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公開番号2025057813
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-04-09
出願番号2023167569
出願日2023-09-28
発明の名称アデノ随伴ウイルスベクター、カプシド、DNAアプタマー、遺伝子導入用組成物、医薬組成物、遺伝子送達方法、動物治療方法、及び調製方法
出願人学校法人自治医科大学
代理人個人,個人,個人
主分類C12N 15/864 20060101AFI20250402BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】特定の標的への指向性を高めたアデノ随伴ウイルスベクターを提供する。
【解決手段】
遺伝子組み換えアデノ随伴ウイルスベクターである。このアデノ随伴ウイルスベクターは、DNAアプタマーと表面で結合可能な修飾配列が付加されたカプシドを含む。さらに、カプシドの修飾配列に結合するDNAアプタマーを更に含む。この修飾配列は、ビオチン特異的な修飾配列であり、DNAアプタマーは、ビオチンが付加されて、カプシド表面に結合される。DNAアプタマーは、ヒトCD19に特異的に結合するように構成されていてもよい。この場合、DNAアプタマーは、列番号10～配列番号233のいずれかの配列を含む。
【選択図】図8
特許請求の範囲【請求項１】
遺伝子組み換えアデノ随伴ウイルスベクターであって、
ビオチン特異的な修飾配列が付加されたカプシドを含む
ことを特徴とするアデノ随伴ウイルスベクター。
続きを表示（約 770 文字）【請求項２】
ビオチンが付加され、前記カプシドの前記修飾配列に結合するＤＮＡアプタマーを更に含む
ことを特徴とする請求項１に記載のアデノ随伴ウイルスベクター。
【請求項３】
前記ＤＮＡアプタマーは、ＣＤ１９に特異的に結合する
ことを特徴とする請求項２に記載のアデノ随伴ウイルスベクター。
【請求項４】
前記ＤＮＡアプタマーは、配列番号１０～配列番号２３３のいずれかの配列を含む
ことを特徴とする請求項３に記載のアデノ随伴ウイルスベクター。
【請求項５】
前記修飾配列は、ビオチンアクセプターペプチドであり、前記カプシドの表面に呈示されるように付加される
ことを特徴とする請求項１に記載のアデノ随伴ウイルスベクター。
【請求項６】
アデノ随伴ウイルスのカプシドであって、
ＤＮＡアプタマーと表面で結合可能な修飾配列が付加されたカプシドを含む
ことを特徴とするカプシド。
【請求項７】
ＤＮＡアプタマーであって、
ヒトＣＤ１９に特異的に結合する
ことを特徴とするＤＮＡアプタマー。
【請求項８】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載のアデノ随伴ウイルスベクターを含む
ことを特徴とする遺伝子導入用組成物。
【請求項９】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載のアデノ随伴ウイルスベクターを含む
ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載のアデノ随伴ウイルスベクターにより、生体外で遺伝子を細胞内に送達する
ことを特徴とする遺伝子送達方法。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、特にアデノ随伴ウイルスベクター、カプシド、ＤＮＡアプタマー、遺伝子導入用組成物、医薬組成物、遺伝子送達方法、動物治療方法、及び調製方法に関する。
続きを表示（約 2,100 文字）【背景技術】
【０００２】
アデノ随伴ウイルス（Ａｄｅｎｏ－ＡｓｓｏｃｉａｔｅｄＶｉｒｕｓ。以下、「ＡＡＶ」という。）は、単独での増殖能力がなく、アデノウイルスやヘルペスウイルス等に依存して宿主細胞内で増殖が可能となるウイルスである。ＡＡＶは、ヒトにおける病原性は報告されていない。このため、近年、ＡＡＶは、安全な遺伝子導入（送達）手段として、遺伝子治療や再生医療等での活用が期待されている。
【０００３】
しかしながら、実際には、従来のＡＡＶベクターは、様々な細胞や臓器に感染し、副作用の要因となっている。このため、ＡＡＶのカプシド（Ｃａｐｓｉｄ）の改変やタンパク質等による修飾で、ＡＡＶベクターの標的への指向性を高める技術が開発されてきている。
【０００４】
このような従来のＡＡＶベクターとして、特許文献１を参照すると、カプシドにおいて少なくとも１個の化学修飾型チロシン残基を有するＡＡＶと、それらの遺伝子治療における使用について記載されている。
