特許ウォッチ

公開番号2024054266
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-04-16
出願番号2024017935,2022026738
出願日2024-02-08,2016-08-10
発明の名称組織因子経路インヒビター抗体およびその使用
出願人ファイザー・インク
代理人個人,個人,個人,個人
主分類C07K 16/18 20060101AFI20240409BHJP(有機化学)
要約【課題】出血性障害の処置および凝血時間の短縮に有用である、組織因子経路インヒビター(TFPI)を特異的に結合させ、その活性を阻害する抗体およびその抗原結合断片を提供する。
【解決手段】組織因子経路インヒビター(TFPI)のKunitzドメイン2(K2)中のエピトープに特異的に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片とする。
【選択図】図1-1
特許請求の範囲【請求項１】
組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のＫｕｎｉｔｚドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する単離抗体またはその抗原結合性断片であって、抗体が、配列番号４８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）相補性決定領域１（ＣＤＲ－Ｈ１）、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、および配列番号５０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨ、ならびに配列番号４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）相補性決定領域１（ＣＤＲ－Ｌ１）、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、および配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む単離抗体またはその抗原結合性断片。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）に結合する抗体に関する。
続きを表示（約 16,000 文字）【背景技術】
【０００２】
血友病ＡおよびＢは、それぞれ血漿タンパク質第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）または第ＩＸ因子（ＦＩＸ）の機能的欠損から生じるＸ連鎖遺伝障害である。血友病の臨床的重症度は、凝血因子活性の残留レベルに関係付けられる。１％未満の因子活性は、重度の表現型に関連し、中等度の血友病は、２％～５％の因子活性に関連し、軽度の血友病は、５％～４０％の因子活性に関連する。
【０００３】
これらの障害のスタンダードオブケアは、静脈内輸注による不足している凝固因子の補充である。補充因子は一般に、Ｘｙｎｔｈａ（第ＶＩＩＩ因子）またはＢｅｎｅＦＩＸ（ＦＩＸ）などの組換えタンパク質であるが、様々な純度の血漿由来産物が依然として使用されている。補充因子を用いた処置は、出血を、それが起こった際にオンデマンドで処置する一時的なもの、または保護範囲内で因子レベルを維持することによって出血を防止する予防的なものであり得る。予防的処置が、出血、および血友病患者における主要な病的状態である関連した関節損傷を防止するという重要な証拠が存在する。有効な予防的処置は、毎週３～４回の因子の静脈注射を必要とし、それは、コンプライアンスの困難および生活の質の低減をもたらす。処置のコストも、凝固因子の製造の複雑性に起因して高価である。さらに、重度血友病Ａの患者の最大で３２％というかなりの数の患者が、自分の遺伝子中に突然変異を有する患者によって異種タンパク質と見られる投与された因子に対して中和抗体を発生させる。これらの患者は、バイパス因子、第ＶＩＩａ因子（ＮｏｖｏＳｅｖｅｎ）などの処置の代替手段を必要とする。
【０００４】
療法の代替手法は、インタクトな外因経路を強化することにより、補充因子の必要性を迂回することである。血友病の患者は、自身のインタクトな外因経路を通じて出血を停止する何らかの能力を有するが、これは、大量出血を遮断し、または自発性出血を防止するのに十分ではない。外因経路は、組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）により急速に遮断されるので、保護をもたらすのに不十分である。
【０００５】
ＷＯ２０１０／０１７１９６（Ｂａｙｅｒ）、ＷＯ２０１１／１０９４５２（Ｂａｙｅｒ）、ＷＯ２０１４／１４４５７７（Ｂａｙｅｒ）、ＷＯ２０１０／０７２６８７（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋ）、ＷＯ２０１２／００１０８７（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋ）、ＷＯ２０１４／１４０２４０（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋ）、およびＷＯ２０１５／００７８８０（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋ）には、ヒトＴＦＰＩに結合する抗体が開示されているが、これらは、これらを血友病の新規潜在的治療剤にする特性を有する本発明の抗体をもたらさない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
凝固因子を投薬する頻度を低減し、因子を使用する量を低減し、送達の代替経路（例えば、皮下）を可能にし、かつ中和抗体を産生するより低いリスクを有しながら予防的保護をもたらす生成物は、血友病の患者に対する重要な未充足ニーズを満たす。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）に結合する抗体（およびこれらの抗原結合断片）が本明細書に開示および例示されている。
