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公開番号2025134810
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-09-17
出願番号2025099946,2021524912
出願日2025-06-16,2020-06-05
発明の名称プロテアーゼ基質、及びプロテアーゼ切断配列を含むポリペプチド
出願人中外製薬株式会社
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類C07K 16/18 20060101AFI20250909BHJP(有機化学)
要約【課題】プロテアーゼ基質、プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列、プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチド及びそれらの製造方法、プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチドを含む医薬組成物、ポリペプチドに含まれるプロテアーゼ切断配列が切断されることにより抗原結合ドメインまたはリガンドを遊離させる方法を提供する。
【解決手段】プロテアーゼ基質として使用可能な化合物、特にプロテアーゼ基質として使用可能な/プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列を見出すとともに、プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列(略してプロテアーゼ切断配列)を含むポリペプチドを投与することを含む疾患の治療に有用であること、及び疾患の治療のための医薬の製造において当該プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチドが有用であることを見出した。また、当該プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチド及びそれらの製造方法を創作した。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、プロテアーゼによる切断率が高い、プロテアーゼ基質。
続きを表示（約 2,500 文字）【請求項２】
ヒト血清により切断されない、請求項１に記載のプロテアーゼ基質。
【請求項３】
下記から選ばれる少なくとも一つの配列を含む、請求項１または請求項２に記載のプロテアーゼ基質：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
【請求項４】
前記プロテアーゼはマトリプターゼおよび／またはウロキナーゼである、請求項１から請求項３のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
【請求項５】
前記プロテアーゼはヒトＭＴ－ＳＰ１、マウスＭＴ－ＳＰ１、ヒトｕＰＡ、マウスｕＰＡから選ばれる少なくとも一種類のプロテアーゼである、請求項１から請求項４のいずれかに記載のプロテアーゼ基質。
【請求項６】
下記から選ばれる少なくとも一つの配列の、プロテアーゼ切断配列としての使用：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
【請求項７】
下記から選ばれる少なくとも一つのプロテアーゼ切断配列を含む、ポリペプチド：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のN末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のN末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のN末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のN末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のN末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のN末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のN末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のN末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のN末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のN末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
【請求項８】
請求項７に記載のポリペプチドであって、当該ポリペプチドは抗原結合ドメインと運搬部分とを含み、当該運搬部分は前記抗原結合ドメインの抗原結合活性を抑制する抑制ドメインを有する、ポリペプチド。
【請求項９】
請求項７に記載のポリペプチドであって、当該ポリペプチドはリガンドに結合可能なリガンド結合分子であり、前記プロテアーゼ切断配列が切断された状態における当該リガンド結合分子のリガンドに対する結合が、前記プロテアーゼ切断配列が未切断の状態における当該リガンド結合分子のリガンドに対する結合より弱い、ポリペプチド。
【請求項１０】
請求項７に記載のポリペプチドであって、当該ポリペプチドはリガンドに結合可能なリガンド結合分子であり、当該リガンド結合分子は単ドメイン抗体を含み、当該単ドメイン抗体はリガンドに結合可能であり且つ少なくとも一つの前記プロテアーゼ切断配列が導入されており、当該プロテアーゼ切断配列が切断された状態での当該リガンド結合分子の前記リガンドに対する結合が、当該プロテアーゼ切断配列が未切断の状態での当該リガンド結合分子の前記リガンドに対する結合より減弱される、ポリペプチド。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本開示は、プロテアーゼ基質、プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列、プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチド及びそれらの製造方法、プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチドを含む医薬組成物、ポリペプチドに含まれるプロテアーゼ切断配列が切断されることにより抗原結合ドメインまたはリガンドを放出する方法を提供する。
続きを表示（約 23,000 文字）【背景技術】
【０００２】
プロテアーゼは、アミノ酸残基間のペプチド結合を切断する酵素である。一部のプロテアーゼは、タンパク質内の特定のアミノ酸配列の存在に基づいて特定のペプチド結合を破壊ことが知られている。プロテアーゼは、すべての生物体内で自然に生じ、簡単な分解から高度に調整された経路までさまざまな生理的反応に関与している。しかしながら、多くの病的状態が、調節を逸脱したプロテアーゼの発現及び／又は活性に関連している。このように、不適切なタンパク質分解が、癌、並びに心臓血管疾患、炎症性疾患、神経変性疾患、真核生物性疾患、細菌性疾患、ウイルス性疾患、及び寄生虫性疾患の発生及び進行において主要な役割を担っている可能性がある。
【０００３】
従って、プロテアーゼのための新しい基質を同定する必要性、並びにさまざまな治療的、診断的、及び予防的適応においてこれらの基質を使用する必要性が存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
WO2018/097307
WO2018/097308
