特許ウォッチ

公開番号2024056735
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-04-23
出願番号2024009496,2020544510
出願日2024-01-25,2019-02-25
発明の名称EGFR二量体撹乱剤およびその使用
出願人ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ミシガン,THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF MICHIGAN
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類C07D 233/70 20060101AFI20240416BHJP(有機化学)
要約【課題】EGFRチロシンキナーゼ活性を阻害する以外の方法で、EGFRを標的とする癌治療薬が必要とされている。また、初期使用後に薬剤耐性を発現することなく、癌を治療する治療薬が必要とされている。
【解決手段】本明細書では、EGFRを調節する化合物、およびそれを、例えば癌の治療のために使用する方法が提供される。
【選択図】図4
特許請求の範囲【請求項１】
式Ｉ：
JPEG
2024056735000025.jpg
23
31
（式中、
Ｘは、Ｏ－Ｃ
０～６
アルキレン、Ｓ－Ｃ
０～６
アルキレン、またはＮＲ
３
－Ｃ
０～６
アルキレンであり、前記アルキレンは、任意選択的に、独立して、ハロ、Ｎ（Ｒ
３
）
２
、およびＯＲ
３－
から選択される１～３個の基で置換され、
Ｙは、Ｃ
０～６
アルキレンであり、前記アルキレンは、任意選択的に、独立して、ハロ、Ｎ（Ｒ
３
）
２
およびＯＲ
３
から選択される１～３個の基で置換され、
Ａは、Ｃ
６～１０
アリールまたはＮ、Ｏ、およびＳから選択される１～４個のヘテロ原子を有する５～１０員ヘテロアリールであり、前記アリールまたはヘテロアリールは、任意選択的に、１～３個のＲ
４
で置換され、
Ｂは、Ｃ
６～１０
アリール、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１～４個のヘテロ原子を有する５～１０員ヘテロアリール、３～８員シクロアルキル環、またはＯ、Ｓ、およびＮから選択される１～３個の環ヘテロ原子を有する３～１２員ヘテロシクロアルキルであり、前記アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、任意選択的に、１～３個のＲ
５
で置換され、
Ｒ
１
およびＲ
２
は、各々独立して、Ｃ
１～６
アルキルであるか、あるいはＲ
１
およびＲ
２
は、それらが結合している炭素原子と共に４～８員シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環を形成し、ヘテロシクロアルキル環は、Ｏ、Ｓ、およびＮから選択される１個または２個の環ヘテロ原子を有し、前記シクロアルキル環またはヘテロシクロアルキル環は、任意選択的に、１～２個のＲ
６
で置換され、
各Ｒ
３
は、独立して、ＨまたはＣ
１～６
アルキルであり、
各Ｒ
４
およびＲ
５
は、独立して、Ｃ
１～６
アルキル、Ｃ
１～６
ハロアルキル、ハロ、またはＣ
１～６
アルコキシであり、
Ｒ
６
は、Ｃ
１～６
アルキル、Ｃ
１～６
ハロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｒ
３
、（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ
３
、ＣＯＮ（Ｒ
３
）
２
、Ｃ
０～３
アルキレン－Ｃ
３～８
シクロアルキル、Ｃ
０～３
アルキレン－Ｃ
６～１０
アリール、またはＣ
０～３
アルキレン－（Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１～４個のヘテロ原子を有する５～１０員ヘテロアリール）であり、前記アリールまたはヘテロアリールは、任意選択的に、１～３個のＲ