【０００８】
当業者は、慣例的な実験を使用するだけで、本明細書に記載の本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を認識したり、または確認可能になったりすると予想される。このような均等物は、以下の実施形態（Ｅ）によって包含されるように意図されている。
Ｅ１．組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のＫｕｎｉｔｚドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する単離抗体またはその抗原結合断片であって、エピトープは、配列番号２の番号付けによる残基Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１を含む、単離抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２．ＴＦＰＩのＫｕｎｉｔｚドメイン１（Ｋ１）に結合しない、実施形態１に記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＣｙｓ１０６、Ｇｌｙ１０８、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、およびＧｌｙ１３２からなる群から選択される１個または複数の残基をさらに含む、実施形態１または２に記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ４．エピトープが、配列番号２の番号付けによる残基Ｃｙｓ１０６、Ｇｌｙ１０８、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、およびＧｌｙ１３２をさらに含む、実施形態１から３のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ５．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＡｓｐ１０２、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８からなる群から選択される１個または複数の残基をさらに含む、実施形態１から４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ６．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＡｓｐ１０２、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８をさらに含む、実施形態１から５のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ７．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＥ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｔ１１１、Ｙ１１３、Ｆ１１４、Ｎ１１６、Ｑ１１８、Ｑ１２１、Ｃ１２２、Ｅ１２３、Ｒ１２４、Ｆ１２５、Ｋ１２６、およびＬ１４０からなる群から選択される１個または複数の残基を含まない、実施形態１から６のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ８．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＥ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｔ１１１、Ｙ１１３、Ｆ１１４、Ｎ１１６、Ｑ１１８、Ｑ１２１、Ｃ１２２、Ｅ１２３、Ｒ１２４、Ｆ１２５、Ｋ１２６、およびＬ１４０を含まない、実施形態１から７のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ９．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＤ３１、Ｄ３２、Ｐ３４、Ｃ３５、Ｋ３６、Ｅ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｋ１２６、およびＧ１２８からなる群から選択される１個または複数の残基を含まない、実施形態１から６のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１０．エピトープが、配列番号２の番号付けによるＤ３１、Ｄ３２、Ｐ３４、Ｃ３５、Ｋ３６、Ｅ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｋ１２６、およびＧ１２８を含まない、実施形態１から６および９のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１１．エピトープが、Ａｓｐ１０２、Ｇｌｙ１０４、Ｉｌｅ１０５、Ｃｙｓ１０６、Ａｒｇ１０７、Ｇｌｙ１０８、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、Ｇｌｙ１３２、Ａｓｎ１３３、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８（配列番号２の番号付けによる）からなる群から選択される１個または複数の残基を含み、エピトープ残基が、抗体またはその抗原結合断片との相互作用に起因する埋没表面積（ＢＳＡ）の非ゼロ変化を有する、実施形態１から１０のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１２．エピトープが、Ａｓｐ１０２、Ｇｌｙ１０４、Ｉｌｅ１０５、Ｃｙｓ１０６、Ａｒｇ１０７、Ｇｌｙ１０８、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、Ｇｌｙ１３２、Ａｓｎ１３３、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８（配列番号２の番号付けによる）を含む、実施形態１１に記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１３．