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公開番号2025133742
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-09-11
出願番号2025092310,2023136370
出願日2025-06-03,2009-11-10
発明の名称治療薬を送達するための新規な脂質及び組成物
出願人アルブータス・バイオファーマー・コーポレイション
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類C07C 229/12 20060101AFI20250904BHJP(有機化学)
要約【課題】核酸を高効率で封入化し、高い薬物:脂質比率を有し、血清中での分解及びクリアランスから封入化核酸を保護し、全身性送達に好適であり、封入化核酸の細胞内の送達を可能にする好適な脂質-治療用核酸組成物の提供。
【解決手段】脂質、又はその塩若しくは異性体。
<com:Image com:imageContentCategory="Drawing"> <com:ImageFormatCategory>JPEG</com:ImageFormatCategory> <com:FileName>2025133742000078.jpg</com:FileName> <com:HeightMeasure com:measureUnitCode="Mm">25</com:HeightMeasure> <com:WidthMeasure com:measureUnitCode="Mm">170</com:WidthMeasure> </com:Image> 式中、
R₁及びR₂は、各存在において各々独立して、C₁₀～C₂₀アルケニルであり、
R₃は、ω-アミノアルキル、ω-(置換)アミノアルキル又はω-チオホスホアルキルであり、
Eは、C(O)Oであり、
但し、R₃が2-(ジメチルアミノ)エチルである場合は、R₁及びR₂はそれぞれリノレイルではない。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
下記構造を有し、
JPEG
2025133742000076.jpg
34
170
式中、
Ｒ
１
及びＲ
２
は、各存在において各々独立して、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アルキル、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アルケニル、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アルキニル、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アシル、又は－リンカー－リガンドであり、
Ｒ
３
は、Ｈ、随意に置換されたＣ
１
～Ｃ
１０
アルキル、随意に置換されたＣ
２
～Ｃ
１０
アルケニル、随意に置換されたＣ
２
～Ｃ
１０
アルキニル、アルキルヘトロ環、アルキルホスフェート、アルキルホスホロチオアート、アルキルホスホロジチオアート、アルキルホスホネート、アルキルアミン、ヒドロキシアルキル、ω－アミノアルキル、ω－（置換）アミノアルキル、ω－ホスホアルキル、ω－チオホスホアルキル、随意に置換されたポリエチレングリコール（ＰＥＧ、分子量：１００～４０Ｋ）、随意に置換されたｍＰＥＧ（分子量：１２０～４０Ｋ）、へテロアリール、ヘテロ環、又はリンカー－リガンドであり、及び
Ｅは、Ｃ（Ｏ）Ｏ又はＯＣ（Ｏ）である、脂質、又はその塩若しくは異性体。
続きを表示（約 1,300 文字）【請求項２】
下記構造を有し、
JPEG
2025133742000077.jpg
36
170
式中、
Ｅは、Ｃ（Ｏ）Ｏ又はＯＣ（Ｏ）であり、
Ｒ
１
及びＲ
２
及びＲ
ｘ
は、各存在において各々独立して、Ｈ、随意に置換されたＣ
１
～Ｃ
１０
アルキル、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アルキル、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アルケニル、随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アルキニル、又は随意に置換されたＣ
１０
～Ｃ
３０
アシル、又はリンカー－リガンドであり、ただしＲ
１
、Ｒ
２
、及びＲ
ｘ
の少なくとも１つはＨではなく、
Ｒ
３
は、Ｈ、随意に置換されたＣ
１
～Ｃ
１０
アルキル、随意に置換されたＣ
２
～Ｃ
１０
アルケニル、随意に置換されたＣ
２
～Ｃ
１０
アルキニル、アルキルヘトロ環、アルキルホスフェート、アルキルホスホロチオアート、アルキルホスホロジチオアート、アルキルホスホネート、アルキルアミン、ヒドロキシアルキル、ω－アミノアルキル、ω－（置換）アミノアルキル、ω－ホスホアルキル、ω－チオホスホアルキル、随意に置換されたポリエチレングリコール（ＰＥＧ、分子量：１００～４０Ｋ）、随意に置換されたｍＰＥＧ（分子量：１２０～４０Ｋ）、へテロアリール、ヘテロ環、又はリンカー－リガンドであり、
ｎは、０、１、２、又は３である、脂質、又はその塩若しくは異性体。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の脂質を含む脂質粒子。
【請求項４】
請求項２に記載の脂質を含む、請求項３に記載の脂質粒子。
【請求項５】
前記脂質粒子が、中性脂質、及び凝集を低減することが可能な脂質をさらに含む、請求項３に記載の脂質粒子。
