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公開番号2025122605
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-08-21
出願番号2024042892
出願日2024-02-08
発明の名称細胞内探査とその利用
出願人個人
代理人
主分類C12N 15/13 20060101AFI20250814BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】がん抑制遺伝子を応用したい。
【解決手段】変異したP53タンパク質に結合する抗体を、2個作成して、それによりP53タンパク質を両側からはさんで検出する。そのはさんだ分子全体で転写因子を構成させる。その転写因子で毒素を発現させる。
特許請求の範囲【請求項１】
がん細胞には、変異したＰ５３が蓄積している。この状態を、ツーハイブリッド法と類似した方法によって探知する。
続きを表示（約 100 文字）【請求項２】
そのツーハイブリッド法の様な方式で、直接細胞をネクローシスさせる。
【請求項３】
２重管方式。
【請求項４】
発現用ウイルス２種類方式。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
遺伝子工学の分野
続きを表示（約 1,000 文字）【背景技術】
【０００２】
現在の技術は、表面の分子で細胞を見分けている。細胞への介入は、阻害剤が用いられている。この方法は、がん抑制貴伝子に対しては、使えない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
使えない抑制遺伝子を、何とかして使いたい。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本方式は、細胞内の状況検出、細胞消滅の実施の２つにより成る。この様な行動を取らすには、昔の遺伝子治療の方法が良いと思う。
【０００５】
細胞内状況としては、変異Ｐ５３タンパク質の蓄積が考えられる。これを、検出するには、ツーハイブリッド法の様な方式がある。この方法は、Ｐ５３タンパク質に結合する抗体を、２種類作成して、Ｐ５３を両側から挟んで、検出する方法である。
【０００６】
細胞消滅行動の実行としては、毒素の発現が考えられる。
【０００７】
毒素を発現させるための、転写調節因子がある。その転写因子の活性化部位とＤＮＡ結合領域を、それぞれＰ５３結合抗体に、融合させてある。この２つの融合タンパク質で、Ｐ５３をはさむ。結
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続体が、１つの転写因子として働く。これで毒素を発現させる。
【発明の効果】
【０００８】
細胞が、ネクローシスする。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
まず、毒素を発現するための、本来の転写因子を見つける。その転写因子の遺伝子の活性化領域と、ＤＮＡ結合領域を、分離する。分離した遺伝子それぞれに、核局在シグナルの遺伝子を付加する。
【００１０】
次に、Ｐ５３のどこでもいいから結合するモノクローナル抗体を作る。Ｐ５３結合抗体のライトチェインのｍＲＮＡを、ねずみのＢ細胞のハイブリドーマから取り出す。目的のｍＲＮＡとハイブリッドするＤＮＡを合成して、固定して、それに目的のｍＲＮＡを、ハイブリッドさせる。続いて、バリアブルヘビーチェイン、コンスタントヘビーチェイン１のｍＲＮＡを取り出す。両者とも酵素でＤＮＡに直す。
（【００１１】以降は省略されています）

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