エピトープが、Ａｓｐ１０２、Ａｒｇ１０７、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、およびＬｅｕ１３１（配列番号２の番号付けによる）からなる群から選択される１個または複数の残基を含み、エピトープ残基が、抗体またはその抗原結合断片由来の残基との水素結合に関与する、実施形態１から１２のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１４．エピトープが、Ａｓｐ１０２、Ａｒｇ１０７、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、およびＬｅｕ１３１（配列番号２の番号付けによる）を含む、実施形態１３に記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１５．エピトープが、Ａｓｐ１０２、Ｇｌｙ１０４、Ｉｌｅ１０５、Ｃｙｓ１０６、Ａｒｇ１０７、Ｇｌｙ１０８、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、Ｇｌｙ１３２、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８（配列番号２の番号付けによる）からなる群から選択される１個または複数の接触残基を含む、実施形態１から１４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１６．エピトープが、Ａｓｐ１０２、Ｇｌｙ１０４、Ｉｌｅ１０５、Ｃｙｓ１０６、Ａｒｇ１０７、Ｇｌｙ１０８、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、Ｇｌｙ１３２、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８（配列番号２の番号付けによる）を含む、実施形態１５に記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１７．ＴＦＰＩとの相互作用に起因するＢＳＡの非ゼロ変化を有する、以下の重（Ｈ）鎖および軽（Ｌ）鎖パラトープ残基（Ｋａｂａｔによる番号付け）：Ｈ３３Ａｌａ、Ｈ５８Ｔｙｒ、Ｈ９５Ｌｅｕ、Ｈ９６Ｇｌｙ、Ｈ９７Ａｌａ、Ｈ９８Ｔｈｒ、Ｈ９９Ｓｅｒ、Ｈ１００Ｌｅｕ、Ｈ１００ＡＳｅｒ、Ｌ２９Ａｌａ、Ｌ３１Ｔｙｒ、Ｌ９１Ｔｙｒ、Ｌ９５ＡＳｅｒ、およびＬ９５ＢＧｌｙを含む、実施形態１から１６のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１８．（ａ）Ｈ４７はＴｒｐまたはＴｙｒであり、（ｂ）Ｈ５８はＴｙｒであり、（ｃ）Ｌ９１はＴｙｒまたはＡｒｇである、接触残基（Ｋａｂａｔによる番号付け）を含み、（ｄ）Ｌ９６はＧｌｙまたはＡｓｎであるものを含んでもよい、実施形態１から１７のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ１９．（ａ）Ｈ３３は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、またはＶａｌであり、（ｂ）Ｈ４７は、ＴｒｐまたはＴｙｒであり、（ｃ）Ｈ５０は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｄ）Ｈ５１は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｅ）Ｈ５２は、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｆ）Ｈ５６は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｇ）Ｈ５８は、Ｔｙｒであり、（ｈ）Ｈ９５は、Ｌｅｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒであり、（ｉ）Ｈ９６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＶａｌであり、（ｊ）Ｈ９７は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｋ）Ｈ９８は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｌ）Ｈ９９は、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、またはＰｒｏであり、（ｍ）Ｈ１００は、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｎ）Ｈ１００Ａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＴｒｐであり、（ｏ）Ｌ２９は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｐ）Ｌ３１は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｑ）Ｌ９１は、ＴｙｒまたはＡｒｇであり、（ｒ）Ｌ９５Ａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｓ）Ｌ９５Ｂは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｔ）Ｌ９５Ｃは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌである接触残基（Ｋａｂａｔによる番号付け）を含み、（ｕ）Ｌ９３は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌであり、（ｖ）Ｌ９６は、ＧｌｙまたはＡｓｎである残基を含んでもよい、実施形態１から１８のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２０．