【請求項６】
前記脂質粒子が、
ａ．請求項１又は２に記載の脂質と、
ｂ．ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＯＰＥ、及びＳＭから選択される中性脂質と、ｃ．ステロールと
ｄ．ＰＥＧ－ＤＭＧとから本質的になり、
モル比が、約２０～６０％脂質：５～２５％中性脂質：２５～５５％ステロール：０．５～１５％ＰＥＧ－ＤＭＧ又はＰＥＧ－ＤＭＡである、請求項５に記載の脂質粒子。
【請求項７】
治療薬をさらに含む、請求項３に記載の脂質粒子。
【請求項８】
前記治療薬が核酸である、請求項７に記載の脂質粒子。
【請求項９】
前記核酸がプラスミドである、請求項８に記載の脂質粒子。
【請求項１０】
前記核酸が、免疫賦活化オリゴヌクレオチドである、請求項８に記載の脂質粒子。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
政府支援
本明細書に記載されている研究は、少なくとも部分的には、国立アレルギー感染症研究所により授与されたグラント番号ＨＨＳＮ２６６２００６０００１２Ｃに基づく米国政府からの資金を使用して行われた。したがって、米国政府は、本発明に一定の権利を有し得る。
続きを表示（約 3,600 文字）【０００２】
優先権の主張
本出願は、２００８年１１月１０日に出願された、米国特許出願第６１／１１３，１７９号、２００９年２月２０日に出願された米国特許出願第６１／１５４，３５０号、２００９年４月２１日に出願された米国特許出願第６１／１７１，４３９号、２００９年６月９日に出願された米国特許出願第６１／１８５，４３８号、２００９年７月１５日に出願された米国特許出願第６１／２２５，８９８号、及び２００９年８月１４日に出願された米国特許出願第６１／２３４，０９８号に対する優先権を主張するものであり、これらの各々の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
本発明は、脂質粒子を使用した治療薬送達の分野に関する。具体的には、本発明は、核酸のインビボ送達のために、並びにインビボ治療使用に好適な核酸－脂質粒子組成物のために有利である脂質を含む陽イオン性脂質及び脂質粒子を提供する。加えて、本発明は、これらの組成物を製作する方法、並びに例えば種々の疾患状態を治療するためにこれらの組成物を使用して核酸を細胞に導入する方法を提供する。
【背景技術】
【０００４】
関連技術の説明
治療用核酸には、例えば、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、プラスミド、免疫刺激核酸、アンチセンス、アンタゴｍｉｒ（ａｎｔａｇｏｍｉｒ）、抗ｍｉｒ（ａｎｔｉｍｉｒ）、マイクロＲＮＡ模倣体、スーパーｍｉｒ（ｓｕｐｅｒｍｉｒ）、Ｕ１アダプター、及びアプタマーが含まれる。これらの核酸は、様々な機序により作用する。ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡの場合、これらの核酸は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）と名付けられたプロセスにより、特定タンパク質の細胞内レベルを下方制御することができる。ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡが細胞質に導入された後、これらの二本鎖ＲＮＡ構築体は、ＲＩＳＣと名付けられたタンパク質に結合することができる。ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡのセンスＤＮＡは、ＲＩＳＣ複合体から解離し、結合ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡの配列に相補的な配列を有するｍＲＮＡを認識及び結合することができるテンプレートをＲＩＳＣ内に提供する。相補的ｍＲＮＡが結合すると、ＲＩＳＣ複合体は、そのｍＲＮＡを切断し、切断された鎖を放出する。ＲＮＡｉは、タンパク質合成をコードする対応するｍＲＮＡの特異的破壊を標的とすることにより、特定タンパク質の下方制御を提供することができる。
【０００５】
ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡ構築体は、標的タンパク質に対する任意のヌクレオチド配列を用いて合成することができるため、ＲＮＡｉの治療用途は非常に広範である。現在まで、ｓｉＲＮＡ構築体は、インビトロ及びインビボモデルの両方において、標的タンパク質を特異的に下方制御する能力を示している。加えて、ｓｉＲＮＡ構築体は、臨床研究で現在評価中である。
【０００６】
しかしながら、ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡ構築体が現在直面している２つの問題は、第１には、それらが血漿中でのヌクレアーゼ消化に対して感受性であること、第２には、遊離ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡとして全身性に投与される場合、それらがＲＩＳＣに結合することができる細胞内区画への接近を得る能力に制限があることである。化学的に修飾されたヌクレオチドリンカー、例えばホスホチオアート基を分子内に組み込むことにより、これらの二本鎖構築体を安定化することができる。しかしながら、これらの化学的修飾は、ヌクレアーゼ消化からの限定的な保護を提供するに過ぎず、構築体の活性を減少させる場合がある。ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡの細胞内送達は、ポリマー、陽イオン性リポソームなどの担体系を使用することにより、又は構築体を化学的に修飾することにより、例えばコレステロール分子を共有結合で結合させることにより促進することができる。しかしながら、改良された送達系には、ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡ分子の効力を増加させ、化学的修飾の必要性を低減又は排除することが必要とされている。
