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公開番号2025010564
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-01-22
出願番号2024159085,2023086606
出願日2024-09-13,2019-01-31
発明の名称治療用モノクローナル抗体の品質特性の定量化及びモデル化
出願人リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド,REGENERON PHARMACEUTICALS, INC.
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類G01N 33/68 20060101AFI20250115BHJP(測定;試験)
要約【課題】抗体を投与した後の、目的の翻訳後修飾を伴う該抗体のインビボ血清中濃度を予測する方法を、該抗体の翻訳後バリアントへの対象の曝露を予測する方法とともに提供する。
【解決手段】目的の翻訳後修飾を伴う該抗体のパーセンテージを、該翻訳後修飾に対して特定されるインビボ速度定数を用いて予測すること、及び目的の翻訳後修飾を伴う該抗体の予測されたパーセンテージに、該抗体のインビボ濃度を掛けて、目的の翻訳後修飾を伴う抗体の濃度を特定することを含む。
【選択図】図3
特許請求の範囲【請求項１】
抗体の製品品質特性（ＰＱＡ）の許容範囲を特定する方法であって、
（ａ）抗体の単回投与後の、ＰＱＡを伴う前記抗体のインビボ血清中濃度を、
（ｉ）ＰＱＡを伴う前記抗体のパーセンテージを、前記ＰＱＡに対して特定されるインビボ速度定数を用いて予測すること、及び
（ｉｉ）ＰＱＡを伴う前記抗体の前記予測されたパーセンテージに、前記抗体の全インビボ濃度を掛けて、ＰＱＡを伴う前記抗体の濃度を特定すること、およびそれにより単回投与モデルを作製すること；
により予測し、
（ｂ）工程（ａ）を少なくとも1回繰り返し、それにより、1つ以上の追加の単回投与モデルを作製すること；
（ｃ）工程（ａ）および工程（ｂ）の複数の単回投与モデルを重ね合わせること、およびそれにより複数回投与モデルを作製すること；
（ｄ）複数回投与モデルを使用して、初期ＰＱＡレベルと、抗体の複数回投与後のＰＱＡレベルの間の関係を特定すること；ならびに
（ｅ）前記関係を使用して、抗体のＰＱＡの許容範囲を特定すること、
を含む、前記方法。
続きを表示（約 1,100 文字）【請求項２】
前記ＰＱＡについての前記インビボ速度定数が、
前記ＰＱＡのパーセンテージを時間の関数として定量化すること、及び
前記ＰＱＡの前記定量化されたパーセンテージを、方程式
TIFF
2025010564000031.tif
9
77
にフィットさせること
によって特定され、
式中、Ｐ
ＰＱＡ
（ｔ）は、時間の関数としての前記ＰＱＡの割合であり、Ｐ
0
は、ＰＱＡの初期パーセンテージであり、ｋ
ＰＱＡ
は、前記ＰＱＡの速度定数である、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＰＱＡを伴う前記抗体への曝露を特定することをさらに含み、前記ＰＱＡを伴う前記抗体への曝露を特定することが、前記ＰＱＡを伴う前記抗体の濃度の曲線下面積（ＡＵＣ）を特定することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抗体の前記血清中濃度が、２コンパートメント薬物動態モデルの方程式Ｃ（ｔ）＝Ａｅ
－αｔ
＋Ｂｅ
－βｔ
で示され、式中、Ａ及びＢは、それぞれ、α及びβがハイブリッド一次定数である場合のハイブリッド係数である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
抗体のＰＱＡの許容範囲が、抗体の複数回投与後のＰＱＡレベルが、実質的に前記初期ＰＱＡレベルに対して非感受性であるＰＱＡレベルの範囲を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
抗体のＰＱＡの許容範囲が、抗体の複数回投与後の前記ＰＱＡを伴う前記抗体への曝露が、実質的に前記初期ＰＱＡレベルに対して非感受性であるＰＱＡレベルの範囲を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
抗体のＰＱＡの許容範囲が、約０％及び約１０％の間、約０％及び８％の間、約０％及び約５％の間、約０％及び約４％の間、約０％及び約３％の間、約０％及び約２％の間、約０％及び約１％の間、約０％及び約０.５％の間、約０％及び約０.２％の間、または約０％及び約０.１％の間である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記抗体が、治療用組み換えモノクローナル抗体を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＰＱＡが、薬物の安定性、安全性、及び／または有効性に影響を与え得る、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＰＱＡが、脱アミド化、酸化、糖化、ジスルフィド形成、Ｎ末端ピログルタミン酸形成、Ｃ末端リジン除去、及び高マンノースグリコシル化のうちの１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、２０１９年１月３１日に作成され、５１４バイトを含む１０４２１ＷＯ０１－Ｓｅｑｕｅｎｃｅ．ｔｘｔとしてコンピュータ可読形式で提出された配列表を参照することにより組み込む。