（ａ）Ｈ３３は、ＡｌａまたはＶａｌであり、（ｂ）Ｈ４７は、Ｔｒｐであり、（ｃ）Ｈ５０は、Ａｌａであり、（ｄ）Ｈ５１は、Ｉｌｅであり、（ｅ）Ｈ５２は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒであり、（ｆ）Ｈ５６は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、またはＬｙｓであり、（ｇ）Ｈ５８は、Ｔｙｒであり、（ｈ）Ｈ９５は、Ｌｅｕであり、（ｉ）Ｈ９６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、またはＶａｌであり、（ｊ）Ｈ９７は、Ａｌａであり、（ｋ）Ｈ９８は、Ｔｈｒ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒであり、（ｌ）Ｈ９９は、Ｓｅｒであり、（ｍ）Ｈ１００は、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、またはＴｙｒであり、（ｎ）Ｈ１００Ａは、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、またはＴｒｐであり、（ｏ）Ｌ２９は、Ａｌａであり、（ｐ）Ｌ３１は、Ｔｙｒであり、（ｑ）Ｌ９１は、Ｔｙｒであり、（ｒ）Ｌ９５Ａは、Ｓｅｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、またはＴｙｒであり、（ｓ）Ｌ９５Ｂは、Ｇｌｙであり、（ｔ）Ｌ９５Ｃは、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＶａｌである残基（Ｋａｂａｔによる番号付け）を含み、（ｕ）Ｌ９３はＳｅｒであり、（ｖ）Ｌ９６は、Ｇｌｙである残基を含んでもよい、実施形態１から１８のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２１．（ａ）Ｈ３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、またはＰｈｅであり、（ｂ）Ｈ４７は、ＴｒｐまたはＴｙｒであり、（ｃ）Ｈ５０は、Ａｌａ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、またはＰｈｅであり、（ｄ）Ｈ５１は、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＰｒｏであり、（ｅ）Ｈ５２は、Ｓｅｒ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ、またはＴｙｒであり、（ｆ）Ｈ５６は、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、（ｇ）Ｈ５８は、Ｔｙｒであり、（ｈ）Ｈ９５は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｎ、またはＰｈｅであり、（ｉ）Ｈ９６は、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、またはＬｙｓであり、（ｊ）Ｈ９７は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、またはＩｌｅであり、（ｋ）Ｈ９８は、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、またはＨｉｓであり、（ｌ）Ｈ９９は、Ｓｅｒ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、またはＰｈｅであり、（ｍ）Ｈ１００は、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＰｈｅであり、（ｎ）Ｈ１００Ａは、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐであり、（ｏ）Ｌ２９は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｎであり、（ｐ）Ｌ３１は、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、またはＴｒｐであり、（ｑ）Ｌ９１は、ＴｙｒまたはＡｒｇであり、（ｒ）Ｌ９５Ａは、Ｓｅｒ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＨｉｓであり、（ｓ）Ｌ９５Ｂは、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、またはＰｒｏであり、（ｔ）Ｌ９５Ｃは、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである接触残基（Ｋａｂａｔによる番号付け）を含み、（ｕ）Ｌ９３は、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、またはＨｉｓであり、（ｖ）Ｌ９６は、ＧｌｙまたはＡｓｎである残基を含んでもよい、実施形態１から１８のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２２．以下の接触残基（Ｋａｂａｔによる番号付け）：Ｈ３３Ａｌａ、Ｈ４７Ｔｒｐ、Ｈ５０Ａｌａ、Ｈ５１Ｉｌｅ、Ｈ５２Ｓｅｒ、Ｈ５６Ｓｅｒ、Ｈ５８Ｔｙｒ、Ｈ９５Ｌｅｕ、Ｈ９６Ｇｌｙ、Ｈ９７Ａｌａ、Ｈ９８Ｔｈｒ、Ｈ９９Ｓｅｒ、Ｈ１００Ｌｅｕ、Ｈ１００ＡＳｅｒ、Ｌ２９Ａｌａ、Ｌ３１Ｔｙｒ、Ｌ９１Ｔｙｒ、Ｌ９５ＡＳｅｒ、Ｌ９５ＢＧｌｙ、およびＬ９５ＣＳｅｒを含み、以下の残基：Ｌ９３ＳｅｒおよびＬ９６Ｇｌｙを含んでもよい、実施形態１から１８のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２３．