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本開示は、このような状況に鑑みて為されたものであり、その目的の一つは、プロテアーゼ基質、プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列、プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチド及びそれらの製造方法、プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチドを含む医薬組成物、ポリペプチドに含まれるプロテアーゼ切断配列が切断されることにより抗原結合ドメインまたはリガンドを放出する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示の発明者らは、上記の目的を達成するために鋭意研究を進めたところ、プロテアーゼ基質として使用可能な化合物、特にプロテアーゼ基質として使用可能な／プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列を見出すとともに、プロテアーゼにより切断可能なペプチド配列（略してプロテアーゼ切断配列）を含むポリペプチドを投与することを含む疾患の治療に有用であること、及び疾患の治療のための医薬の製造において当該プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチドが有用であることを見出した。また、本開示の発明者らは、当該プロテアーゼ切断配列を含むポリペプチド及びそれらの製造方法を創作して本開示を完成させた。
【０００７】
本開示はこのような知見に基づくものであり、具体的には以下に例示的に記載する態様を包含するものである。
［１］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、プロテアーゼによる切断率が高い、プロテアーゼ基質。
［２］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトｕＰＡによる切断率が高い、［１］に記載のプロテアーゼ基質。
［３］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトＭＴ－ＳＰ１による切断率が高い、［１］から［２］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［４］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスｕＰＡによる切断率が高い、［１］から［３］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［５］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスＭＴ－ＳＰ１による切断率が高い、［１］から［４］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［６］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトｕＰＡによる切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１］から［５］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［７］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトＭＴ－ＳＰ１による切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１］から［６］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［８］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスｕＰＡによる切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１］から［７］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［９］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスＭＴ－ＳＰ１による切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１］から［８］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［１０］ヒト血清により切断されない、［１］から［９］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［１１］下記から選ばれる少なくとも一つの配列を含む、［１］から［１０］に記載のプロテアーゼ基質：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
［１２］下記から選ばれる少なくとも一つの配列を含む、プロテアーゼ基質：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
［１３］前記プロテアーゼはマトリプターゼおよび／またはウロキナーゼである、［１２］に記載のプロテアーゼ基質。
［１４］前記プロテアーゼはヒトＭＴ－ＳＰ１、マウスＭＴ－ＳＰ１、ヒトｕＰＡ、マウスｕＰＡから選ばれる少なくとも一種類のプロテアーゼである、［１２］から［１３］のいずれかに記載のプロテアーゼ基質。
［１５］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、前記プロテアーゼによる切断率が高い、［１２］から［１４］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［１６］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトｕＰＡによる切断率が高い、［１２］から［１５］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［１７］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトＭＴ－ＳＰ１による切断率が高い、［１２］から［１６］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［１８］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスｕＰＡによる切断率が高い、［１２］から［１７］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［１９］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスＭＴ－ＳＰ１による切断率が高い、［１２］から［１８］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［２０］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトｕＰＡによる切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１２］から［１９］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［２１］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、ヒトＭＴ－ＳＰ１による切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１２］から［２０］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［２２］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスｕＰＡによる切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１２］から［２１］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［２３］配列番号：１、２、３のいずれか一つの配列を含むプロテアーゼ基質に比べ、マウスＭＴ－ＳＰ１による切断率とヒト血清による切断率の比が高い、［１２］から［２２］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［２４］ヒト血清により切断されない、［１２］から［２３］のいずれか一つに記載のプロテアーゼ基質。
