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公開番号2025064350
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-04-17
出願番号2023174031
出願日2023-10-06
発明の名称細胞作製装置及び細胞回収方法
出願人キヤノン株式会社,キヤノンメディカルシステムズ株式会社
代理人弁理士法人酒井国際特許事務所
主分類C12M 1/26 20060101AFI20250410BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】回収対象の細胞と不要物とが混合した液体からフィルタにより不要物を除去する工程において、フィルタにより捕捉された細胞の回収率を向上させること。
【解決手段】実施形態に係る細胞作製装置は、流路と、フィルタとを備える。流路は、細胞及び細胞よりも小さい物体を含む第1の液体と、第1の液体と異なる第2の液体とが流れる。フィルタは、流路内で第1の液体に含まれる細胞を捕捉する第1の面と、第1の面の反対側に位置する第2の面とを備える。細胞作製装置は、第1の液体をフィルタの第1の面から第2の面に向けて送液する第1の送液と、第2の液体をフィルタの第2の面から第1の面に向けて送液する第2の送液と、を実行する。第1の送液の速度は、第2の送液の速度よりも遅い。
【選択図】図4
特許請求の範囲【請求項１】
細胞及び前記細胞よりも小さい物体を含む第１の液体と、前記第１の液体と異なる第２の液体とが流れる流路と、
前記流路内で前記第１の液体に含まれる前記細胞を捕捉する第１の面と、前記第１の面の反対側に位置する第２の面とを備えるフィルタと、を備え、
前記第１の液体を前記フィルタの前記第１の面から前記第２の面に向けて送液する第１の送液と、
前記第２の液体を前記フィルタの前記第２の面から前記第１の面に向けて送液する第２の送液と、を実行し、
前記第１の送液の速度は、前記第２の送液の速度よりも遅い、
細胞作製装置。
続きを表示（約 1,300 文字）【請求項２】
前記流路は、少なくとも、
前記第１の液体が貯蔵される第１の容器と、
前記第２の液体が貯蔵される第２の容器と、
前記フィルタを通過した前記物体が排出される廃液容器と、
前記フィルタから回収された前記細胞が格納される回収容器と、
前記第１の容器から前記フィルタを経由して前記廃液容器まで前記第１の液体が通液する第１の送液経路と、
前記第２の容器から前記フィルタを経由して前記回収容器まで前記第２の液体が通液する第２の送液経路と、を含み、
前記第１の送液では前記第１の送液経路に前記第１の液体を送液し、前記第２の送液では前記第２の送液経路に前記第２の液体を送液する、
請求項１に記載の細胞作製装置。
【請求項３】
リンス液が貯蔵される第３の容器をさらに備え、
前記リンス液を、前記第３の容器から、少なくとも、前記第１の送液経路のうち、前記第１の送液経路と重複する部分を経由して前記廃液容器まで送液する第３の送液を実行し、
前記第３の送液の速度は、前記第２の送液の速度よりも遅い、
請求項２に記載の細胞作製装置。
【請求項４】
前記フィルタは前記第１の面から前記第２の面に向けて貫通する複数の貫通孔を有するメンブレンフィルタであり、
前記複数の貫通孔の最大孔径は、前記細胞よりも小さく、かつ、前記物体よりも大きい、
請求項１に記載の細胞作製装置。
【請求項５】
前記フィルタは、複数の細孔を備えるスポンジ状の多孔質体であり、前記多孔質体の前記第１の面の細孔は、前記第２の面の細孔よりも小さい、
請求項１に記載の細胞作製装置。
【請求項６】
前記フィルタは、トラックエッチング法によりエッチングされた均一な形状の複数の細孔を備えるトラックエッチドメンブレンフィルタである、
請求項１に記載の細胞作製装置。
【請求項７】
前記フィルタは、メッシュ状に形成された金属により構成される、
請求項１に記載の細胞作製装置。
【請求項８】
前記流路は、前記第１の送液経路において、前記第１の液体が通過する穴が前後よりも小さく構成された圧損発生部を備える、
請求項２に記載の細胞作製装置。
【請求項９】
前記物体はウイルスであり、
前記第１の液体は前記細胞と前記ウイルスの混合液であり、
前記第２の液体は液体培地である、
請求項１に記載の細胞作製装置。
【請求項１０】
細胞及び前記細胞よりも小さい物体を含む第１の液体をフィルタの第１の面から前記第１の面の反対側に位置する第２の面に向けて通液する第１の送液ステップと、
前記第１の液体と異なる第２の液体を前記フィルタの前記第２の面から前記第１の面に向けて通液する第２の送液ステップとを含み、
前記第１の送液ステップにおける送液の速度は、前記第２の送液ステップにおける送液の速度よりも遅い、
細胞回収方法。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本明細書及び図面に開示の実施形態は、細胞作製装置及び細胞回収方法に関する。