（ａ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）相補性決定領域１（ＣＤＲ－Ｈ１）、
（ｂ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ－Ｈ２）、および
（ｃ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ－Ｈ３）
を含むＶＨを含む、実施形態１から２２のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２４．配列番号４１のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、およびＣＤＲ－Ｈ３配列を含む、実施形態１から２２のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２５．ヒトＶＨ３フレームワーク配列を含む、実施形態１から２４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２６．ヒトＶＨ１フレームワーク配列を含む、実施形態１から２４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２７．ヒトＶＨ５フレームワーク配列を含む、実施形態１から２４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２８．ヒト生殖系列ＩＧＨＶ３－２３またはＩＧＨＶ１－６９のＶＨフレームワーク配列を含む、実施形態１から２４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ２９．ヒト生殖系列ＩＧＨＶ３－７のＶＨフレームワーク配列を含む、実施形態１から２４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３０．ヒトＶＨ生殖系列コンセンサスフレームワーク配列を含む、実施形態１から２４のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３１．配列番号４１、６３、および６５からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、実施形態１から３０のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３２．配列番号４１、６３、および６５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含む、実施形態１から３１のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３３．配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、実施形態１から３２のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３４．配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、実施形態１から３２のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３５．配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、実施形態１から３２のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３６．
（ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）相補性決定領域１（ＣＤＲ－Ｌ１）、
（ｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ－Ｌ２）、および
（ｃ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ－Ｌ３）
を含むＶＬを含む、実施形態１から３５のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３７．配列番号３６のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、およびＣＤＲ－Ｌ３配列を含む、実施形態１から３５のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３８．ヒトＶ
κ
フレームワーク配列を含む、実施形態１から３７のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
Ｅ３９．ヒトＶ
λ
フレームワーク配列を含む、実施形態１から３７のいずれか一つに記載の抗体またはその抗原結合断片。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
様々な抗ＴＦＰＩ抗体およびＴＦＰＩのＫ２ドメインの共結晶構造を示す図面である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製抗体Ｍａｂ２９７４を指す。Ｎｏｖｏ２０２１抗体は、「ｈｚ４Ｆ３６」とも呼ばれる。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
様々な抗ＴＦＰＩ抗体およびＴＦＰＩのＫ２ドメインの共結晶構造を示す図面である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製抗体Ｍａｂ２９７４を指す。Ｎｏｖｏ２０２１抗体は、「ｈｚ４Ｆ３６」とも呼ばれる。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
様々な抗ＴＦＰＩ抗体およびＴＦＰＩのＫ２ドメインの共結晶構造を示す図面である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製抗体Ｍａｂ２９７４を指す。Ｎｏｖｏ２０２１抗体は、「ｈｚ４Ｆ３６」とも呼ばれる。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
