特許ウォッチ

公開番号2025036503
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-03-14
出願番号2024227131,2022098923
出願日2024-12-24,2015-01-09
発明の名称第VIII因子キメラタンパク質及びその使用
出願人バイオベラティブセラピューティクスインコーポレイテッド
代理人個人,個人
主分類C07K 19/00 20060101AFI20250306BHJP(有機化学)
要約【課題】あまり頻繁ではない投与で済む第VIII因子(FVIII)製剤、すなわち、半減期の限界の1.5～2倍より長い半減期を有するFVIII製剤を提供する。
【解決手段】本発明は、(i)第1の免疫グロブリン(Ig)定常領域またはその一部に融合されたFVIIIを含む第1のポリペプチドと(ii)中間のXTEN配列によって第2のIg定常領域またはその一部に融合されたフォンウィルブランド因子(VWF)のD’ドメイン及びD3ドメインを含むVWFタンパク質を含む第2のポリペプチドとを含むキメラタンパク質を提供し、XTEN配列は288未満のアミノ酸残基を含有し、第1のポリペプチドは第2のポリペプチドに連結されるまたは会合する。特定の実施形態には、本明細書で記載されるようなキメラタンパク質が含まれ、第2のポリペプチドにおけるXTEN配列は12～287アミノ酸の間の長さを有するアミノ酸配列から成る。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
明細書に記載の発明。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
電子的に提出された配列表への言及
ＡＳＣＩＩテキストファイルにて電子的に提出された配列表（名称：２１５９＿４４１ＰＣ０２＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイズ：８２３，５００バイト；作成日：２０１５年１月９日）の内容はその全体が参照によって本明細書に組み入れられる。
続きを表示（約 3,400 文字）【背景技術】
【０００２】
血友病Ａは第ＶＩＩＩ凝固因子（ＦＶＩＩＩ）をコードする遺伝子の欠損が原因で生じる出血性疾患であり、男児出生１０，０００人に１～２人が発症する。Ｇｒａｗら，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．６（６）：４８８－５０１（２００５）．血友病Ａに罹った患者は精製したＦＶＩＩＩまたは組換えで製造されたＦＶＩＩＩの点滴によって治療することができる。しかしながら、市販のＦＶＩＩＩ製剤はすべて約８～１２時間の半減期を有することが知られており、患者への頻繁な静脈内投与を必要とする。Ｗｅｉｎｅｒ，Ｍ．Ａ．及びＣａｉｒｏ，Ｍ．Ｓ．，ＰｅｄｉａｔｒｉｃＨｅｍａｔｏｌｏｇｙＳｅｃｒｅｔｓ，Ｌｅｅ，Ｍ．Ｔ．，１２．ＤｉｓｏｒｄｅｒｓｏｆＣｏａｇｕｌａｔｉｏｎ，ＥｌｓｅｖｉｅｒＨｅａｌｔｈＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００１；Ｌｉｌｌｉｃｒａｐ，Ｄ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．１２２，Ｓｕｐｐｌ．４：Ｓ２－８（２００８）を参照のこと。加えて、ＦＶＩＩＩの半減期を延長するために多数のアプローチが試みられている。たとえば、凝固因子の半減期を延長するための開発におけるアプローチには、ＰＥＧ化、糖ＰＥＧ化、及びアルブミンによる抱合が含まれる。Ｄｕｍｏｎｔら，Ｂｌｏｏｄ．１１９（１３）：３０２４－３０３０（２０１２年１月１３日オンラインで公開）を参照のこと。しかしながら、使用されたタンパク質工学にかかわらず、現在開発中の長時間作用型のＦＶＩＩＩ製剤は前臨床動物モデルにてたった約１．５～２時間の限定された半減期を有するにすぎないことが報告されている。上記を参照のこと。一貫した結果はヒトで実証されており、たとえば、ｒＦＶＩＩＩＦｃは血友病Ａの患者にてアドベイト（登録商標）と比べて約１．７倍まで半減期を改善することが報告された。上記参照。したがって、半減期の上昇は、軽微な改善にもかかわらず、他のＴ１／２律速因子の存在を示し得る。Ｌｉｕ，Ｔ．ら，２００７，ＩＳＴＨｍｅｅｔｉｎｇ，ａｂｓｔｒａｃｔ＃Ｐ－Ｍ－０３５；Ｈｅｎｒｉｋ，Ａ．ら，２０１１，ＩＳＴＨｍｅｅｔｉｎｇ，ａｂｓｔｒａｃｔ＃Ｐ＝ＭＯ－１８１；Ｌｉｕ，Ｔら，２０１１，ＩＳＴＨｍｅｅｔｉｎｇａｂｓｔｒａｃｔ＃Ｐ－ＷＥ－１３１を参照のこと。
【０００３】
血漿のフォンウィルブランド因子（ＶＷＦ）はおよそ１６時間（１３～１８時間の範囲）の半減期を有する。Ｇｏｕｄｅｍａｎｄ，Ｊら，Ｊ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．２００５；３：２２１９－２７。ＶＷＦの半減期は、多数の因子：ＶＷＦにおけるグリコシル化のパターン、ＡＤＡＭＴＳ－１３（トロンボスポンジンモチーフを伴ったジスインテグリンとメタロプロテアーゼ－１３）、及び種々の突然変異によって影響を受け得る
【０００４】