［２５］下記から選ばれる少なくとも一つの配列の、プロテアーゼ切断配列としての使用：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
［２６］下記から選ばれる少なくとも一つの配列を含む、ポリペプチド：
配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列。
［２７］配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列から選ばれる前記配列はプロテアーゼにより切断可能なプロテアーゼ切断配列である、［２６］に記載のポリペプチド。
［２８］［２６］または［２７］に記載のポリペプチドを製造する方法。
［２９］［２６］または［２７］に記載のポリペプチドをエンコードするポリヌクレオチド。
［３０］［２９］に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［３１］［２９］に記載のポリヌクレオチドまたは［３０］に記載のベクターを含む宿主細胞。
［３２］［３１］に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、［２６］または［２７］に記載のポリペプチドを製造する方法。
［３３］ポリペプチドを培養上清から単離する工程を含む、［３２］に記載のポリペプチドを製造する方法。
【０００８】
［Ａ－１］［２７］に記載のポリペプチドであって、当該ポリペプチドは抗原結合ドメインと運搬部分とを含み、当該運搬部分は前記抗原結合ドメインの抗原結合活性を抑制する抑制ドメインを有する、ポリペプチド。
［Ａ－２］前記プロテアーゼ切断配列がプロテアーゼにより切断された状態における前記抑制ドメインの前記抗原結合ドメインの抗原結合活性に対する抑制は、前記プロテアーゼ切断配列が未切断の状態における前記抑制ドメインの前記抗原結合ドメインの抗原結合活性に対する抑制より弱い、［Ａ－１］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３］前記抗原結合ドメインは前記未切断のポリペプチドより短い血中半減期を有する、［Ａ－１］または［Ａ－２］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４］前記抗原結合ドメインは前記運搬部分より短い血中半減期を有する、［Ａ－１］から［Ａ－３］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－５］前記抗原結合ドメインの分子量は前記運搬部分の分子量より小さい、［Ａ－１］から［Ａ－４］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－６］前記抗原結合ドメインの分子量は６０ｋＤａ以下である、［Ａ－１］から［Ａ－５］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－７］前記運搬部分はＦｃＲｎ結合活性を有し、前記抗原結合ドメインはＦｃＲｎ結合活性を有さないまたは前記運搬部分より弱いＦｃＲｎ結合活性を有する、［Ａ－１］から［Ａ－６］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－８］前記抗原結合ドメインは前記ポリペプチドから遊離可能であり、前記抗原結合ドメインは、前記ポリペプチドから遊離している状態下における抗原結合活性は、前記ポリペプチドから遊離していない状態下における抗原結合活性より高い、［Ａ－１］から［Ａ－７］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－９］前記抗原結合ドメインと前記運搬部分の前記抑制ドメインが会合することで前記抗原結合ドメインの抗原結合活性が抑制される、［Ａ－１］から［Ａ－８］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－１０］前記プロテアーゼ切断配列がプロテアーゼにより切断されることで前記抗原結合ドメインが前記ポリペプチドから遊離可能になる、［Ａ－８］に記載のポリペプチド。
［Ａ－１１］前記プロテアーゼ切断配列がプロテアーゼにより切断されることで前記抗原結合ドメインと前記運搬部分の前記抑制ドメインの会合が解消される、［Ａ－９］に記載のポリペプチド。
［Ａ－１２］前記プロテアーゼは、マトリプターゼおよび／またはウロキナーゼである、［Ａ－１］から［Ａ－１１］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－１３］前記プロテアーゼは、ヒトＭＴ－ＳＰ１、マウスＭＴ－ＳＰ１、ヒトｕＰＡ、マウスｕＰＡから選ばれる少なくとも一種類のプロテアーゼである、［Ａ－１］から［Ａ－１１］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－１４］前記プロテアーゼ切断配列の一端に、第一可動リンカーが更に付加されている、［Ａ－１］から［Ａ－１３］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－１５］前記第一可動リンカーは、グリシン－セリンポリマーからなる可動リンカーである、［Ａ－１４］に記載のポリペプチド。
［Ａ－１６］前記プロテアーゼ切断配列の他端に、第二可動リンカーが更に付加されている、［Ａ－１４］または［Ａ－１５］に記載のポリペプチド。
［Ａ－１７］前記第二可動リンカーは、グリシン－セリンポリマーからなる可動リンカーである、［Ａ－１６］に記載のポリペプチド。
［Ａ－１８］前記抗原結合ドメインは単ドメイン抗体を含み、もしくは単ドメイン抗体であり、前記運搬部分の前記抑制ドメインは当該単ドメイン抗体の抗原結合活性を抑制する、［Ａ－１］から［Ａ－１７］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－１９］前記単ドメイン抗体は、ＶＨＨ、または単ドメインで抗原結合活性を有するＶＨ、または単ドメインで抗原結合活性を有するＶＬである、［Ａ－１８］に記載のポリペプチド。
［Ａ－２０］前記抗原結合ドメインは単ドメイン抗体を含み、前記運搬部分の前記抑制ドメインはＶＨＨ、または抗体ＶＨ、または抗体ＶＬであり、前記単ドメイン抗体は当該ＶＨＨ、または抗体ＶＨ、または抗体ＶＬにより抗原結合活性が抑制される、［Ａ－１］から［Ａ－１９］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２１］前記抗原結合ドメインは単ドメイン抗体を含み、前記運搬部分の前記抑制ドメインはＶＨＨ、または抗体ＶＨ、または抗体ＶＬであり、前記単ドメイン抗体は当該ＶＨＨ、または抗体ＶＨ、または抗体ＶＬと会合することにより抗原結合活性が抑制される、［Ａ－１］から［Ａ－２０］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２２］前記単ドメイン抗体はＶＨＨ、または単ドメインで抗原結合活性を有するＶＨであり、前記運搬部分の前記抑制ドメインは抗体ＶＬであり、前記ＶＨＨまたは単ドメインで抗原結合活性を有するＶＨは、前記抗体ＶＬと会合することで抗原結合活性が抑制される、［Ａ－１８］から［Ａ－２１］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２３］前記単ドメイン抗体はＶＨＨであり、当該ＶＨＨは３７番、４４番、４５番、または４７番（すべてＫａｂａｔナンバリング）のアミノ酸から選ばれる少なくとも一つのポジションにおいてアミノ酸置換されている、［Ａ－１８］から［Ａ－２２］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２４］前記単ドメイン抗体はＶＨＨであり、当該ＶＨＨは３７Ｖ、４４Ｇ、４５Ｌ、または４７Ｗ（すべてＫａｂａｔナンバリング）のアミノ酸から選ばれる少なくとも一つのアミノ酸を含む、［Ａ－１８］から［Ａ－２２］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２５］前記単ドメイン抗体はＶＨＨであり、当該ＶＨＨはＦ３７Ｖ、Ｙ３７Ｖ、Ｅ４４Ｇ、Ｑ４４Ｇ、Ｒ４５Ｌ、Ｈ４５Ｌ、Ｇ４７Ｗ、Ｆ４７Ｗ、Ｌ４７Ｗ、Ｔ４７Ｗ、またはＳ４７Ｗ（すべてＫａｂａｔナンバリング）のアミノ酸置換から選ばれる少なくとも一つのアミノ酸置換を含む、［Ａ－１８］から［Ａ－２２］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２６