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公開番号2025063035
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-04-15
出願番号2024218770,2021573298
出願日2024-12-13,2020-06-10
発明の名称抗α4β7抗体の産生方法
出願人武田薬品工業株式会社
代理人個人,個人,個人
主分類C07K 1/14 20060101AFI20250408BHJP(有機化学)
要約【課題】抗α4β7抗体の精製方法を提供する。
【解決手段】ベドリズマブなどの抗α4β7インテグリン抗体を、例えば、哺乳動物細胞培養物の清澄化された収穫物由来の液体溶液から精製するための方法であって、(i)前記抗α4β7抗体またはその抗原結合部分を発現する組換え宿主細胞の培養物から得られた清澄化された細胞培養物の収穫物を提供する工程、及び(ii)前記細胞培養物の収穫物から前記抗α4β7抗体またはその抗原結合部分を精製する工程であって、ここで、前記抗体は、4.0以下のpHに24時間以内曝露される、前記精製する工程と、を含む、前記方法である。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
ベドリズマブを含む組成物を生成する方法であって、以下：
ｐＨ６．５より高いｐＨでベドリズマブを含む組成物を提供することと；
ベドリズマブを含む前記組成物を少なくとも２０分～１０時間インキュベートすることと
；
それにより、ベドリズマブを含む組成物を生成することと、
を含む、前記方法。
続きを表示（約 1,000 文字）【請求項２】
前記方法が、塩基性ベドリズマブアイソフォーム種のレベルが低下したベドリズマブを
含む組成物を生成する方法であり、前記方法が、塩基性ベドリズマブアイソフォーム種の
レベルが低下したベドリズマブを含む組成物を生成する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法が、＜１６％、＜１５％、＜１４％、＜１３％、＜１２％、＜１１％または＜
１０％の塩基性ベドリズマブアイソフォーム種を有するベドリズマブを含む組成物を生成
する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記インキュベーションがベドリズマブ精製中に行われ、前記インキュベーションが（
ａ）抗体の限外濾過／ダイアフィルトレーション（ＵＦ／ＤＦ）前に、または（ｂ）薬学
的に許容される緩衝液中での抗体の製剤化前に行われる、請求項１～３のいずれか１項に
記載の方法。
【請求項５】
前記インキュベーションが周囲温度で行われる、請求項１～４のいずれか１項に記載の
方法。
【請求項６】
前記インキュベーションが１５～３０℃で実施されるか、または前記インキュベーショ
ンが２０～２５℃で実施される、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
ベドリズマブを含む前記組成物が約６．５～８．５のｐＨで提供される、先行請求項の
いずれか１項に記載の方法
【請求項８】
ベドリズマブを含む前記組成物が約７．０～８．０のｐＨで提供される、先行請求項の
いずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
ベドリズマブを含む前記組成物が約７．０～７．５のｐＨで提供される、先行請求項の
いずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ベドリズマブを含む前記組成物が、約ｐＨ６．５、ｐＨ６．６、ｐＨ６．７、ｐＨ６．
８、ｐＨ６．９、ｐＨ７．０、ｐＨ７．１、ｐＨ７．２、ｐＨ７．３、ｐＨ７．４、ｐＨ
７．５、ｐＨ７．６、ｐＨ７．７、ｐＨ７．８、ｐＨ７．９、ｐＨ８．０、ｐＨ８．１、
ｐＨ８．２、ｐＨ８．３、ｐＨ８．４、またはｐＨ８．５のｐＨで提供される、先行請求
項のいずれか１項に記載の方法。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗α４β７抗体またはその断片を精製するための方法に関する。
続きを表示（約 2,600 文字）【０００２】
関連出願
本出願は、２０１９年６月１０日に出願された、米国仮出願番号第６２／８５９，４９
４号に対する優先権を主張する。前述の出願の内容の全体が、参照によって本明細書に組
み込まれる。
【０００３】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩｆフォーマットで電子的に提出された配列表を含み、参照により
その全体が本明細書に組み込まれる。２０２０年６月５日に作成された上記ＡＳＣＩＩコ
ピーは、Ｔ１０３０２２＿１０９０ＷＯ＿ＳＬ．ｔｘｔという名称であり、１０，００９
バイトのサイズである。
【背景技術】
【０００４】
タンパク質の大規模で経済的な精製は、バイオテクノロジー産業においてますます重要
な関心事になっている。一般に、生物学的医薬品は、目的の治療用タンパク質を大量に生
産するように設計された原核生物、例えば細菌、または真核生物、例えば哺乳動物または
真菌の細胞株を使用する細胞培養によって生産される。使用される細胞株は生きている生
物体であるので、糖、アミノ酸、及び成長因子を含む複雑な細胞培養培地を供給する必要
があり、動物血清の調製物から供給されることもある。例えば、細胞培養培地成分、宿主