続きを表示（約 1,000 文字）【請求項２】
Ｒ
１
およびＲ
２
が、各々独立して、Ｃ
１～６
アルキルである、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｒ
１
およびＲ
２
が、各々メチルである、請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｒ
１
およびＲ
２
が、それらが結合している炭素原子と共に、４～８員シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環を形成する、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ
１
およびＲ
２
が、それらが結合している炭素原子と共に、５員または６員シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環を形成する、請求項４に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｒ
１
およびＲ
２
が、それらが結合している炭素原子と共に、シクロヘキシル環を形成する、請求項５に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｒ
１
およびＲ
２
が、それらが結合している炭素原子と共に、次の構造：
JPEG
2024056735000026.jpg
21
11
を有するヘテロシクロアルキル環を形成し、式中、＊は、式Ｉの化合物の残部との結合点を示す、請求項５に記載の化合物または塩。
【請求項８】
Ｒ
４
およびＲ
５
が、各々独立して、Ｃ
１～６
アルキル、ハロ、またはＣ
１～６
アルコキシである、請求項１～７のいずれか１一項に記載の化合物または塩。
【請求項９】
Ｒ
６
が、Ｃ
１～６
アルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｒ
３
、（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ
３
、またはＣＯＮ（Ｒ
３
）
２
である、請求項１～８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
Ｒ
６
が、Ｃ
１～６
アルキルである、請求項４～９のいずれか一項に記載の化合物または塩。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【背景技術】
【０００１】
ＥＧＦＲ小分子チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）のエルロチニブ、ゲフィチニブ、およびアファチニブは、このクラスの薬物に対する感受性を付与し、民族および性別に応じて患者の７～２０％で生じる体細胞変異（Ｌ８５８Ｒまたはエクソン１９での欠失、すなわち、Ｅ７４６～Ａ７５０）を有する肺腺癌の治療において、単剤として最も成功している（１９）。残念ながら、事実上すべての患者が治療に対して耐性を発現するため、反応が１年以上持続することは稀である（２０）。第３世代の不可逆的阻害剤であるオシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）は、治療未経験の患者ならびに第１世代または第２世代のＴＫＩに対して耐性を獲得した患者の治療に有効である（７）。しかしながら、オシメルチニブによる治療の１年以内に、大多数の患者は、薬剤結合部位であるＥＧＦＲのキナーゼドメイン（Ｃ７９７Ｓ）に別の変異を発現する（１２、２１、２２）。オシメルチニブ耐性ＥＧＦＲを標的とするいくつかのアプローチが報告されているが、現時点では、このＣ７９７Ｓ変異を有するこれらの患者には、ＴＫＩ治療の選択肢が存在しない（１２、１３、２３）。化学療法が、唯一の選択肢である。
続きを表示（約 5,500 文字）【０００２】