続きを表示（約 3,700 文字）【０００２】
発明の分野
本発明は、バイオ医薬品に関し、また、治療用抗体のインビボ翻訳後修飾の予測及びモデル化に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
治療用モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、哺乳類細胞で産生される異種分子であり、翻訳後修飾（ＰＴＭ）に起因するバリアント等、多くの製品バリアントを含む。ＰＴＭを介して産生されるバリアントは、製造中、精製中、保存中、及び投与後のｍＡｂの存続期間を通して生じ得る。これらバリアントまたは製品関連の修飾は、製品品質特性（ＰＱＡ）とも呼ばれる。事前に定義された許容基準内でＰＱＡを制御することは、一貫した製品品質を保証し、薬物の安全性と有効性への潜在的な影響を低減することから、バイオ医薬品業界にとって不可欠である。薬物の製造及び保存中に生じる修飾は、多くの場合、確実に監視及び制御することができる。しかしながら、薬物の投与後、製剤緩衝液に対して著しく異なる血流の環境のため、さらなる修飾が生じ得る。ｍＡｂのインビボ修飾は、通常、監視が困難であり、あまり研究されていない。ＰＴＭのインビボでの変化の評価及び予測は、製品のリスク評価における品質特性の重要度の理解を促進するだけでなく、製品の設計及び開発チームが、インビボでの安定性が向上したｍＡｂ薬物候補を設計するのにも役立つ。
【０００４】
食品医薬品局の業界向けガイダンスでは、インビボ環境内での修飾に対する治療用タンパク質の感受性をスポンサーが評価するべきであることを推奨している（ＧｕｉｄａｎｃｅｆｏｒＩｎｄｕｓｔｒｙ，ＩｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙＡｓｓｅｓｓｍｅｎｔｆｏｒＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＰｒｏｔｅｉｎＰｒｏｄｕｃｔｓ．２０１４参照）。結果として、脱アミド化（例えば、Ｈｕａｎｇｅｔａｌ．，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌｃｈｅｍｉｓｔｒｙ２００５；７７：１４３２－９、Ｏｕｅｌｌｅｔｔｅｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１３；５：４３２－４４、Ｙｉｎｅｔａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈ２０１３；３０：１６７－７８、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０参照）、酸化（例えば、Ｙｉｎｅｔａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈ２０１３；３０：１６７－７８、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０参照）、糖化（例えば、Ｇｏｅｔｚｅｅｔａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ２０１２；２２：２２１－３４参照）、グリコシル化（例えば、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｇｏｅｔｚｅｅｔａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ２０１１；２１：９４９－５９、Ａｌｅｓｓａｎｄｒｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１２；４：５０９－２０．参照）、ジスルフィド（例えば、ＬｉＹｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｕｅｔａｌ．，ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈｅｍｉｓｔｒｙ２００８；２８３：２９２６６－７２参照）、Ｎ末端ピログルタミン酸（例えば、Ｙｉｎｅｔａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈ２０１３；３０：１６７－７８、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｕｅｔａｌ．，ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈｅｍｉｓｔｒｙ２０１１；２８６：１１２１１－７参照）、及びＣ末端リジン除去（例えば、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｃａｉｅｔａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ２０１１；１０８：４０４－１２参照）を含めた多くのＰＱＡのインビボでの挙動が動物またはヒトサンプルで調べられている。血清サンプルから治療用ｍＡｂを抽出し、分析での内因性タンパク質バックグラウンドの干渉を低減するため、親和性精製がしばしば使用される（例えば、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０参照）。動物での試験の場合、抗ヒトＦｃ抗体または抗原が、捕捉試薬として容易に使用され得る。ヒトでの試験の場合、当該治療用ｍＡｂ固有の相補性決定領域（ＣＤＲ）を特異的に認識する抗原または抗体が、捕捉試薬として使用され得る。親和性精製後、液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）ペプチドマッピングが、ＰＴＭ製品バリアントの相対存在量を定量化するためにしばしば使用される。最近、単回投与レジメンにおいて、インビボＰＴＭ定量を薬物動態（ＰＫ）モデルと組み合わせ、ＰＴＭ製品バリアントの形成及び排除を評価し、当該対象のＰＱＡへの曝露を定量的に評価し（例えば、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｌｉｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１６：０、Ｇｏｅｔｚｅｅｔａｌ．，ｍＡｂｓ２０１０；２：５００－７参照）、製品リスク評価のためのＰＱＡの重要度の確立を支援している。しかしながら、複数回投与レジメンにおいてＰＴＭのインビボでの進行及び対象のＰＱＡへの曝露をシミュレートし、ＰＱＡの重要度を定量的に評価するモデル化は試みられていない。
【発明の概要】
【０００５】
１つの態様では、本発明は、抗体の単回投与後の、目的の翻訳後修飾を伴う該抗体のインビボ血清中濃度を予測する方法を提供し、該方法は、（ａ）目的の翻訳後修飾を伴う抗体のパーセンテージを、該翻訳後修飾に対して特定されるインビボ速度定数を用いて予測すること、及び（ｂ）目的の翻訳後修飾を伴う抗体の該予測パーセンテージに、該抗体のインビボ濃度を掛け、目的の翻訳後修飾を伴う抗体の濃度を特定することを含む。場合によっては、次の方程式が計算に使用される：Ｃ
ＰＴＭ
（ｔ）＝Ｃ（ｔ）・Ｐ（ｔ）、式中、Ｃ
ＰＴＭ
（ｔ）は、目的の翻訳後修飾を伴う抗体の血清中濃度であり、Ｃ（ｔ）は、抗体の血清中濃度であり、Ｐ（ｔ）は、目的の翻訳後修飾のパーセンテージである。
【０００６】
いくつかの実施形態では、翻訳後修飾についてのインビボ速度定数は、目的の翻訳後修飾のパーセンテージを時間の関数として定量化すること、及び目的の該翻訳後修飾の定量化されたパーセンテージを、方程式
TIFF
2025010564000002.tif
5
128
にフィットさせることによって特定される。式中、Ｐ
ＰＴＭ
（ｔ）は、時間の関数としての翻訳後修飾の割合であり、Ｐ
０
は、翻訳後修飾の初期パーセンテージであり、ｋ
ＰＴＭ
は、翻訳後修飾の速度定数である。
【０００７】
いくつかの実施形態では、該方法は、さらに、目的の翻訳後修飾を伴う抗体への対象の曝露を特定することを含む。場合によっては、目的の翻訳後修飾を伴う抗体への対象の曝露を特定することには、目的の翻訳後修飾を伴う抗体の濃度（Ｃ
ＰＴＭ
（ｔ））の曲線下面積（ＡＵＣ）を特定することが含まれる。
【０００８】
いくつかの実施形態では、該抗体の血清中濃度は、２コンパートメント薬物動態モデルの方程式Ｃ（ｔ）＝Ａｅ
－αｔ
＋Ｂｅ
－βｔ
で示される。式中、Ａ及びＢは、それぞれ、α及びβがハイブリッド一次定数である場合のハイブリッド係数である。
【０００９】
いくつかの実施形態では、該方法はさらに、該抗体の複数回投与後に、目的の翻訳後修飾を伴う該抗体のインビボ血清中濃度を予測することを含む。場合によっては、該抗体の複数回投与後に目的の翻訳後修飾を伴う該抗体のインビボ血清中濃度を予測することには、複数の単回投与モデルを重ね合わせることが含まれ、この場合、各投与での該抗体の血清中濃度は、２コンパートメント薬物動態モデルの方程式Ｃ（ｔ）＝Ａｅ
－αｔ
＋Ｂｅ
－βｔ
によって個々に示され、式中、Ａ及びＢは、それぞれ、α及びβがハイブリッド一次定数である場合のハイブリッド係数である。
【００１０】
該方法の様々な実施形態では、該抗体は、治療用組み換えモノクローナル抗体を含む。場合によっては、該翻訳後修飾は、薬物の安定性、安全性、及び／または有効性に影響を与え得る製品品質特性を含む。
（【００１１】以降は省略されています）

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