特許文献１の技術では、肝臓系細胞への遺伝子導入率を高めている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
特表２０２２－５４０２２６号公報
【非特許文献】
【０００６】
Ｂｅｃｋｅｔｔ、Ｄ他、「Ａｍｉｎｉｍａｌｐｅｐｔｉｄｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｉｎｂｉｏｔｉｎｈｏｌｏｅｎｚｙｍｅｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ－ｃａｔａｌｙｚｅｄｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｉｏｎ」、ＰｒｏｔｅｉｎＳｃｉｅｎｃｅ、１９９９、８（４）、ｐ９２１－９２９
Ｏｈｂａ、Ｋ他、「Ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓｖｅｃｔｏｒｓｙｓｔｅｍｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇｃａｐｓｉｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｍｐｒｏｖｅｓｖｉｒａｌｑｕａｎｔｉｔｙａｎｄｑｕａｌｉｔｙ」、ｉＳｃｉｅｎｃｅ２６、２０２３、Ａｐｒｉｌ２１、１０６４８７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、特許文献１のカプシドでは、一般的な化学反応による修飾を行っており、これにより非特異的な付加反応も生じていた。このため、非標的細胞への感染に伴う副作用、副反応を十分低減させることは難しかった。
【０００８】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、上述の課題を解消することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明のアデノ随伴ウイルスベクターは、遺伝子組み換えアデノ随伴ウイルスベクターであって、ビオチン特異的な修飾配列が付加されたカプシドを含むことを特徴とする。
本発明のアデノ随伴ウイルスベクターは、ビオチンが付加され、前記カプシドの前記修飾配列に結合するＤＮＡアプタマーを更に含むことを特徴とする。
本発明のアデノ随伴ウイルスベクターは、前記ＤＮＡアプタマーは、ＣＤ１９に特異的に結合することを特徴とする。
本発明のアデノ随伴ウイルスベクターは、前記ＤＮＡアプタマーは、配列番号１０～配列番号２３３のいずれかの配列を含むことを特徴とする。
本発明のアデノ随伴ウイルスベクターは、前記修飾配列は、ビオチンアクセプターペプチドであり、前記カプシドの表面に呈示されるように付加されることを特徴とする。
本発明のカプシドは、アデノ随伴ウイルスのカプシドであって、ＤＮＡアプタマーと表面で結合可能な修飾配列が付加されたカプシドを含むことを特徴とする。
本発明のＤＮＡアプタマーは、ＤＮＡアプタマーであって、ヒトＣＤ１９に特異的に結合することを特徴とする。
本発明の遺伝子導入用組成物は、前記アデノ随伴ウイルスベクターを含むことを特徴とする。
本発明の医薬組成物は、前記アデノ随伴ウイルスベクターを含むことを特徴とする。
本発明の遺伝子送達方法は、前記アデノ随伴ウイルスベクターにより、生体外で遺伝子を細胞内に送達することを特徴とする。
本発明の動物治療方法は、前記アデノ随伴ウイルスベクターにより、動物の細胞に遺伝子を導入して遺伝子治療することを特徴とする。
本発明の調製方法は、遺伝子組み換えアデノ随伴ウイルスベクターの調製方法であって、ＤＮＡアプタマーと表面で結合可能な修飾配列をカプシドに付加し、前記カプシドの前記修飾配列に前記ＤＮＡアプタマーを結合することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、遺伝子組み換えＡＡＶベクターであって、ビオチン特異的な修飾配列が付加されたカプシドを含むことで、標的細胞への指向性を高める組成物を、ビオチン化酵素によるカップリング反応等にて、非特異的な反応を少なくして結合させることができるため、非標的細胞への感染に伴う副作用、副反応を抑えることが可能なＡＡＶベクターを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
（【００１１】以降は省略されています）

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