］前記単ドメイン抗体はＶＨＨであり、当該ＶＨＨは３７番／４４番、３７番／４５番、３７番／４７番、４４番／４５番、４４番／４７番、４５番／４７番、３７番／４４番／４５番、３７番／４４番／４７番、３７番／４５番／４７番、４４番／４５番／４７番、３７番／４４番／４５番／４７番（すべてＫａｂａｔナンバリング）から選ばれる少なくとも一組のポジションにおいてアミノ酸置換されている、［Ａ－１８］から［Ａ－２２］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２７］前記単ドメイン抗体はＶＨＨであり、当該ＶＨＨは３７Ｖ／４４Ｇ、３７Ｖ／４５Ｌ、３７Ｖ／４７Ｗ、４４Ｇ／４５Ｌ、４４Ｇ／４７Ｗ、４５Ｌ／４７Ｗ、３７Ｖ／４４Ｇ／４５Ｌ、３７Ｖ／４４Ｇ／４７Ｗ、３７Ｖ／４５Ｌ／４７Ｗ、４４Ｇ／４５Ｌ／４７Ｗ、３７Ｖ／４４Ｇ／４５Ｌ／４７Ｗ（すべてＫａｂａｔナンバリング）から選ばれる少なくとも一組のアミノ酸を含む、［Ａ－１８］から［Ａ－２２］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２８］前記単ドメイン抗体はＶＨＨであり、当該ＶＨＨはＦ３７Ｖ／Ｒ４５Ｌ、Ｆ３７Ｖ／Ｇ４７Ｗ、Ｒ４５Ｌ／Ｇ４７Ｗ、Ｆ３７Ｖ／Ｒ４５Ｌ／Ｇ４７Ｗ（すべてＫａｂａｔナンバリング）から選ばれる少なくとも一組のアミノ酸置換を含む、［Ａ－１８］から［Ａ－２２］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－２９］前記単ドメイン抗体は単ドメインで抗原結合活性を有するＶＬであり、前記運搬部分の前記抑制ドメインは抗体ＶＨであり、前記単ドメインで抗原結合活性を有するＶＬは、前記抗体ＶＨと会合することで抗原結合活性が抑制される、［Ａ－１８］から［Ａ－２１］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－３０］前記運搬部分はＦｃＲｎ結合領域を有する、［Ａ－１］から［Ａ－２９］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－３１］前記運搬部分は抗体定常領域を含む、［Ａ－１］から［Ａ－３０］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－３２］前記運搬部分の抗体定常領域と前記抗原結合ドメインは、リンカーを介して、またはリンカーを介さずに融合されている、［Ａ－３１］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３３］前記運搬部分は抗体重鎖定常領域を含み、当該抗体重鎖定常領域と前記抗原結合ドメインは、リンカーを介して、またはリンカーを介さずに融合されている、［Ａ－３１］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３４］前記運搬部分は抗体軽鎖定常領域を含み、当該抗体軽鎖定常領域と前記抗原結合ドメインは、リンカーを介して、またはリンカーを介さずに融合されている、［Ａ－３１］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３５］前記ポリペプチドは前記運搬部分の抗体重鎖定常領域のＮ末端と前記抗原結合ドメインのＣ末端がリンカーを介してまたはリンカーを介さずに融合されており、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインの配列中、または前記重鎖抗体定常領域の１２２番（ＥＵナンバリング）のアミノ酸より前記抗原結合ドメイン側に位置する、［Ａ－３３］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３６］前記ポリペプチドは前記運搬部分の抗体軽鎖定常領域のＮ末端と前記抗原結合ドメインのＣ末端がリンカーを介してまたはリンカーを介さずに融合されており、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインの配列中、または前記軽鎖抗体定常領域の１１３番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸より前記抗原結合ドメイン側に位置する、［Ａ－３４］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３７］前記ポリペプチドは前記運搬部分の抗体定常領域のＮ末端と前記抗原結合ドメインのＣ末端がリンカーを介してまたはリンカーを介さずに融合されており、前記抗原結合ドメインはＶＨから作製された単ドメイン抗体またはＶＨＨであり、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗体定常領域の配列中、または前記抗原結合ドメインの単ドメイン抗体の１０９番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸より前記抗体定常領域側に位置する、［Ａ－３２］から［Ａ－３５］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－３８］前記ポリペプチドは前記運搬部分の抗体定常領域のＮ末端と前記抗原結合ドメインのＣ末端がリンカーを介してまたはリンカーを介さずに融合されており、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインと前記抗体定常領域の境界付近に位置する、［Ａ－３２］に記載のポリペプチド。
［Ａ－３９］前記ポリペプチドは前記運搬部分の抗体重鎖定常領域のＮ末端と前記抗原結合ドメインのＣ末端がリンカーを介してまたはリンカーを介さずに融合されており、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインと前記抗体重鎖定常領域の境界付近に位置する、［Ａ－３３］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４０］前記ポリペプチドは前記運搬部分の抗体軽鎖定常領域のＮ末端と前記抗原結合ドメインのＣ末端がリンカーを介してまたはリンカーを介さずに融合されており、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインと前記抗体軽鎖定常領域の境界付近に位置する、［Ａ－３４］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４１］前記抗原結合ドメインはＶＨから作製された単ドメイン抗体またはＶＨＨであり、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインの単ドメイン抗体の１０９番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸と前記抗体重鎖定常領域の１２２番（ＥＵナンバリング）のアミノ酸の間に位置する、［Ａ－３９］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４２］前記抗原結合ドメインはＶＨから作製された単ドメイン抗体またはＶＨＨであり、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインの単ドメイン抗体の１０９番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸と前記抗体軽鎖定常領域の１１３番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸の間に位置する、［Ａ－４０］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４３］前記抗原結合ドメインはＶＬから作製された単ドメイン抗体であり、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインの単ドメイン抗体の１０４番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸と前記抗体重鎖定常領域の１２２番（ＥＵナンバリング）のアミノ酸の間に位置する、［Ａ－３９］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４４］前記抗原結合ドメインはＶＬから作製された単ドメイン抗体であり、前記プロテアーゼ切断配列は、前記抗原結合ドメインの単ドメイン抗体の１０９番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸と前記抗体軽鎖定常領域の１１３番（Ｋａｂａｔナンバリング）のアミノ酸の間に位置する、［Ａ－４０］に記載のポリペプチド。