前述の観点から、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ活性を阻害する以外の方法で、ＥＧＦＲを標的とする癌治療薬が必要とされている。また、初期使用後に薬剤耐性を発現することなく、癌を治療する治療薬が必要とされている。
【発明の概要】
【０００３】
本明細書では、ＥＧＦＲを調節するための化合物および方法が提供される。より具体的には、ＥＧＦＲのモジュレーター、および異常なＥＧＦＲ活性に関連する疾患または障害、例えば癌、を治療または予防する際の、そのようなモジュレーターの使用が提供される。
【０００４】
一態様では、本開示は、式Ｉ：
【０００５】
JPEG
2024056735000002.jpg
26
34
【０００６】
（式中、Ｘは、Ｏ－Ｃ
０～６
アルキレン、Ｓ－Ｃ
０～６
アルキレン、またはＮＲ
３
－Ｃ
０～６
アルキレンであり、当該アルキレンは、Ｘは、Ｏ－Ｃ
０～６
アルキレン、Ｓ－Ｃ
０～６
アルキレン、またはＮＲ
３
－Ｃ
０～６
アルキレンであり、当該アルキレンは、任意選択的に、独立して、ハロ、Ｎ（Ｒ
３
）
２
、およびＯＲ
３
から選択される１～３個の基で置換され、Ｙは、Ｃ
０～６
アルキレンであり、当該アルキレンは、任意選択的に、独立して、ハロ、Ｎ（Ｒ
３
）
２
、およびＯＲ
３
から選択される１～３個の基で置換され、Ａは、Ｃ
６～１０
アリールまたはＮ、Ｏ、およびＳから選択される１～４個のヘテロ原子を有する５～１０員ヘテロアリールであり、当該アリールまたはヘテロアリールは、任意選択的に、１～３個のＲ
４
で置換され、Ｂは、Ｃ
６～１０
アリール、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１～４個のヘテロ原子を有する５～１０員ヘテロアリール、３～８員シクロアルキル環、またはＯ、Ｓ、およびＮから選択される１～３個の環ヘテロ原子を有する３～１２員ヘテロシクロアルキルであり、当該アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、任意選択的に、１～３個のＲ
５
で置換され、各Ｒ
１
およびＲ
２
は、独立して、Ｃ
１～６
アルキルであるか、あるいはＲ
１
およびＲ
２
は、それらが結合している炭素原子と共に４～８員シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環を形成し、ヘテロシクロアルキル環は、Ｏ、Ｓ、およびＮから選択される１個または２個の環ヘテロ原子を有し、当該シクロアルキル環またはヘテロシクロアルキル環は、任意選択的に、１～２個のＲ
６
で置換され、各Ｒ
３
は、独立して、ＨまたはＣ
１～６
アルキルであり、各Ｒ
４
およびＲ
５
は、独立して、Ｃ
１～６
アルキル、Ｃ
１～６
ハロアルキル、ハロ、またはＣ
１～６
アルコキシであり、Ｒ
６
は、Ｃ
１～６
アルキル、Ｃ
１～６
ハロアルキル、（Ｃ＝Ｏ）Ｒ
３
、（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ
３
、ＣＯＮ（Ｒ
３
）
２
、Ｃ
０～３
アルキレン－Ｃ
３～８
シクロアルキル、Ｃ
０～３
アルキレン－Ｃ
６～１０
アリール、またはＣ
０～３
アルキレン－（Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１～４個のヘテロ原子を有する５～１０員ヘテロアリール）であり、アリールまたはヘテロアリールは、任意選択的に、１～３個のＲ
５
で置換される。）
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００７】
さらに、本明細書では、ＥＧＦＲを調節するために、開示された化合物を使用する方法が提供される。本開示の他の態様は、ＥＧＦＲの二量体化を阻害するために、開示された化合物を使用する方法、およびＥＧＦＲの分解を誘導するために、開示された化合物を使用する方法を含む。
【０００８】