続きを表示（約 2,100 文字）【背景技術】
【０００２】
人工多能性幹細胞（ｉＰＳ（induced pluripotent stem）細胞）の作製には複数の工程が存在する。また、１つの工程内には流路の異なる複数のステップが存在する。ｉＰＳ細胞作製の途中での外部への感染性物質の漏洩や汚染等のリスクの低減のためには、全ての工程が１つの閉鎖系の装置内で実行されることが望ましい。
【０００３】
ここで、ｉＰＳ細胞作製の工程のうち、細胞とウイルスの混合液からウイルスを除去する処理を含む工程については、従来は遠心分離が用いられていた。しかしながら、通常の遠心分離は開放系で行われるものであり、閉鎖系の装置に適用することが困難である。閉鎖系の装置に適用可能な手段のうち、細胞とウイルスの混合液からウイルスを除去することが可能なものとして、フィルタを用いたウイルス除去手段がある。しかしながら、単にフィルタを用いてウイルス除去を行うと、遠心分離を用いた場合と比較して細胞回収率が低下してしまうため、その改善が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
国際公開第２０１２／００２４９７号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本明細書及び図面に開示の実施形態が解決しようとする課題の一つは、回収対象の細胞と不要物とが混合した液体からフィルタにより不要物を除去する工程において、フィルタにより捕捉された細胞の回収率を向上させることである。ただし、本明細書及び図面に開示の実施形態により解決しようとする課題は上記課題に限られない。後述する実施形態に示す各構成による各効果に対応する課題を他の課題として位置づけることもできる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
実施形態に係る細胞作製装置は、流路と、フィルタとを備える。流路は、細胞及び細胞よりも小さい物体を含む第１の液体と、第１の液体と異なる第２の液体とが流れる。フィルタは、流路内で第１の液体に含まれる細胞を捕捉する第１の面と、第１の面の反対側に位置する第２の面とを備える。細胞作製装置は、第１の液体をフィルタの第１の面から第２の面に向けて送液する第１の送液と、第２の液体をフィルタの第２の面から第１の面に向けて送液する第２の送液と、を実行する。第１の送液の速度は、第２の送液の速度よりも遅い。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
図１は、第１の実施形態に係る細胞作製装置の概略構成の一例を示す図である。
図２は、第１の実施形態に係る細胞作製装置に用いられるカートリッジの概略構成の一例を示す図である。
図３は、第１の実施形態に係る細胞作製装置により実現されるｉＰＳ細胞作製プロセス（工程）フローの一例を示す図である。
図４は、第１の実施形態に係る初期化因子導入工程の一部に対応する流路構成の一例を示す図である。
図５は、第１の実施形態に係る捕捉流量を変化させた場合における回収率の変化の一例を示すグラフである。
図６は、第１の実施形態に係る回収流量を変化させた場合における回収率の変化の一例を示すグラフである。
図７は、第１の実施形態に係るフィルタの外観の一例を示す図である。
図８は、第１の実施形態に係るフィルタの本体部の拡大図の一例である。
図９は、比較例に係るフィルタの本体部の拡大図の一例である。
図１０は、第１の実施形態に係る圧損部材が配管に配置された状態の一例を示す図である。
図１１は、第２の実施形態に係る初期化因子導入工程の一部に対応する流路構成の一例を示す図である。
図１２は、変形例１に係るフィルタの本体部の上面側の拡大図の一例である。
図１３は、変形例１に係るフィルタの本体部の下面側の拡大図の一例である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、図面を参照しながら、細胞作製装置及び細胞回収方法の実施形態について詳細に説明する。
【０００９】
（第１の実施形態）
図１は、第１の実施形態に係る細胞作製装置１の概略構成の一例を示す図である。細胞作製装置１は、細胞の作製の全工程を一貫して実施する。本実施形態においては、細胞作製装置１は、特に、人工多能性幹細胞（ｉＰＳ（induced pluripotent stem）細胞）を作製するものとして説明する。
【００１０】
図１に示すように、本実施形態の細胞作製装置１は、カートリッジ１０ａ，１０ｂ、送液装置１１ａ，１１ｂ、バルブ開閉装置１２ａ，１２ｂ、冷却装置１３ａ，１３ｂ、インキュベータ１４ａ，１４ｂ、及び移動装置１５ａ，１５ｂを備える。また、細胞作製装置１は、細胞作製装置１全体を制御する処理回路を備える。
（【００１１】以降は省略されています）

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