［Ａ－４５］前記ポリペプチドの抗体定常領域はＩｇＧ抗体定常領域である、［Ａ－３１］から［Ａ－４４］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－４６］前記ポリペプチドはＩｇＧ抗体様分子である、［Ａ－１］から［Ａ－４５］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－４７］前記抗原結合ドメインが未遊離の状態において、ＢＬＩ（Ｂｉｏ－ＬａｙｅｒＩｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ）法（Ｏｃｔｅｔ）を用いて測定を行うとき、抗原結合ドメインと抗原の結合が見られない、［Ａ－１］から［Ａ－４６］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－４８］前記抗原結合ドメインに更に第２の抗原結合ドメインが連結されている、［Ａ－１］から［Ａ－４７］のいずれか一つに記載のポリペプチド。
［Ａ－４９］前記第２の抗原結合ドメインは、前記抗原結合ドメインと異なる抗原結合特異性を有する、［Ａ－４８］に記載のポリペプチド。
［Ａ－５０］前記第２の抗原結合ドメインは第２の単ドメイン抗体を含む、［Ａ－４８］または［Ａ－４９］に記載のポリペプチド。
【０００９】
［Ｂ－１］［２７］に記載のポリペプチドであって、当該ポリペプチドはリガンドに結合可能なリガンド結合分子であり、前記プロテアーゼ切断配列が切断された状態における当該リガンド結合分子のリガンドに対する結合が、前記プロテアーゼ切断配列が未切断の状態における当該リガンド結合分子のリガンドに対する結合より弱い、リガンド結合分子。
［Ｂ－２］前記プロテアーゼ切断配列が切断された状態では、前記リガンドが前記リガンド結合分子から遊離する、［Ｂ－１］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－３］前記プロテアーゼは、マトリプターゼおよび／またはウロキナーゼである、［Ｂ－１］から［Ｂ－２］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－４］前記プロテアーゼは、ヒトＭＴ－ＳＰ１、マウスＭＴ－ＳＰ１、ヒトｕＰＡ、マウスｕＰＡから選ばれる少なくとも一種類のプロテアーゼである、［Ｂ－１］から［Ｂ－３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－５］前記プロテアーゼ切断配列の一端に、第一可動リンカーが更に付加されている、［Ｂ－１］から［Ｂ－４］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－６］前記第一可動リンカーは、グリシン－セリンポリマーからなる可動リンカーである、［Ｂ－５］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－７］前記プロテアーゼ切断配列の他端に、第二可動リンカーが更に付加されている、［Ｂ－５］または［Ｂ－６］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－８］前記第二可動リンカーは、グリシン－セリンポリマーからなる可動リンカーである、［Ｂ－７］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－９］前記リガンド結合分子は抗体ＶＨと、抗体ＶＬと、抗体定常領域を含む、［Ｂ－１］から［Ｂ－８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１０］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、前記抗体定常領域内に位置する、［Ｂ－９］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１１］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、抗体重鎖定常領域１１８番アミノ酸（ＥＵナンバリング）から抗体重鎖定常領域１４０番アミノ酸（ＥＵナンバリング）までの配列中の任意の位置に導入される、［Ｂ－１０］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１２］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、抗体軽鎖定常領域１０８番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から抗体軽鎖定常領域１３１番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列中の任意の位置に導入される、［Ｂ－１０］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１３］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、前記抗体ＶＨ内もしくは前記抗体ＶＬ内に位置する、［Ｂ－９］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１４］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、抗体ＶＨ７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１６番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、４０番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から４７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、５５番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から６９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、７３番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から７９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、８３番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から８９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、９５番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から９９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、および１０１番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１１３番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までからなる群より選択される配列中の任意位置に導入される、［Ｂ－１３］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１５］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、抗体ＶＬ７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、３９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から４６番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、４９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から６２番