００４】
ＯＸ４０のリガンド（ＯＸ４０Ｌ、ｇｐ３４、ＣＤ２５２又はＴＮＦＳＦ４とも呼ばれる）は、ＯＸ４０の唯一のリガンドである。ＴＮＦＳＦ（腫瘍壊死因子スーパーファミリー）の他のメンバーと同様に、ＯＸ４０ＬはＩＩ型糖タンパク質であり、１８３ＡＡを含み、２３ＡＡの細胞内ドメイン及び１３３ＡＡの細胞外ドメインを有する（Croft, 2010；Gough and Weinberg, 2009）。ＯＸ４０Ｌは、細胞表面上にホモマー三量体複合体を自然に形成する。リガンド三量体は、主に受容体のＣＲＤ１、ＣＲＤ２及び部分的なＣＲＤ３領域を介して、しかし、ＣＲＤ４の関与無しに、リガンドモノマー－モノマーの境界面でＯＸ４０の３つの複製物と相互作用する（Compaan and Hymowitz, 2006）。ＯＸ４０Ｌは、活性化された抗原提示細胞（ＡＰＣ）上で主に発現する。このＡＰＣには、活性化されたＢ細胞（Stuber et al., 1995）、成熟した従来の樹状細胞（ＤＣ）（Ohshima et al., 1997）、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）（Ito et al., 2004）、マクロファージ（Weinberg et al., 1999）及びランゲルハンス細胞（Sato et al., 2002）が含まれる。更に、ＯＸ４０Ｌは、ＮＫ細胞、肥満細胞、活性化Ｔ細胞のサブセット、血管内皮細胞及び平滑筋細胞等の他の細胞種の上でも発現することが分かっている（Croft, 2010；Croft et al., 2009）。
【０００５】
三量体のＯＸ４０Ｌによるライゲーション又はアゴニスト抗体による二量体化を経由するＯＸ４０の三量体化は、アダプター分子のＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ３及び／又はＴＲＡＦ５のリクルート及び細胞内ＱＥＥモチーフへのドッキングに寄与する（Arch and Thompson, 1998；Willoughby et al., 2017）。ＴＲＡＦ２及びＴＲＡＦ３のリクルートとドッキングは、更に古典的ＮＦ－κＢ１経路及び非古典的ＮＦ－κＢ２経路の両方の活性化を導くことができる。これらの経路は、Ｔ細胞の生存、分化、増殖、サイトカイン産生及びエフェクター機能の調節に重要な役割を果たす（Croft, 2010；Gramaglia et al., 1998；Huddleston et al., 2006；Rogers et al., 2001；Ruby and Weinberg, 2009；Song et al., 2005a；Song et al., 2005b；Song et al., 2008）。
【０００６】
ＯＸ４０は正常組織では発現が低く、リンパ器官のリンパ球上で主に発現する（Durkop et al., 1995）。しかし、免疫細胞上でのＯＸ４０発現のアップレギュレーションが、動物モデルと、自己免疫疾患（Carboni et al., 2003；Jacquemin et al., 2015；Szypowska et al., 2014）及び癌（Kjaergaard et al., 2000；Vetto et al., 1997；Weinberg et al., 2000）等の病的状態（Redmond and Weinberg, 2007）のヒト患者の両方で頻繁に観察されている。特に、ＯＸ４０の発現増加は、結腸直腸癌及び皮膚黒色腫の患者の生存期間の延長に関連しており、遠隔転移及びより進行した腫瘍の特徴の発生と逆相関する（Ladanyi et al., 2004；Petty et al., 2002；Sarff et al., 2008）。抗ＯＸ４０抗体治療が、様々なマウスモデルで抗腫瘍効果を引き出すことができることも示され（Aspeslagh et al., 2016）、免疫療法のターゲットとしてのＯＸ４０の可能性が示された。Curti et alによって実施された最初の癌患者の臨床試験において、抗腫瘍効果及び腫瘍特異的Ｔ細胞の活性化の証拠が、アゴニスト性の抗ＯＸ４０モノクローナル抗体を用いて観察され、ＯＸ４０抗体が抗腫瘍Ｔ細胞応答を高める有用性を有することが示された（Curti et al., 2013）。
