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公開番号2024175991
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-12-19
出願番号2023094150
出願日2023-06-07
発明の名称カロテンの分析方法
出願人株式会社島津製作所
代理人個人,個人
主分類G01N 30/88 20060101AFI20241212BHJP(測定;試験)
要約【課題】α-カロテンおよびβ-カロテンを区別して分析できる。
【解決手段】
カロテンを液体クロマトグラフィーにより分析する分析方法であって、α-カロテンおよびβ-カロテンを含有する測定試料を、イソブチル基およびオクタデシル基を有する充填剤が充填されているカラムに通過させて、α-カロテンおよびβ-カロテンを分離する。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
カロテンを液体クロマトグラフィーにより分析する分析方法であって、
α－カロテンおよびβ－カロテンを含有する測定試料を、イソブチル基およびオクタデシル基を有する充填剤が充填されているカラムに通過させて、α－カロテンおよびβ－カロテンを分離する、カロテンの分析方法。
続きを表示（約 460 文字）【請求項２】
液体クロマトグラフィーにより分離した測定試料に対して、質量分析法を実施する、請求項１に記載のカロテンの分析方法。
【請求項３】
前記質量分析法において、前記測定試料を大気圧化学イオン化法によりイオン化する、請求項２に記載のカロテンの分析方法。
【請求項４】
前記質量分析法において、ｍ／ｚが１１９．０付近であるイオン、および、ｍ／ｚが１２３．０付近であるイオンを検出する、請求項２に記載のカロテンの分析方法。
【請求項５】
前記質量分析法において、ｍ／ｚが１２３．０付近であるイオンを検出することにより得られるマスクロマトグラムのピークに基づいて、α－カロテンを特定し、ｍ／ｚが１１９．０付近であるイオンを検出することにより得られるマスクロマトグラムのピークに基づいて、β－カロテンを特定する、請求項４に記載のカロテンの分析方法。
【請求項６】
移動相が、メタノールおよびエタノールの混合溶媒である、請求項１に記載のカロテンの分析方法。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、カロテンの分析方法に関する。
続きを表示（約 1,500 文字）【背景技術】
【０００２】
体の機能を正常に保つ働きをする種々のビタミンのうち、ビタミンＡは、主としてレチノールであって、カロテンが生体内で分解されることにより生成される。カロテンの多くは、α－カロテンまたはβ－カロテンから構成されている。α－カロテンおよびβ－カロテンの生体利用率は、それぞれ、１／２４、１／１２と見積もられており（非特許文献１参照）、両者の生体利用率は大きく異なる。したがって、飲食物におけるビタミンＡの活性を調査するには、飲食物中に含まれるα－カロテンおよびβ－カロテンのそれぞれの個別定量が重要となる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
厚生労働省、「日本人の食事摂取基準（２０２０年版）」１７１～１７２頁、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｍｈｌｗ．ｇｏ．ｊｐ／ｃｏｎｔｅｎｔ／１０９０４７５０／０００５８６５５３．ｐｄｆ、［令和５年５月１１日検索］，インターネット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、質量分析法によってα－カロテンおよびβ－カロテンを含む飲食物を測定しようとしても、α－カロテンおよびβ－カロテンはお互いの構造が非常に類似している異性体であるため、両者を区別して分析することが困難となっている。また、液体クロマトグラフィーによる測定においても、一般的な逆相カラム（具体的には、オクタデシル基で表面修飾したシリカゲルが充填されたＣ１８カラム）を用いると、両者の移動相中の動態が類似し、両者の保持時間はほぼ同一であるため、両者を分離することが困難となっている。
【０００５】
したがって、本発明は、α－カロテンおよびβ－カロテンを区別して分析できる方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の第１の態様の分析方法は、カロテンを液体クロマトグラフィーにより分析する分析方法であって、α－カロテンおよびβ－カロテンを含有する測定試料を、イソブチル基およびオクタデシル基を有する充填剤が充填されているカラムに通過させて、α－カロテンおよびβ－カロテンを分離する。
【発明の効果】
【０００７】
第１の態様の分析方法によれば、測定試料中のα－カロテンおよびβ－カロテンを区別して分析することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
図１は、実施例１において得られるマスクロマトグラムである。縦軸はピーク面積、横軸は保持時間を示す。
図２は、実施例１において作成した検量線であり、左図がα－カロテンの検量線、右図がβ－カロテンの検量線である。縦軸はピーク面積、横軸は濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
１．第１の実施形態
本発明の第１の実施形態の分析方法は、測定試料に対して液体クロマトグラフィー質量分析法を実施する。すなわち、測定試料に対して、液体クロマトグラフィーを実施し、続いて、液体クロマトグラフィーにより分離された測定試料に対して、質量分析法を実施する。
【００１０】
測定試料は、α－カロテンおよびβ－カロテン（下記構造式を参照）の両方を含有するものであって、例えば、野菜成分またはそれを含有する液体が挙げられる。測定液が液体（試料液）である場合は、必要に応じて、メタノールなどの有機溶媒；水などで希釈されていてもよい。また、前処理として、塩析のために硫酸ナトリウムなどの添加、遠心分離などを実施してもよい。
（【００１１】以降は省略されています）

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