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）まで、および９６番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１０７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までからなる群より選択される配列中の任意位置に導入される、［Ｂ－１３］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１６］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、前記抗体定常領域と前記抗体ＶＨの境界付近、および／または前記抗体定常領域と前記抗体ＶＬとの境界付近に位置する、［Ｂ－９］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１７］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、抗体ＶＨ１０９番のアミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から抗体重鎖定常領域１２２番のアミノ酸（ＥＵナンバリング）までの配列中の任意位置に導入される、［Ｂ－１７］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１８］前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、抗体ＶＬ１０４番のアミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から抗体軽鎖定常領域１１３番のアミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列中の任意位置に導入される、［Ｂ－１６］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－１９］前記リガンド結合分子中の前記抗体ＶＬと前記抗体ＶＨは会合しており、当該会合は前記プロテアーゼ切断配列がプロテアーゼで切断されることにより解消される、［Ｂ－９］から［Ｂ－１８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２０］前記リガンドは生物活性を有する分子であり、前記リガンド結合分子は前記リガンドとの結合で前記リガンドの生物活性を阻害する、［Ｂ－１］から［Ｂ－１９］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２１］前記リガンドはサイトカインまたはケモカインである、［Ｂ－１］から［Ｂ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２２］前記リガンドは、インターロイキン、インターフェロン、造血因子、ＴＮＦスーパーファミリー、ケモカイン、細胞増殖因子、及びＴＧＦ－βファミリーから選ばれるリガンドである、［Ｂ－１］から［Ｂ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２３］前記リガンド結合分子はＩｇＧ抗体である、［Ｂ－１］から［Ｂ－２２］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２４］前記リガンドと結合している［Ｂ－１］から［Ｂ－２３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２５］前記リガンドと融合されている［Ｂ－１］から［Ｂ－２３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２６］前記リガンド結合分子がリガンドと融合されている状態では更に別のリガンドと結合しない、［Ｂ－２５］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２７］前記リガンド結合分子は、リンカーを介して前記リガンドと融合されている、［Ｂ－２５］または［Ｂ－２６］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２８］前記リンカーはプロテアーゼ切断配列を含まない、［Ｂ－２７］に記載のリガンド結合分子。
［Ｂ－２９］前記リガンドと、前記リガンドと結合している［Ｂ－１］から［Ｂ－２３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子とで形成されている複合体。
［Ｂ－３０］前記リガンドと［Ｂ－１］から［Ｂ－２３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子が融合されている融合タンパク質。
［Ｂ－３１］前記リガンド結合分子がリガンドと融合されている状態では更に別のリガンドと結合しない、［Ｂ－３０］に記載の融合タンパク質。
［Ｂ－３２］前記リガンド結合分子は、リンカーを介して前記リガンドと融合されている、［Ｂ－３０］または［Ｂ－３１］に記載の融合タンパク質。
［Ｂ－３３］前記リンカーはプロテアーゼ切断配列を含まない、［Ｂ－３２］に記載の融合タンパク質。
［Ｂ－３４］前記リンカーは、グリシン‐セリンポリマーからなるリンカーである、［Ｂ－３２］または［Ｂ－３３］に記載の融合タンパク質。
［Ｂ－３５］［Ｂ－１］から［Ｂ－２８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子を含む、医薬組成物。
［Ｂ－３６］［Ｂ－１］から［Ｂ－２４］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子とリガンドを含む、医薬組成物。
［Ｂ－３７］［Ｂ－２９］に記載の複合体を含む、医薬組成物。
［Ｂ－３８］［Ｂ－３０］から［Ｂ－３４］のいずれか一つに記載の融合タンパク質を含む、医薬組成物。
［Ｂ－３９］［Ｂ－１］から［Ｂ－２８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｂ－４０］リガンドに結合可能な分子中に、プロテアーゼ切断配列を導入することを含む、［Ｂ－３９］に記載の製造方法。
［Ｂ－４１］プロテアーゼ切断配列を有するリガンド結合分子とそのリガンドを融合させることを含む、［Ｂ－３０］から［Ｂ－３４］のいずれか一つに記載の融合タンパク質の製造方法。
［Ｂ－４２］［Ｂ－１］から［Ｂ－２８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子をコードするポリヌクレオチド。
［Ｂ－４３］［Ｂ－４２］に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［Ｂ－４４］［Ｂ－４２］に記載のポリヌクレオチドもしくは［Ｂ－４３］に記載のベクターを含む宿主細胞。
［Ｂ－４５］［Ｂ－４４］に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、［Ｂ－１］から［Ｂ－２８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｂ－４６］ポリペプチドを培養上清から単離する工程を含む、［Ｂ－４５］に記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｂ－４７］［Ｂ－３０］から［Ｂ－３４］のいずれか一つに記載の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。
［Ｂ－４８］［Ｂ－４６］に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［Ｂ－４９］［Ｂ－４６］に記載のポリヌクレオチドもしくは［Ｂ－４８］に記載のベクターを含む宿主細胞。
［Ｂ－５０］［Ｂ－４９］に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、［Ｂ－３０］から［Ｂ－３４］のいずれか一つに記載の融合タンパク質を製造する方法。
【００１０】
［Ｃ－１］［２７］に記載のポリペプチドであって、当該ポリペプチドはリガンドに結合可能なリガンド結合分子であり、当該リガンド結合分子は単ドメイン抗体を含み、当該単ドメイン抗体はリガンドに結合可能であり且つ少なくとも一つの前記プロテアーゼ切断配列が導入されており、当該プロテアーゼ切断配列が切断された状態での当該リガンド結合分子の前記リガンドに対する結合が、当該プロテアーゼ切断配列が未切断の状態での当該リガンド結合分子の前記リガンドに対する結合より減弱される、リガンド結合分子。