【０００７】
抗腫瘍効果を媒介する際のアゴニスト性の抗ＯＸ４０抗体の作用機序は、主にマウス腫瘍モデルで研究された（Weinberg et al., 2000）。最近まで、腫瘍におけるアゴニスト性の抗ＯＸ４０抗体の作用機序は、エフェクターＴ細胞における共刺激シグナル伝達経路を誘発する能力、及びＴｒｅｇ細胞の分化と機能への抑制効果に帰された（Aspeslagh et al., 2016；Ito et al., 2006；St Rose et al., 2013；Voo et al., 2013）。最近の研究で、動物腫瘍モデルと癌患者の両方で、腫瘍浸潤性ＴｒｅｇがエフェクターＴ細胞（ＣＤ４
＋
とＣＤ８
＋
の両方）及び末梢Ｔｒｅｇよりも高いレベルのＯＸ４０を発現することが示された（Lai et al., 2016；Marabelle et al., 2013b；Montler et al., 2016；Soroosh et al., 2007；Timperi et al., 2016）。従って、抗ＯＸ４０抗体が抗腫瘍応答を誘発する二次的効果は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）及び／又は抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を介して腫瘍内ＯＸ４０
＋
Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させる際のＦｃ媒介エフェクター機能に依存する（Aspeslagh et al., 2016；Bulliard et al., 2014；Marabelle et al., 2013a；Marabelle et al., 2013b；Smyth et al., 2014）。この研究によって、Ｆｃ媒介エフェクター機能を有するアゴニスト性の抗ＯＸ４０抗体が、腫瘍内Ｔｒｅｇを優先的に枯渇させ、腫瘍微小環境におけるＴｒｅｇに対するＣＤ８
＋
エフェクターＴ細胞の比率を改善することができ、その結果、抗腫瘍免疫応答が改善し、腫瘍の退縮が増加し、生存率が改善されることが示される（Bulliard et al., 2014；Carboni et al., 2003；Jacquemin et al., 2015；Marabelle et al., 2013b）。これらの発見に基づいて、アゴニスト性の活性及びＦｃ媒介エフェクター機能の両方を備えるアゴニスト性の抗ＯＸ４０抗体を開発するアンメット・メディカル・ニーズがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
今まで、病院で用いられるアゴニスト性の抗ＯＸ４０抗体はほとんど、ＯＸ４０－ＯＸ４０Ｌの相互作用を遮断するリガンド競合性の抗体である（例えば、ＷＯ２０１６／１９６２２８Ａ１）。ＯＸ４０－ＯＸ４０Ｌの相互作用は効果的な抗腫瘍免疫を高めるために不可欠であるため、ＯＸ４０－ＯＸ４０Ｌの遮断によって、これらのリガンド競合性の抗体の有効性が制限される。従って、ＯＸ４０のＯＸ４０Ｌとの相互作用を妨害せずに、ＯＸ４０に特異的に結合するＯＸ４０アゴニスト抗体は、癌及び自己免疫疾患の治療において有用性を有する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本開示は、ＯＸ４０を活性化し、免疫細胞中のシグナル伝達を誘導し、従って抗腫瘍免疫を促進する、アゴニスト性の抗ＯＸ４０抗体及びその抗原結合フラグメントに向けられる。
【００１０】
１つの実施態様において、本開示は、ヒトＯＸ４０に結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。１つの側面において、本開示の抗体は、ＯＸ４０Ｌと競合しないか、又はＯＸ４０のそのリガンドＯＸ４０Ｌへの結合を妨害しない。
（【００１１】以降は省略されています）

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