様々な抗ＴＦＰＩ抗体およびＴＦＰＩのＫ２ドメインの共結晶構造を示す図面である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製抗体Ｍａｂ２９７４を指す。Ｎｏｖｏ２０２１抗体は、「ｈｚ４Ｆ３６」とも呼ばれる。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
様々な抗ＴＦＰＩ抗体およびＴＦＰＩのＫ２ドメインの共結晶構造を示す図面である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製抗体Ｍａｂ２９７４を指す。Ｎｏｖｏ２０２１抗体は、「ｈｚ４Ｆ３６」とも呼ばれる。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
様々な抗ＴＦＰＩ抗体およびＴＦＰＩのＫ２ドメインの共結晶構造を示す図面である。特に、図１Ｆに示したように、本明細書に開示の例示的な抗体、ＴＦＰＩ－２３、ＴＦＰＩ－２４、および４Ｄ８はすべて、他の参照抗体と比較してＫ２ドメインの非重複エピトープに結合する。ＴＦＰＩ－１０６は、ＴＦＰＩ－２３と同じ部位に結合し、ＴＦＰＩ－１１８は、ＴＦＰＩ－２４と同じ部位に結合する。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製抗体Ｍａｂ２９７４を指す。Ｎｏｖｏ２０２１抗体は、「ｈｚ４Ｆ３６」とも呼ばれる。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
ＴＦＰＩのＫ２ドメイン内のエピトープ残基と様々な抗ＴＦＰＩ抗体由来のパラトープ残基との相互作用を示す略図である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製Ｍａｂ２９７４を指す。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
ＴＦＰＩのＫ２ドメイン内のエピトープ残基と様々な抗ＴＦＰＩ抗体由来のパラトープ残基との相互作用を示す略図である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製Ｍａｂ２９７４を指す。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
ＴＦＰＩのＫ２ドメイン内のエピトープ残基と様々な抗ＴＦＰＩ抗体由来のパラトープ残基との相互作用を示す略図である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製Ｍａｂ２９７４を指す。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
ＴＦＰＩのＫ２ドメイン内のエピトープ残基と様々な抗ＴＦＰＩ抗体由来のパラトープ残基との相互作用を示す略図である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製Ｍａｂ２９７４を指す。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
ＴＦＰＩのＫ２ドメイン内のエピトープ残基と様々な抗ＴＦＰＩ抗体由来のパラトープ残基との相互作用を示す略図である。「Ｒ＆Ｄ」または「Ｒ＆ＤＦａｂ」は、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ製Ｍａｂ２９７４を指す。「クローン２３」は、ＴＦＰＩ－２３を指し、「クローン２４」は、ＴＦＰＩ－２４を指す。
マウス傷害モデルにおける様々な抗ＴＦＰＩ抗体のｉｎｖｉｖｏ効力を示す図である。図３Ａは、２Ａ８－２００（本研究において参照抗体として使用した）を投与したときの血友病Ａ第ＶＩＩＩ因子欠損（ＦＶＩＩＩ－／－）マウスにおける出血低下の継続時間を示す。抗体を、傷害前の示された時点（時間（ｈ））に６ｍｇ／ｋｇで静脈注射により血友病Ａマウス（ＦＶＩＩＩ－／－）に投与した。次いで失血の全体積（μＬ）を尾切断後に測定した。媒体（生理食塩水）処置血友病Ａマウスは、対照として機能を果たした。すべての測定は、平均±ＳＥＭとして提示されている。
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＝Ｐ＜０．０５。ＦＶＩＩＩ＋／＋（野生型）マウスは、生理食塩水を受けた。ｎ＝５／群。
マウス傷害モデルにおける様々な抗ＴＦＰＩ抗体のｉｎｖｉｖｏ効力を示す図である。図３Ｂは、２Ａ８抗体（本研究において参照抗体として使用した）を投与したときの血友病Ａ第ＶＩＩＩ因子欠損（ＦＶＩＩＩ－／－）マウスにおける出血低下の継続時間を示す。抗体を、傷害前の示された時点（時間（ｈ））に６ｍｇ／ｋｇで静脈注射により血友病Ａマウス（ＦＶＩＩＩ－／－）に投与した。次いで失血の全体積（μＬ）を尾切断後に測定した。媒体（生理食塩水）処置血友病Ａマウスは、対照として機能を果たした。すべての測定は、平均±ＳＥＭとして提示されている。
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＝Ｐ＜０．０５。ＦＶＩＩＩ＋／＋（野生型）マウスは、生理食塩水を受けた。ｎ＝５／群。
マウス傷害モデルにおける様々な抗ＴＦＰＩ抗体のｉｎｖｉｖｏ効力を示す図である。図３Ｃは、ＴＦＰＩ４Ｄ８（対照）、ＴＦＰＩ－２１、ＴＦＰＩ－２３、およびＴＦＰＩ－２４抗体を投与したときの血友病Ａマウスにおける効果の継続時間を示す。抗体を、傷害前の示された時点（時間（ｈ））に６ｍｇ／ｋｇで静脈注射により血友病Ａマウス（ＦＶＩＩＩ－／－）に投与した。次いで失血の全体積（μＬ）を尾切断後に測定した。媒体（生理食塩水）処置血友病Ａマウスは、対照として機能を果たした。すべての測定は、平均±ＳＥＭとして提示されている。
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＝Ｐ＜０．０５。ＦＶＩＩＩ＋／＋（野生型）マウスは、生理食塩水を受けた。ｎ＝５／群。