血漿では、ＦＶＩＩＩの９５～９８％が完全長のＶＷＦとの堅い非共有結合の複合体で循環している。この複合体の形成は生体内でのＦＶＩＩＩの適当な血漿レベルの維持にとって重要である。Ｌｅｎｔｉｎｇら，Ｂｌｏｏｄ．９２（１１）：３９８３－９６（１９９８）；Ｌｅｎｔｉｎｇら，Ｊ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．５（７）：１３５３－６０（２００７）。完全長の野生型ＦＶＩＩＩは大部分が、重鎖（ＭＷ２００ｋＤ）と軽鎖（ＭＷ７３ｋＤ）を有するヘテロ二量体として存在する。重鎖の３７２位と７４０位及び軽鎖の１６８９位でのタンパク質分解によりＦＶＩＩＩが活性化されると、ＦＶＩＩＩに結合されたＶＷＦが活性化されたＦＶＩＩＩから取り外される。活性化されたＦＶ
ＩＩＩは活性化された第ＩＸ因子、カルシウム及びリン脂質と一緒に（「テナーゼ複合体」）第Ｘ因子の活性化を誘導し、大量のトロンビンを生成する。次いでトロンビンは次にフィブリノーゲンを切断して可溶性のフィブリン単量体を形成し、次いでそれは自然に重合して可溶性のフィブリンポリマーを形成する。トロンビンはまた第ＸＩＩＩ因子も活性化し、それはカルシウムと一緒に可溶性のフィブリンポリマーを架橋し、安定化するのに役立ち、架橋された（不溶性の）フィブリンを形成する。活性化されたＦＶＩＩＩはタンパク質分解によって循環から速やかにクリアランスされる。
頻繁な投与と投与スケジュールが原因で生じる不都合さとに起因して、あまり頻繁ではない投与で済むＦＶＩＩＩ製剤、すなわち、半減期の限界の１．５～２倍より長い半減期を有するＦＶＩＩＩ製剤を開発するニーズが依然として存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
Ｇｒａｗら，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．６（６）：４８８－５０１（２００５）
Ｄｕｍｏｎｔら，Ｂｌｏｏｄ．１１９（１３）：３０２４－３０３０
Ｇｏｕｄｅｍａｎｄ，Ｊら，Ｊ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．２００５；３：２２１９－２７
Ｌｅｎｔｉｎｇら，Ｂｌｏｏｄ．９２（１１）：３９８３－９６（１９９８）
Ｌｅｎｔｉｎｇら，Ｊ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．５（７）：１３５３－６０（２００７）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、（ｉ）第１の免疫グロブリン（「Ｉｇ」）定常領域またはその一部に融合された第ＶＩＩＩ因子（「ＦＶＩＩＩ」）を含む第１のポリペプチドと（ｉｉ）中間のＸＴＥＮ配列によって第２のＩｇ定常領域またはその一部に融合されたフォンウィルブランド因子（「ＶＷＦ」）のＤ’ドメイン及びＤ３ドメインを含むＶＷＦタンパク質を含む第２のポリペプチドとを含むキメラタンパク質を提供し、その際、ＸＴＥＮ配列は２８８未満のアミノ酸残基を含有し、第１のポリペプチドは第２のポリペプチドに連結されるまたは会合する。特定の実施形態には、本明細書で記載されるようなキメラタンパク質が含まれ、その際、第２のポリペプチドにおけるＸＴＥＮ配列は１２アミノ酸～２８７アミノ酸の間の長さを有するアミノ酸配列から成る。
【０００７】
開示されるのはまた、本明細書で記載されるようなキメラタンパク質であり、その際、キメラタンパク質は、第１のポリペプチドと第２のポリペプチドを含み、融合タンパク質の第２のポリペプチドが少なくとも２８８アミノ酸を含有するＸＴＥＮ配列を含む相当する融合タンパク質に比べて長い半減期を示す。一部の実施形態には、少なくとも２８８アミノ酸を含有するＸＴＥＮ配列ＡＥ２８８が含まれる。一部の実施形態では、ＡＥ２８８は配列番号８である。
【０００８】
開示されるのはまた、本明細書で記載されるようなキメラタンパク質であり、その際、第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列は約３６、約４２、約７２、または約１４４のアミノ酸を含有する。一部の実施形態では、第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列はＡＥ４２、ＡＥ７２、ＡＥ１４４、ＡＧ４２、ＡＧ７２、またはＡＧ１４４から選択される。
【０００９】
一部の実施形態には本明細書で記載されるようなキメラタンパク質が含まれ、その際、第２のポリペプチドのＸＴＥＮ配列は、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列
番号５５；配列番号５６；配列番号５７；配列番号５８；配列番号５８；配列番号５９；配列番号１４；配列番号６０；配列番号６１；配列番号６２；または配列番号６３から選択される。
【００１０】
特定の実施形態では、第１のポリペプチドはさらに、ＦＶＩＩＩタンパク質を第１のＩｇ定常領域またはその一部と連結する第２のＸＴＥＮ配列を含む。開示されるのはまた、本明細書で記載されるようなキメラタンパク質であり、その際、第１のポリペプチドは、ＦＶＩＩＩタンパク質の中での１以上の挿入部位に挿入される第３のＸＴＥＮ配列を含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチドはさらに、ＦＶＩＩＩタンパク質の中での１以上の挿入部位に挿入される第２のＸＴＥＮ配列を含む。特定の実施形態では、第１のポリペプチドは、ＦＶＩＩＩタンパク質を第１のＩｇ定常領域またはその一部と連結する第３のＸＴＥＮ配列を含む。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許