本開示の他の態様は、対象における異常なＥＧＦＲ活性に関連する疾患または障害を治療または予防するための医薬品の調製に使用するための、本明細書に開示されるような化合物、および、対象における異常なＥＧＦＲ活性に関連する疾患または障害を予防または治療する方法における本明細書に開示されるような化合物の使用を含む。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
隣接する正常組織と比較された、ＥＧＦＲ二量体化に影響される腫瘍（＊印）特異的ＥＧＦＲを阻害する低分子ペプチドによる処理（左）、およびＥＧＦＲの分解の模式図（右）を示す。ＥＧＦＲは、膜貫通部分によって二小葉性（ｂｉｌｏｂｕｌａｒ）キナーゼドメイン（小ブロブ（ｂｌｏｂ）＝ｎローブ（ｌｏｂｅ）、大ブロブ＝ｃローブ）、および柔軟なＣ末端テール（ｔａｉｌ）に連結された細胞外ドメインによって示されている。ＥＧＦの結合は、細胞外ドメイン間および／または２つの単量体のｎローブとｃローブとの間の活性（非対称）二量体の形成を促進する。このような立体構造のＥＧＦＲは安定したままであり、Ｃ末端テールのリン酸化を誘導し、腫瘍進行性チロシンキナーゼの阻害剤（例えば、オシメルチニブ）を促進し、ＡＴＰ動員を阻害し、２つの単量体のｎローブ間の不活性な（対称）二量体化を促進する。この立体構造のＥＧＦＲは、キナーゼが不活性な立体構造のままであるが、タンパク質の安定性は維持されている。ＥＧＦＲ活性の不活化は、腫瘍成長の阻害と相関する。ＥＧＦＲのｃローブのαＣヘリックスおよびβ４シートとｎローブのｈヘリックスとの間のループは、ＥＧＦで誘導される活性二量体の形成に関与する。このモデルは、ディスラプチン（Ｄｉｓｒｕｐｔｉｎ）または化合物８Ｃ（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ８Ｃ）が、このポケットに結合し、ＥＧＦ誘導性の活性二量体の形成を妨害することを想定している。リガンドおよび化合物８Ｃが結合したＥＧＦＲ単量体は、急速に分解する。ＥＧＦＲタンパク質の喪失は、細胞死と相関する。矢印の太さは、腫瘍細胞対正常細胞における、化合物８Ｃの効果を示す。
（Ａ）ＥＧＦＲの非対称活性二量体の模式図を示す。ＥＧＦに結合した１つのＥＧＦＲ単量体は、二量体化を誘導するのに十分である。ＥＧＦＲ（ＰＤＢコード：２ＲＦＤ）のｃローブに結合したディスラプチンのモデルが、挿入図に示され、（Ｂ）精製されたＥＧＦＲキナーゼドメインとディスラプチンとの間の仮定される相互作用が示される。。
（Ａ）ＮＣＩ－Ｈ１９７５細胞におけるＥＧＦ誘導二量体に対するディスラプチン処理の効果、（Ｂ）ＮＣＩ－Ｈ１９７５異種移植におけるその標的ＥＧＦＲに対するディスラプチンの効果、（Ｃ）ディスラプチンのインビボでの有効性、および（Ｄ）腫瘍組織学、ＥＧＦＲ発現および有糸分裂指数（Ｋｉ－６７スコアによる測定）に対する治療の長期効果、を示す。
（Ａ）リード化合物をプレスクリーニングするためのプロセスと、２つのプレリード化合物Ｃ９５およびＣ６７の構造、（Ｂ）ミクロソーム安定性（青いボックスに表示）が組み合わさって得られたＳＡＲと、最も選択的に有効な化合物８Ｃと命名された分子の構造、（Ｃ）図３Ａ（溶解物が調製され、抗ＥＧＦＲ抗体を用いてイムノブロットされた）に記載のエルロチニブ耐性ＮＣＩ－Ｈ１９７５肺癌細胞株における、ＥＧＦ刺激ＥＧＦＲ二量体化に対する２つのプレリード化合物および化合物８Ｃの効果、および（Ｄ）処理後２４時間で評価された定常状態ＥＧＦＲタンパク質に対する選択された３つのリード分子（１μＭ）の効果、を示す。
（Ａ）化合物８ＣのＥＧＦＲ結合に対するディスラプチンとの競合、（Ｂ）熱安定性アッセイによって確認された精製ＥＧＦＲの熱安定性に対する化合物８Ｃの効果、および（Ｃ）０～１０μＭの化合物８Ｃの存在下、４４℃での、ＥＧＦＲの熱安定性に対する化合物８Ｃの濃度の効果、を示す。
（Ａ）Ｂａ／Ｆ３－ＡＺＤ細胞からの全細胞溶解物における、ＥＧＦＲ熱安定性に対する化合物８Ｃの効果、（Ｂ）特定のＥＧＦＲ変異を発現するオシメルチニブ耐性Ｂａ／Ｆ３細胞に対して決定された化合物８Ｃの効力、（Ｃ）図３Ａに記載のＥＧＦ誘導ＥＧＦＲ二量体化に対する化合物８Ｃ処理の効果、（Ｃ～Ｄ）ＥＧＦＲ誘導二量体およびＥＧＦＲタンパク質レベルに対する化合物８Ｃ処理の効果、（Ｅ）２つのオシメルチニブ耐性Ｂａ／Ｆ３細胞株から作表した、エルロチニブ、オシメルチニブ、および化合物８Ｃに応じたＩＣ