マウス傷害モデルにおける様々な抗ＴＦＰＩ抗体のｉｎｖｉｖｏ効力を示す図である。図３Ｄは、ＴＦＰＩ－１０６抗体を投与したときの血友病Ａマウスにおける継続時間を示す。抗体を、傷害前の示された時点（時間（ｈ））に６ｍｇ／ｋｇで静脈注射により血友病Ａマウス（ＦＶＩＩＩ－／－）に投与した。次いで失血の全体積（μＬ）を尾切断後に測定した。媒体（生理食塩水）処置血友病Ａマウスは、対照として機能を果たした。すべての測定は、平均±ＳＥＭとして提示されている。
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＝Ｐ＜０．０５。ＦＶＩＩＩ＋／＋（野生型）マウスは、生理食塩水を受けた。ｎ＝５／群。
マウス傷害モデルにおける様々な抗ＴＦＰＩ抗体のｉｎｖｉｖｏ効力を示す図である。図３Ｅは、ＴＦＰＩ－１１８抗体を投与したときの血友病Ａマウスにおける継続時間を示す。抗体を、傷害前の示された時点（時間（ｈ））に６ｍｇ／ｋｇで静脈注射により血友病Ａマウス（ＦＶＩＩＩ－／－）に投与した。次いで失血の全体積（μＬ）を尾切断後に測定した。媒体（生理食塩水）処置血友病Ａマウスは、対照として機能を果たした。すべての測定は、平均±ＳＥＭとして提示されている。
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＝Ｐ＜０．０５。ＦＶＩＩＩ＋／＋（野生型）マウスは、生理食塩水を受けた。ｎ＝５／群。
ＴＦＰＩ－１０６抗体を投与したときの尾切断後の血友病Ｂマウスにおける出血の継続時間を示す図である。抗体を、傷害前の示された時点（時間（ｈ））に６ｍｇ／ｋｇで静脈注射により血友病Ｂマウスに投与した。次いで失血の全体積（μＬ）を尾切断後に測定した。媒体（生理食塩水）処置血友病Ａマウスは、対照として機能を果たした。すべての測定は、平均±ＳＥＭとして提示されている。
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＝Ｐ＜０．０５。ｎ＝４～５／群。
図５は、それぞれが６つのパネル（図５Ａ、１～６および図５Ｂ、１～６）を含むパネルＡおよびＢを含み、ＴＦＰＩが野生型マウスにおける血管傷害部位においてｉｎｖｉｖｏにて血小板血栓内で、かつ内皮に沿って検出されることを示す生体内顕微鏡観察（ＩＶＭ）のマイクロ写真を示す図である。図５Ａは、血小板上のＧＰ１ｂβと結合するＤｙｌｉｇｈｔ６４９－標識ＣＤ４２ｃを使用して検出した場合の傷害部位における血小板血栓の増大を示す。血小板の存在または非存在は、パネル１（０秒）、パネル２（１５秒）、パネル３（３０秒）、パネル４（６０秒）、パネル５（９０秒）、およびパネル６（１２０秒）において検出された蛍光信号により実証される。Ａｌｅｘａ４８８－標識陰性対照ＩｇＧも投与したが、蛍光は検出されなかった。
図５は、それぞれが６つのパネル（図５Ａ、１～６および図５Ｂ、１～６）を含むパネルＡおよびＢを含み、ＴＦＰＩが野生型マウスにおける血管傷害部位においてｉｎｖｉｖｏにて血小板血栓内で、かつ内皮に沿って検出されることを示す生体内顕微鏡観察（ＩＶＭ）のマイクロ写真を示す図である。図５Ｂは、パネル１～６を含み、ＴＦＰＩが、野生型マウスにおけるレーザー誘導血管傷害後に血小板血栓内に、かつ内皮に沿って存在することを実証するＩＶＭのマイクロ写真を示す。Ａｌｅｘａ４８８標識ＴＦＰＩ（灰色で示した緑色信号）は、０秒において検出されず（図５Ｂ、パネル１）、かすかな信号を１５秒において見ることができる（図５Ｂ、パネル２）。３０秒（図５Ｂ、パネル３）において、緑色蛍光信号は、増大し、かすかな赤色信号（Ｄｙｌｉｇｈｔ６４９－標識ＣＤ４２ｃ）を見ることができ、ＴＦＰＩが検出されるほぼ同じ部位における血小板蓄積の検出を示す。図５Ｂ、パネル４（６０秒）は、強い緑色および赤色蛍光信号を示す（ともに薄灰色であり、そこで赤色蛍光は、血管傷害部位の左に見ることができ、緑色信号は、傷害部位の右側に向かって主に検出される）、血小板蓄積およびＴＦＰＩがともに傷害部位で検出されることを実証する。図５Ｂ、パネル５は、６０秒までの傷害部位における赤色（血小板）および緑色（ＴＦＰＩ）蛍光信号の両方を示し、両信号は、３０秒より大きい。図５Ｂ、パネル６は、赤色信号（血小板）の低下および緑色信号（ＴＦＰＩ）の低下を示し、ともに１２０秒において傷害部位で依然として検出可能である。
ＩＶＭを使用して査定したレーザー誘導血管傷害後の血友病ＡマウスにおけるＴＦＰＩ－１０６の止血効果を示すグラフであり、血小板血栓の量は、曲線下面積（ＡＵＣ）として表現されている（
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＝Ｐ＜０．００５が示される）。図６Ａは、生理食塩水を投与した場合の０．５時間における血友病Ａマウスにおける血小板蓄積の欠如と比較した、マウスが生理食塩水対照のみを受けた場合の傷害後０．５時間における野生型マウス（ＷＴ）における傷害部位での血小板の蓄積を示す。血小板蓄積は、組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）またはＴＦＰＩ－１０６を投与した場合に０．５時間にて血友病Ａマウスにおいて検出された。血栓蓄積効果は、ＴＦＰＩ－１０６を投与された血友病Ａマウスにおいて１６８時間で依然として検出された。
ＩＶＭを使用して査定したレーザー誘導血管傷害後の血友病ＡマウスにおけるＴＦＰＩ－１０６の止血効果を示すグラフであり、フィブリン産生量は、曲線下面積（ＡＵＣ）として表現されている（
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＝Ｐ＜０．００５が示される）。図６Ｂは、生理食塩水を投与した場合の０．５時間における血友病Ａマウスにおける検出可能なフィブリン産生の欠如と比較した、マウスが生理食塩水対照のみを受けた場合の傷害後０．５時間における野生型マウス（ＷＴ）における傷害部位でのフィブリン産生を示す。フィブリン産生は、組換え第ＶＩＩＩ因子（ｒＦＶＩＩＩ）またはＴＦＰＩ－１０６を投与した場合に０．５時間にて血友病Ａマウスにおいて検出された。フィブリン産生効果は、ＴＦＰＩ－１０６を投与された血友病Ａマウスにおいて１６時間で依然として検出された。
