特許ウォッチ

公開番号2025073481
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-05-13
出願番号2023184324
出願日2023-10-26
発明の名称PC合成阻害剤及びそのスクリーニング方法
出願人国立大学法人山形大学
代理人個人,個人,個人,個人
主分類C12Q 1/02 20060101AFI20250502BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】本発明は、PCの合成を阻害することができる新規のPC合成阻害剤及びそのスクリーニング方法を提供する。
【解決手段】本発明は、Eki1、Cki1、及びPsd2の遺伝子が欠損している第1の微生物、及び前記遺伝子を欠損させていない第2の微生物を、それぞれ候補物質と混合して、微生物及び候補物質を含有する培地を調製する工程;前記培地中の第1の微生物及び第2の微生物をそれぞれ増殖する工程;並びに前記第1の微生物及び第2の微生物の増殖量を比較して、前記第1の微生物の増殖量が前記第2の微生物の増殖量より低い場合に、その候補物質を含む培地の候補物質をPC合成阻害剤として選択する工程を含む、PC合成阻害剤のスクリーニング方法に関する。
【選択図】図1A
特許請求の範囲【請求項１】
Ｅｋｉ１、Ｃｋｉ１、及びＰｓｄ２の遺伝子が欠損している第１の微生物、及び前記遺伝子を欠損させていない第２の微生物を、それぞれ候補物質と混合して、微生物及び候補物質を含有する培地を調製する工程、
前記培地中の第１の微生物及び第２の微生物をそれぞれ増殖する工程、並びに
前記第１の微生物及び第２の微生物の増殖量を比較して、前記第１の微生物の増殖量が前記第２の微生物の増殖量より低い場合に、その候補物質を含む培地の候補物質をＰＣ合成阻害剤として選択する工程
を含む、ＰＣ合成阻害剤のスクリーニング方法。
続きを表示（約 860 文字）【請求項２】
前記第１の微生物及び第２の微生物は、Ｐｄｒ１及び／又はＰｄｒ３を欠損している、請求項１に記載のスクリーニング方法。
【請求項３】
前記増殖量を検査する工程は、前記培地の濁度を測定することによって行われる、請求項１に記載のスクリーニング方法。
【請求項４】
前記第１の微生物及び第２の微生物は、それぞれ酵母である、請求項１に記載のスクリーニング方法。
【請求項５】
以下の式（１）～（４）の化合物の１種以上を含む、ＰＣ合成阻害剤：
TIFF
2025073481000013.tif
43
170
TIFF
2025073481000014.tif
42
170
TIFF
2025073481000015.tif
49
170
TIFF
2025073481000016.tif
54
170
（式中、
Ｘ
１
～Ｘ
８
は、それぞれ、水素原子、ハロゲン原子、ヘテロ原子を有していてもよいＣ
１
～Ｃ
１２
の炭化水素基、又は末端基がヒドロキシル基、カルボキシル基、スルホン酸基、ニトロ基、及びアミノ基からなる群より選択される、ヘテロ原子を有していてもよい化学基であり、
ｎ
１
～ｎ
８
は、それぞれ１～５の整数であり、かつ
Ｙ
１
及びＹ
２
は、それぞれ水素原子又はヘテロ原子を有していてもよいＣ
１
～Ｃ
１２
の炭化水素基である）。
【請求項６】
殺菌剤又は抗生剤である、請求項５に記載のＰＣ合成阻害剤。
【請求項７】
ミトコンドリアの分裂促進剤である、請求項５に記載のＰＣ合成阻害剤。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＣ合成阻害剤及びそのスクリーニング方法に関する。
続きを表示（約 2,600 文字）【背景技術】
【０００２】
ミトコンドリアは、細胞の活動エネルギーとなるアデノシン３リン酸（ＡＴＰ）を合成する重要なオルガネラである。また、ミトコンドリアは、細胞内のエネルギー生産のみならず、さまざまな細胞機能に関与する。
【０００３】
ミトコンドリアは、融合と分裂を繰り返しながらその構造を変化させているが、近年、ミトコンドリアの構造の制御異常が、各種の疾患、老化等に関与することが知られており、ミトコンドリアの融合と分裂の機構が注目を集めている。
【０００４】
また、ミトコンドリアは、小胞体と並んで主要なリン脂質合成の場である。リン脂質のうち、ホスファチジルコリン（ＰＣ）は、真核細胞の細胞膜を構成する最も含有量の多く、細胞の増殖に重要なリン脂質である。ＰＣの１つの合成経路としては、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）のメチル化経路が知られている。
