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公開番号2025101853
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-07-08
出願番号2023218913
出願日2023-12-26
発明の名称微生物変異株及びこれを用いた環状エーテルの生分解処理方法
出願人三菱ケミカル株式会社
代理人個人,個人,個人,個人,個人
主分類C12N 1/21 20060101AFI20250701BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】向上された1,4-ジオキサン分解能を有する1,4-ジオキサン分解微生物変異株と、これを用いた環状エーテルの生分解処理方法の提供。
【解決手段】THFモノオキシゲナーゼαサブユニット(THF monooxygenase α-subunit)及び/又はGntRドメインプロテイン(GntR domain protein)の遺伝子発現量が野生株と比較して増加している、シュードノカルディアジオキサノボランス(Pseudonocardia dioxanivorans) CB1190由来変異株を提供する。
【選択図】図4
特許請求の範囲【請求項１】
ＴＨＦモノオキシゲナーゼαサブユニット（THF monooxygenase α-subunit）及び／又はＧｎｔＲドメインプロテイン（GntR domain protein）の遺伝子発現量が野生株と比較して増加している、シュードノカルディアジオキサノボランス（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａｄｉｏｘａｎｉｖｏｒａｎｓ）ＣＢ１１９０由来変異株。
続きを表示（約 1,000 文字）【請求項２】
シュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０の環状染色体及び環状プラスミド１－３の遺伝子配列において、以下の位置から選択される少なくとも１つの位置に、塩基の置換、挿入、又は欠失を有する、請求項１に記載のシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株。
配列番号１に示す環状染色体の遺伝子配列の115984, 350134, 350152, 350167, 350326, 350356, 350473, 350475, 598967, 642212, 1190528, 2082787, 2603923, 2634727, 2925050, 2932573, 2956189, 3035551, 3234928, 3507315, 5545605, 5640340, 5640341, 5640397, 5658991, 6194590位；
配列番号２に示す環状プラスミド１の遺伝子配列の100129, 186574位；
配列番号３に示す環状プラスミド２の遺伝子部分配列の6688, 6717, 6729位；
配列番号４に示す環状プラスミド２の遺伝子部分配列の31513位。
【請求項３】
シュードノカルディアジオキサノボランスＭＣＩ４８０４株（受託番号：ＮＩＴＥＰ－０３９４４）である、請求項２に記載のシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株。
【請求項４】
処理対象に含まれる環状エーテルの生分解処理方法であって、
前記環状エーテルと、請求項１－３のいずれか一項に記載のシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株と、を接触させる手順を含む、方法。
【請求項５】
前記環状エーテルが、１，４－ジオキサン、１，３－ジオキソラン及び２－クロロメチル－１，３－ジオキソランからなる群から選択される１以上である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記処理対象が、排水又は活性汚泥である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
請求項１－３のいずれか一項に記載のシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株を含む、環状エーテルの生分解処理用組成物。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本開示は、微生物変異株及びこれを用いた環状エーテルの生分解処理方法に関する。より詳しくは、向上された１，４－ジオキサン分解能を有する１，４－ジオキサン分解微生物変異株を用いた環状エーテルの生分解処理方法等に関する。
続きを表示（約 2,300 文字）【背景技術】
【０００２】
１，４－ジオキサンは、下記式（１）で表される環状エーテルである。１，４－ジオキサンは、２００２年に発がん作用を有する恐れがあるとしてＷＨＯの環境基準に追加された（グループ２Ｂ：ヒトに対する発がん性が疑われる）。１，４－ジオキサンは、感光性樹脂製造などの化成品工業、エチレンオキサイド及びエチレングリコール製造などの石油化学工業、ポリエステル製造などの化学繊維工業等の事業所からの排水中に含まれている。
【０００３】
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【０００４】
１，４－ジオキサンは環境中に放出された場合に分解されにくく、除去も困難であるとされている。そのため、排水中に含まれる１，４－ジオキサンを簡便かつ低コストに分解できる方法の開発が望まれている。
【０００５】
特許文献１には、１，４－ジオキサン分解菌であるＮ２３株により、汚染水等に含まれる１，４－ジオキサンを生分解処理する生分解処理方法が開示されている。また、非特許文献１には、１，４－ジオキサン分解菌シュードノカルディア・ジオキサノボランスＣＢ１１９０（Pseudonocardia dioxanivorans Strain CB1190）が記載され、１，４－ジオキサンの代謝経路と関連遺伝子群が報告されている。シュードノカルディア・ジオキサノボランスＣＢ１１９０は、理化学研究所バイオリソースセンターのＪａｐａｎＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎｏｆＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓから入手できる（JCM 13855）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
特開２０１９－０００８３１号公報
【非特許文献】
【０００７】
"Glyoxylate Metabolism Is a Key Feature of the Metabolic Degradation of 1,4-Dioxane by Pseudonocardia dioxanivorans Strain CB1190" Ariel Grostern, et.al., Applied and Environmental Microbiology, 2012, Vol.78, No.9, p3298-3308
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本開示は、向上された１，４－ジオキサン分解能を有する１，４－ジオキサン分解微生物変異株と、これを用いた環状エーテルの生分解処理方法を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題解決のため、本開示は、以下の［１］－［１０］を提供する。
［１］ＴＨＦモノオキシゲナーゼαサブユニット（THF monooxygenase α-subunit）及び／又はＧｎｔＲドメインプロテイン（GntR domain protein）の遺伝子発現量が野生株と比較して増加している、シュードノカルディアジオキサノボランス（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａｄｉｏｘａｎｉｖｏｒａｎｓ）ＣＢ１１９０由来変異株。
［２］シュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０の環状染色体及び環状プラスミド１－３の遺伝子配列において、以下の位置から選択される少なくとも１つの位置に、塩基の置換、挿入、又は欠失を有する、［１］のシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株。
配列番号１に示す環状染色体の遺伝子配列の115984, 350134, 350152, 350167, 350326, 350356, 350473, 350475, 598967, 642212, 1190528, 2082787, 2603923, 2634727, 2925050, 2932573, 2956189, 3035551, 3234928, 3507315, 5545605, 5640340, 5640341, 5640397, 5658991, 6194590位；
配列番号２に示す環状プラスミド１の遺伝子配列の100129, 186574位；
配列番号３に示す環状プラスミド２の遺伝子部分配列の6688, 6717, 6729位；
配列番号４に示す環状プラスミド２の遺伝子部分配列の31513位。
［３］シュードノカルディアジオキサノボランスＭＣＩ４８０４株（受託番号：ＮＩＴＥＰ－０３９４４）である、［１］又は［２］のシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株。
【００１０】
［４］処理対象に含まれる環状エーテルの生分解処理方法であって、
前記環状エーテルと、［１］－［３］のいずれかのシュードノカルディアジオキサノボランスＣＢ１１９０由来変異株と、を接触させる手順を含む、方法。
［５］前記環状エーテルが、１，４－ジオキサン、１，３－ジオキソラン及び２－クロロメチル－１，３－ジオキソランからなる群から選択される１以上である、［４］の方法。
［６］前記処理対象が、排水又は活性汚泥である、［４］又は［５］の方法。
（【００１１】以降は省略されています）

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