［Ｃ－２］前記プロテアーゼ切断配列が切断された状態では、前記リガンドがリガンド結合分子から遊離する、［Ｃ－１］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－３］前記プロテアーゼは、マトリプターゼおよび／またはウロキナーゼである、［Ｃ－１］または［Ｃ－２］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－４］前記プロテアーゼは、ヒトＭＴ－ＳＰ１、マウスＭＴ－ＳＰ１、ヒトｕＰＡ、マウスｕＰＡから選ばれる少なくとも一種類のプロテアーゼである、［Ｃ－１］から［Ｃ－３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－５］前記プロテアーゼ切断配列の一端に、第一可動リンカーが更に付加されている、［Ｃ－１］から［Ｃ－４］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－６］前記第一可動リンカーは、グリシン－セリンポリマーからなる可動リンカーである、［Ｃ－５］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－７］前記プロテアーゼ切断配列の他端に、第二可動リンカーが更に付加されている、［Ｃ－５］また［Ｃ－６］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－８］前記第二可動リンカーは、グリシン－セリンポリマーからなる可動リンカーである、［Ｃ－７］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－９］前記単ドメイン抗体はＶＨＨ、または単ドメインＶＨ抗体、また単ドメインＶＬ抗体である、［Ｃ－１］から［Ｃ－８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１０］前記単ドメイン抗体はＶＨＨまたは単ドメインＶＨ抗体であり、前記切断サイト、または前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、前記単ドメイン抗体の下記配列から選ばれる一つまたは複数の配列に含まれる一つまたは複数の位置に導入される、［Ｃ－９］に記載のリガンド結合分子：単ドメイン抗体７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体１２番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体３１番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から３５ｂ番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体４０番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から４７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体５０番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から６５番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体５５番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から６９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体７３番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から７９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体８３番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から８９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体９５番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から９９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体９５番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１０２番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体１０１番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１１３番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列。
［Ｃ－１１］前記単ドメイン抗体は単ドメインＶＬ抗体であり、前記切断サイト、または前記プロテアーゼ切断配列、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカー、またはプロテアーゼ切断配列と第一可動リンカーと第二可動リンカーは、前記単ドメイン抗体の下記配列から選ばれる一つまたは複数の配列に含まれる一つまたは複数の位置に導入される、［Ｃ－９］に記載のリガンド結合分子：単ドメイン抗体７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体２４番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から３４番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体３９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から４６番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体４９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から６２番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体５０番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から５６番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体８９番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から９７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列、単ドメイン抗体９６番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）から１０７番アミノ酸（Ｋａｂａｔナンバリング）までの配列。