５０
値、を示す。
（Ａ）オシメルチニブ耐性細胞のパネルに対して決定され、クローン原性生存アッセイを使用して正常な肺線維芽細胞（ＭＲＣ５）と比較された化合物８Ｃの特異性および効力、（Ｂ）図６に記載のオシメルチニブ耐性ＰＣ９細胞におけるＥＧＦ誘導ＥＧＦＲ二量体化に対する化合物８Ｃ濃度の効果、（Ｃ）ＰＣ９－ＡＺＲ細胞におけるＥＧＦＲ誘導二量体およびＥＧＦＲタンパク質レベルに対する化合物８Ｃ処理の効果、を示す。
（Ａ）ヒトＮＣＩ－Ｈ１９７５腫瘍異種移植片（＞１５０ｍｍ
３
）を有するヌードマウスに腹腔内投与された単回１００ｍｇ／ｋｇ用量の化合物８Ｃの薬物動態、および（Ｂ）ヒトＮＣＩ－Ｈ１９７５腫瘍異種移植片（＞１５０ｍｍ
３
）を有するヌードマウスに経口強制投与によって与えられた単回１００ｍｇ／ｋｇ用量の化合物８Ｃの薬物動態、を示す。
（Ａ）ＮＣＩ－Ｈ１９７５異種移植片を有するマウスにおける異なる時点でのプレリード化合物９５の基底生物発光および効果、ならびに（Ｂ）生物発光において定量化およびプロットされた変化、を示す。
化合物８Ｃ（３０ｍｇ／ｋｇ、毎日１週間）またはビヒクル（ｖｅｈｉｃｌｅ）（ＰＢＳ中５％ＤＭＳＯ）で処置された、ＵＭＳＣＣ７４Ｂを有する頭頸部腫瘍モデル（～１００ｍｍ
２
）のヌードマウスの経時的な平均腫瘍体積の変化を示す。各群は、少なくとも５匹のマウスを有した。腫瘍体積および体重を週３～４回記録し、プロットした。処置中の体重の平均減少は、１０％未満であった。エラーバーは、平均値の標準誤差を表す。
オシメルチニブ耐性腫瘍モデルにおける化合物８Ｃの効果を示す。オシメルチニブ耐性のＢａ／Ｆ３腹水腫瘍を有するヌードマウスを、ビヒクル、オシメルチニブまたは化合物８Ｃのいずれかで処置した。ＥＧＦＲ、ｐＥＧＦＲおよびその他の分子に対する処置の効果は、イムノブロッティングによって決定された。
原発腫瘍におけるＦＦＰＥ－肺ＰＤＸ、ＵＭＬＣＡ７の第１および第２異種移植片の病理学的評価、および２つの他のＰＤＸにおけるＩＨＣを使用したＥＧＦＲタンパク質発現の分析を示す。扁平上皮癌（ＵＭＬＴ１６）では豊富なＥＧＦＲ発現が認められるが、大細胞癌（ＵＭＬＴ１４）のＰＤＸサンプル（２０Ｘ）では認められない。
マウス膵臓癌モデルを化合物８Ｃで処置すると、膵管病変の一種であるＰａｎＩｎ（膵臓上皮内腫瘍）の発症傾向が有意に低下したことを示す。Ａ－膵臓組織の組織学的検査は、Ｂで定量化された対照と比較して、処置されたマウスにおける病変の関与が有意に少ないことを示す。
化合物８Ｃで処置されたＵＭＳＣＣ７４Ｂ有する頭頸部腫瘍モデルのマウス異種移植が、処置ビヒクルまたはセツキシマブのいずれかが投与された対照マウスと比較して、有意により小さな腫瘍を呈したことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
小分子および抗体を使用して発癌性タンパク質のキナーゼ活性を阻害することは、抗がん剤開発の取り組みのかなめであり、その結果、いくつかのＦＤＡ承認のがん治療がもたらされたが、キナーゼを標的とした薬剤の臨床効果には一貫性がみられなかった（２２、２４）。ＥＧＦＲは、チロシンキナーゼ活性に添加して、足場機能を有することが示されている（２４～３６）。これは、ＥＧＦＲのキナーゼデッド（ｋｉｎａｓｅ－ｄｅａｄ、ＫＤ）変異体（例えば、Ｋ７４５Ａ、Ｖ７４１Ｇ、およびＹ７４０Ｆ）を発現させるか、ＥｒｂＢ３（キナーゼ活性を有さない）を発現させるかのいずれかによって、これらの受容体を発現しないＢａ／Ｆ３細胞において実証される（３７～３９）。これらのキナーゼ欠損変異体の発現は、細胞生存を促進し、これらの受容体がおそらく二量体を形成することによって生存シグナルを伝達できることを示し、ＥＧＦＲがキナーゼ活性以外の機能を有することを示唆する（３９）。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許