【０００７】
アンチセンスオリゴヌクレオチド及びリボザイムは、ｍＲＮＡがタンパク質に翻訳されることを阻害することもできる。アンチセンス構築体の場合、これらの一本鎖デオキシ核酸は、標的タンパク質ｍＲＮＡの配列に相補的な配列を有しており、ワトソン‐クリック型塩基対によりｍＲＮＡに結合することができる。この結合は、標的ｍＲＮＡの翻訳を防止するか、及び／又はｍＲＮＡ転写物のＲＮａｓｅＨ消化を誘発するかのいずれかである。結果的に、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、作用特異性（つまり、特定の疾患関連タンパク質の下方制御）に非常に大きな可能性を有する。現在まで、これらの化合物は、炎症性疾患、癌、及びＨＩＶのモデルを含む幾つかのインビトロ及びインビボモデルにおいて将来性を示している（Ａｇｒａｗａｌ，ＴｒｅｎｄｓｉｎＢｉｏｔｅｃｈ．１４：３７６－８７（１９９６）に概説されている）。アンチセンスは、染色体ＤＮＡと特異的にハイブリダイズすることにより細胞活動に影響を与えることもできる。幾つかのアンチセンス薬物の先端的ヒト臨床評価が、現在進行中である。これらの薬物の標的には、ｂｃｌ２及びアポリポタンパク質Ｂ遺伝子並びにｍＲＮＡ産物が含まれる。
【０００８】
免疫刺激核酸には、デオキシリボ核酸及びリボ核酸が含まれる。デオキシリボ核酸の場合、特定の配列又はモチーフは、哺乳動物中で不正な免疫刺激を示す。これらの配列又はモチーフには、ＣｐＧモチーフ、ピリミジンに富む配列、及びパリンドローム配列が含まれる。デオキシリボ核酸中のＣｐＧモチーフは、エンドソーム受容体、トール様受容体９（ＴＬＲ－９）により特異的に認識され、その後それにより先天性及び後天性の免疫刺激経路が両方とも誘発されると考えられている。特定の免疫刺激リボ核酸配列も報告されている。これらのＲＮＡ配列は、トール様受容体６及び７（ＴＬＲ－６及びＴＬＲ－７）に結合することにより、免疫活性化を誘発すると考えられている。加えて、二本鎖ＲＮＡは、免疫刺激性であることも報告されており、ＴＬＲ－３に結合することにより活性化すると考えられている。
【０００９】
治療用核酸の使用に関する１つの周知の問題は、リン酸ジエステルヌクレオチド間結合の安定性、及びこのリンカーのヌクレアーゼに対する感受性に関する。血清中にエキソヌクレアーゼ及びエンドヌクレアーゼが存在すると、リン酸ジエステルリンカーを有する核酸の迅速な消化がもたらされ、したがって、治療用核酸は、血清の存在下又は細胞内で非常に短い半減期を示す場合がある。（Ｚｅｌｐｈａｔｉ，Ｏ．，ｅｔａｌ．，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ．Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．３：３２３－３３８（１９９３）；及びＴｈｉｅｒｒｙ，Ａ．Ｒ．，ｅｔａｌ．，ｐｐ１４７－１６１ｉｎＧｅｎｅＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ：ＢｉｏｌｏｇｙｏｆＡｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡａｎｄＤＮＡ（Ｅｄｓ．Ｅｒｉｃｋｓｏｎ，ＲＰａｎｄＩｚａｎｔ，ＪＧ；ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ，ＮＹ（１９９２））。現在開発中の治療用核酸は、これら及び他の既知の問題のため、天然核酸に見出される基本的リン酸ジエステル化学を使用しない。
【００１０】
この問題は、血清又は細胞内消化を低減する化学的修飾により部分的に克服されている。ヌクレオチド間リン酸ジエステル結合における修飾（例えば、ホスホロチオアート、メチルホスホネート、又はホスホルアミダート結合を使用して）、ヌクレオチド塩基における修飾（例えば、５－プロピニル－ピリミジン）、又は糖における修飾（例えば、２’修飾糖）が試験されている（ＵｈｌｍａｎｎＥ．，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：ＣｈｅｍｉｃａｌＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ．ＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＣａｎｃｅｒ，Ｖｏｌ．Ｘ．，ｐｐ６４－８１ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓＩｎｃ．（１９９７））。他には、２’－５’糖結合を使用して安定性を向上させる試みがなされている（例えば米国特許第５，５３２，１３０号を参照）。他の変更が試みられている。しかしながら、これらの解決策はいずれも、完全に満足のいくものではないことが判明しており、インビボ遊離治療用核酸は、依然として効力が限定的である。
（【００１１】以降は省略されています）

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