１ｐｍ組織因子および４μＭリン脂質の存在下で重度血友病Ａ血漿におけるＴＦＰＩ－１０６および組換え第ＶＩＩａ因子（ｒＦＶＩＩａ）の投与のトロンビン産生アッセイ（ＴＧＡ）に対する効果を示すグラフを表す図である。グラフは、単独で（１６μｇ／ｍｌ）、およびｒＦＶＩＩａ（２０μｇ／ｍｌ、２μｇ／ｍｌ、または０．２μｇ／ｍｌ）と組み合わせたＴＦＰＩ－１０６を含む血友病Ａ血漿のトロンボグラムを示す。ＴＦＰＩ－１０６もｒＦＶＩＩａも含まない血友病Ａ血漿および非血友病血漿のトロンボグラムも示されている。
ｒＦＶＩＩａを伴った、もしくは伴わないＴＦＰＩ－１０６の存在下、またはｒＦＶＩＩａのみの存在下の血友病Ａ血漿における１ｐＭ組織因子および４μＭリン脂質の存在下でのトロンビン産生に対する効果を示すトロンボグラムを表す図である。非血友病血漿が対照として含められている。
ｒＦＶＩＩａを伴った、もしくは伴わないＴＦＰＩ－１０６の存在下、またはｒＦＶＩＩａのみの存在下のクエン酸乏血小板血友病Ａ血漿における３ベセスダ単位（３ＢＵ）のインヒビターの存在下でのトロンビン産生に対する効果を示すトロンボグラムを表す図である。非血友病血漿が対象として含められている。ＴＦＰＩ－１０６（１６μｇ／ｍｌ）が添加された対照非血友病血漿も含められている。
ｒＦＶＩＩａを伴った、もしくは伴わないＴＦＰＩ－１０６の存在下、またはｒＦＶＩＩａのみの存在下のクエン酸乏血小板血友病Ｂ血漿における３ベセスダ単位（３ＢＵ）のインヒビターの存在下でのトロンビン産生に対する効果を示すトロンボグラムを表す。非血友病血漿が対象として含められている。ＴＦＰＩ－１０６（１６μｇ／ｍｌ）が添加された対照非血友病血漿も含められている。
尾切断直後に血友病Ａマウスに抗体ＴＦＰＩ－１０６（６ｍｇ／ｋｇ）を投与し、組換え第ＶＩＩＩ因子（２００ユニット／ｋｇ）を別個に投与することの対照と比較した失血に対する効果を示す図である。
尾切断の２分後に血友病Ａマウスに３つの異なる用量の抗体ＴＦＰＩ－１０６（１、３および６ｍｇ／ｋｇ）を投与し、組換え第ＶＩＩＩ因子（２００ユニット／ｋｇ）を別個に投与することの対照と比較した失血に対する効果を示す図である。
重度血友病Ａのヒト患者由来の全血の凝血時間に対する組換え第ＶＩＩＩ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
重度血友病Ａのヒト患者由来の多血小板血漿中のピークトロンビン産生に対する組換え第ＶＩＩＩ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
重度血友病ＡおよびＦＶＩＩＩのインヒビターを有するヒト患者由来の全血の凝血時間に対する異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
重度血友病ＡおよびＦＶＩＩＩのインヒビターを有するヒト患者由来の多血小板血漿におけるピークトロンビン産生に対する異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
重度血友病ＡおよびＦＶＩＩＩのインヒビターを有するヒト患者由来の乏血小板血漿の凝血時間に対する異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
中等度血友病Ａのヒト患者由来の全血の凝血時間に対する組換え第ＶＩＩＩ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
中等度血友病Ａのヒト患者由来の多血小板血漿中のピークトロンビン産生に対する組換え第ＶＩＩＩ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
中等度血友病Ａのヒト患者由来の乏血小板血漿の凝血時間に対する異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
中等度血友病Ｂのヒト患者由来の全血の凝血時間に対する組換え第ＩＸ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
中等度血友病Ｂのヒト患者由来の多血小板血漿中のピークトロンビン産生に対する組換え第ＩＸ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
中等度血友病Ｂのヒト患者由来の乏血小板血漿の凝血時間に対する異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
血友病Ａの複数のヒト患者由来の全血の凝血時間に対する組換え第ＶＩＩＩ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
血友病Ａの複数のヒト患者由来の多血小板血漿中のピークトロンビン産生に対する組換え第ＶＩＩＩ因子と比較した異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
血友病Ｂの複数のヒト患者由来の乏血小板血漿の凝血時間に対する異なる濃度のＴＦＰＩ１０６の効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
１．概要
上述したように、血友病の患者は、自身のインタクトな外因経路を通じて出血を停止させる何らかの能力を有するが、外因経路は、組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）により急速に遮断されるので保護をもたらすのに十分でない。これらの患者におけるＴＦＰＩ阻害をブロック／中和すると、不十分なＦＸａ産生を補償し、出血素因を正常化することができる。したがって、ＴＦＰＩに特異的に結合し、その活性を阻害する抗体およびその抗原結合断片が本明細書に開示および例示されている。
（【００１１】以降は省略されています）

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