［Ｃ－１２］前記リガンドは生物活性を有する分子であり、前記単ドメイン抗体は前記リガンドと結合することで前記リガンドの生物活性を阻害する、［Ｃ－１］から［Ｃ－１１］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１３］前記リガンドは生物活性を有する分子であり、前記単ドメイン抗体は前記リガンドに対する中和活性を有する、［Ｃ－１］から［Ｃ－１２］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１４］前記リガンド結合分子は、前記切断サイトまたはプロテアーゼ切断配列を含む単ドメイン抗体のみを含む、［Ｃ－１］から［Ｃ－１３］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１５］前記リガンド結合分子は更に抗体Ｆｃ領域を含む、［Ｃ－１］から［Ｃ－１４］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１６］前記リガンド結合分子はＮ末端からＣ末端に向かって単ドメイン抗体－抗体Ｆｃ領域からなる一連のペプチド鎖を含む、［Ｃ－１］から［Ｃ－１５］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１７］前記リガンド結合分子は、単ドメイン抗体－抗体ヒンジ領域－抗体Ｆｃ領域からなる一連のペプチド鎖を二つ含む二量体である、［Ｃ－１］から［Ｃ－１５］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１８］前記抗体Ｆｃ領域は、配列番号：１８００４～１８００７で示されるアミノ酸配列から選ばれる一つの配列を含むＦｃ領域、またはこれらのＦｃ領域に改変を加えたＦｃ領域変異体である、［Ｃ－１５］から［Ｃ－１７］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－１９］前記リガンドはサイトカインまたはケモカインである、［Ｃ－１］から［Ｃ－１８］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２０］前記リガンドは、インターロイキン、インターフェロン、造血因子、ＴＮＦスーパーファミリー、ケモカイン、細胞増殖因子、及びＴＧＦ－βファミリーから選ばれるリガンドである、［Ｃ－１］から［Ｃ－１９］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２１］前記リガンドと結合している、［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２２］前記リガンドと融合されている、［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２３］前記リガンド結合分子がリガンドと融合されている状態では、当該リガンド結合分子に含まれる単ドメイン抗体は更に別のリガンドと結合しない、［Ｃ－２２］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２４］前記リガンド結合分子は、リンカーを介して前記リガンドと融合されている、［Ｃ－２２］または［Ｃ－２３］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２５］前記リンカーはプロテアーゼ切断配列を含まない、［Ｃ－２４］に記載のリガンド結合分子。
［Ｃ－２６］前記リガンドと、［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子とで形成されている複合体。
［Ｃ－２７］前記リガンドと［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子が融合されている融合タンパク質。
［Ｃ－２８］前記リガンド結合分子がリガンドと融合されている状態では、前記単ドメイン抗体は更に別のリガンドと結合しない、［Ｃ－２７］に記載の融合タンパク質。
［Ｃ－２９］前記リガンド結合分子は、リンカーを介して前記リガンドと融合されている、［Ｃ－２７］または［Ｃ－２８］に記載の融合タンパク質。
［Ｃ－３０］前記リンカーはプロテアーゼ切断配列を含まない、［Ｃ－２９］に記載の融合タンパク質。
［Ｃ－３１］Ｎ末端からＣ末端に向かってリガンド－リンカー－リガンド結合分子の順で融合されている、［Ｃ－２９］または［Ｃ－３０］に記載の融合タンパク質。
［Ｃ－３２］［Ｃ－１］から［Ｃ－２２］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子を含む、医薬組成物。
［Ｃ－３３］［Ｃ－１］から［Ｃ－２１］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子とリガンドを含む、医薬組成物。
［Ｃ－３４］［Ｃ－２６］に記載の複合体を含む、医薬組成物。
［Ｃ－３５］［Ｃ－２７］から［Ｃ－３１］のいずれか一つに記載の融合タンパク質を含む、医薬組成物。
［Ｃ－３６］［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｃ－３７］単ドメイン抗体を含むリガンド結合分子中の単ドメイン抗体に、プロテアーゼ切断配列を導入することを含む、［Ｃ－３６］に記載の製造方法。
［Ｃ－３８］プロテアーゼ切断配列が導入された単ドメイン抗体含有リガンド結合分子と、当該単ドメイン抗体と結合可能なリガンドを融合させることを含む、［Ｃ－２７］から［Ｃ－３１］のいずれか一つに記載の融合タンパク質の製造方法。
［Ｃ－３９］［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子をコードするポリヌクレオチド。
［Ｃ－４０］［Ｃ－３９］に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［Ｃ－４１］［Ｃ－３９］に記載のポリヌクレオチドもしくは［Ｃ－４０］に記載のベクターを含む宿主細胞。
［Ｃ－４２］［Ｃ－４１］に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、［Ｃ－１］から［Ｃ－２０］のいずれか一つに記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｃ－４３］ポリペプチドを培養上清から単離する工程を含む、［Ｃ－４２］に記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｃ－４４］［Ｃ－２７］から［Ｃ－３１］のいずれか一つに記載の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。
［Ｃ－４５］［Ｃ－４３］に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［Ｃ－４６］［Ｃ－４３］に記載のポリヌクレオチドもしくは［Ｃ－４５］に記載のベクターを含む宿主細胞。
［Ｃ－４７］［Ｃ－４６］に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、［Ｃ－２７］から［Ｃ－３１］のいずれか一つに記載の融合タンパク質を製造する方法。
［Ｃ－４８］ポリペプチドを培養上清から単離する工程を含む、［Ｃ－４７］に記載のリガンド結合分子を製造する方法。
［Ｃ－４９］リガンドに結合可能なリガンド結合分子中の単ドメイン抗体に含まれる、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列から選ばれる少なくとも一つの配列を有する部位がプロテアーゼによって切断されることを含む、前記リガンド結合分子に結合した前記リガンドを遊離させる方法。
［Ｃ－５０］リガンドに結合可能なリガンド結合分子中の単ドメイン抗体に含まれる、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１５番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端４番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１７２０１から選ばれる配列のＮ末端６番目のアミノ酸から１３番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端１番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１１番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７２０２～１７９９３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端３番目のアミノ酸から１４番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１２番目のアミノ酸までの配列、配列番号：１７９９４～１８００３から選ばれる配列のＮ末端５番目のアミノ酸から１０番目のアミノ酸までの配列、配列番号：５～１８００３のいずれかで示される配列から選ばれる少なくとも一つの配列を有する部位がプロテアーゼによって切断されることを含む、前記リガンドと前記リガンド結合分子の融合タンパク質からリガンドを遊離させる方法。
【図面の簡単な説明】
（【００１１】以降は省略されています）

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