細胞タンパク質（ＨＣＰ）、宿主核酸及び／またはクロマトグラフィー材料、ならびに凝
集体、誤って折りたたまれた種、または目的のタンパク質の断片などの生成物関連の不純
物を含む、プロセス関連不純物からの所望の組換え治療用タンパク質の分離は、ヒトの治
療薬として使用するのに十分な純度にするには、手ごわい課題がある。
【０００５】
凝集体を含む生成物関連及びプロセス関連の不純物は、精製プロセスを妨害し、保存中
にタンパク質に影響を与える可能性があるか、及び／または対象に抗体を投与すると、副
作用の原因となる可能性がある（Ｓｈｕｋｌａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇ
ｒ．Ｂ．Ａｎａｌｙｔ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．ＬｉｆｅＳｃｉ．，８４８（
１），２８－３９）。
【０００６】
従って、効果的に不純物を除去し、タンパク質の回収率を向上させ、及び治療的要件を
維持しながら、治療用タンパク質、例えば、抗体の精製の改善方法に関する技術の必要性
が残っている。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、少なくとも部分的に、抗α４β７抗体またはその抗原結合部分を産生するた
めのプロセスの開発に基づいている。いくつかの実施形態では、抗α４β７抗体またはそ
の抗原結合部分は、ヒト化抗α４β７抗体またはその抗原結合部分である。以下の態様及
び実施形態のいずれかにおいて、ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分は、配
列番号２に記載のＣＤＲ１、配列番号３に記載のＣＤＲ２、及び配列番号４に記載のＣＤ
Ｒ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号６に記載のＣＤＲ１、配列番号７に記載の
ＣＤＲ２、及び配列番号８に記載のＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み得る。いくつかの
実施形態では、ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分は、配列番号１を含む重
鎖可変領域及び／または配列番号２を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では
、ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分は、配列番号９を含む重鎖及び／また
は配列番号１０を含む軽鎖を含む。例示的な実施形態では、抗α４β７抗体は、ベドリズ
マブ、またはその抗原結合部分である。
【０００８】
したがって、一態様では、本発明は、ヒト化抗α４β７抗体またはその抗原結合部分を
含む組成物を生成する方法を提供し、この方法は以下を含む：ｐＨ６．５より大きいｐＨ
で、ヒト化抗α４β７抗体またはその抗原結合部分を含む組成物を提供すること；ヒト化
抗α４β７抗体またはその抗原結合部分を含む組成物を少なくとも２０分～１０時間イン
キュベートすること；それにより、ヒト化抗α４β７抗体またはその抗原結合部分を含む
組成物を産生すること。
【０００９】
別の態様では、本発明は、塩基性アイソフォーム種のレベルが低下したヒト化抗α４β
７抗体、またはその抗原結合部分を含む組成物を生成する方法を提供し、この方法は以下
を含む：ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分を含む組成物をｐＨ６．５を超
えるｐＨで提供すること；ヒト化抗α４β７抗体またはその抗原結合部分を含む組成物を
、組成物中の抗α４β７抗体またはその抗原結合部分の塩基性アイソフォーム種のレベル
を低下させるのに十分な時間インキュベートすること；それにより、塩基性アイソフォー
ム種のレベルが低下したヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分を含む組成物を
生成すること。
【００１０】
前述の態様のいくつかの実施形態では、ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部
分は、配列番号２に記載のＣＤＲ１、配列番号３に記載のＣＤＲ２、及び配列番号４に記
載のＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号６に記載のＣＤＲ１、配列番号７
に記載のＣＤＲ２、及び配列番号８に記載のＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつ
かの実施形態では、ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分は、配列番号１を含
む重鎖可変領域及び／または配列番号２を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態
では、ヒト化抗α４β７抗体、またはその抗原結合部分は、配列番号９を含む重鎖及び／
または配列番号１０を含む軽鎖を含む。例示的な実施形態では、抗α４β７抗体は、ベド
リズマブ、またはその抗原結合部分である。
（【００１１】以降は省略されています）

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