【０００５】
ＰＥも、ＰＣと同様に細胞膜を構成し、細胞の増殖に重要なリン脂質である。図１Ａに概念的に示されているように、ＰＥは、ホスファチジルセリン（ＰＳ）から脱炭酸されて合成されるが、ミトコンドリアは、脱炭酸酵素を有するものの、ＰＳの合成能を持たない。そのため、ＰＳは、小胞体（ＥＲ）などからミトコンドリア外膜（ＭＯＭ）を経てミトコンドリア内膜（ＭＩＭ）まで輸送されて、輸送されてきたＰＳからＰＥが合成される。ミトコンドリアで作られたＰＥは、再度、小胞（ＥＲ）体へと輸送されて、メチル化されることで、ＰＣが合成される。
【０００６】
これらのリン脂質の輸送機構等については、非特許文献１及び２において詳細に報告されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
Kojima, R., Endo, T., and Tamura, Y. A phospholipid transfer function of ER-mitochondria encounter structure revealed in vitro. Sci. Rep. 6, 30777. 10.1038/srep30777 (2016).
Tamura, Y., Kojima, R., and Endo, T. Advanced In Vitro Assay System to Measure Phosphatidylserine and Phosphatidylethanolamine Transport at ER/Mitochondria Interface. In Encyclopedia of Biophysics, pp. 57-67. 10.1007/978-1-4939-9136-5_6 (2019).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、ＰＣの合成を阻害することができる新規のＰＣ合成阻害剤及びそのスクリーニング方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、以下の態様により、上記課題を解決できることを見出した。
《態様１》
Ｅｋｉ１、Ｃｋｉ１、及びＰｓｄ２の遺伝子が欠損している第１の微生物、及び前記遺伝子を欠損させていない第２の微生物を、それぞれ候補物質と混合して、微生物及び候補物質を含有する培地を調製する工程、
前記培地中の第１の微生物及び第２の微生物をそれぞれ増殖する工程、並びに
前記第１の微生物及び第２の微生物の増殖量を比較して、前記第１の微生物の増殖量が前記第２の微生物の増殖量より低い場合に、その候補物質を含む培地の候補物質をＰＣ合成阻害剤として選択する工程
を含む、ＰＣ合成阻害剤のスクリーニング方法。
《態様２》
前記第１の微生物及び第２の微生物は、Ｐｄｒ１及び／又はＰｄｒ３を欠損している、態様１に記載のスクリーニング方法。
《態様３》
前記増殖量を検査する工程は、前記培地の濁度を測定することによって行われる、態様１に記載のスクリーニング方法。
《態様４》
前記第１の微生物及び第２の微生物は、それぞれ酵母である、態様１に記載のスクリーニング方法。
《態様５》
以下の式（１）～（４）の化合物の１種以上を含む、ＰＣ合成阻害剤：
TIFF
2025073481000002.tif
43
170
TIFF
2025073481000003.tif
42
170
TIFF
2025073481000004.tif
49
170
TIFF
2025073481000005.tif
54
170
（式中、
Ｘ
１
～Ｘ
８
は、それぞれ、水素原子、ハロゲン原子、ヘテロ原子を有していてもよいＣ
１
～Ｃ
１２
の炭化水素基、又は末端基がヒドロキシル基、カルボキシル基、スルホン酸基、ニトロ基、及びアミノ基からなる群より選択される、ヘテロ原子を有していてもよい化学基であり、
ｎ
１
～ｎ
８
は、それぞれ１～５の整数であり、かつ
Ｙ
１
及びＹ
２
は、それぞれ水素原子又はヘテロ原子を有していてもよいＣ
１
～Ｃ
１２
の炭化水素基である）。
《態様６》
殺菌剤又は抗生剤である、態様５に記載のＰＣ合成阻害剤。
《態様７》
ミトコンドリアの分裂促進剤である、態様５に記載のＰＣ合成阻害剤。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、ＰＣの合成を阻害することができる新規のＰＣ合成阻害剤及びそのスクリーニング方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許