特許ウォッチ

公開番号2025138912
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-09-26
出願番号2022138193
出願日2022-08-31
発明の名称骨および/または軟骨再生用の組成物、骨および/または軟骨の疾患の処置および/または予防用の組成物
出願人国立大学法人徳島大学
代理人個人,個人
主分類A61K 35/15 20150101AFI20250918BHJP(医学または獣医学;衛生学)
要約【課題】本開示の課題は、骨および/または軟骨の再生方法を提供することである。本開示の別の課題は、骨および/または軟骨の疾患の処置および/または予防方法を提供することである。
【解決手段】M2マクロファージの培養上清を含む骨および/または軟骨再生用の組成物、および、M2マクロファージを培養し、培養上清を回収することを含む、骨および/または軟骨再生用の組成物の製造方法を提供する。M2マクロファージの培養上清を含む、骨および/または軟骨の疾患の処置および/または予防用の組成物、および、M2マクロファージを培養し、培養上清を回収することを含む、骨および/または軟骨の疾患の処置および/または予防用の組成物の製造方法を提供する。
【選択図】図3
特許請求の範囲【請求項１】
Ｍ２マクロファージの培養上清を含む骨および／または軟骨再生用の組成物。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本開示は、骨および／または軟骨再生用の組成物、骨および／または軟骨の疾患の処置および／または予防用の組成物に関する。
続きを表示（約 2,100 文字）【背景技術】
【０００２】
変形性関節症では機械的刺激などにより関節軟骨の変性・磨耗を生じ、関節軟骨・骨の変形をもたらす。運動機能障害や激しい疼痛によって患者のＱＯＬは著しく低下する。自覚症状を有する国内患者は１０００万人と推定される。現在、軟骨再生を促す治療薬はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
国際公開第２０１９／２３０８５９号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本開示は、骨および／または軟骨の再生方法、または、骨および／または軟骨の疾患の処置および／または予防方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ある態様では、本開示は、Ｍ２マクロファージの培養上清を含む、骨および／または軟骨再生用の組成物を提供する。
ある態様では、本開示は、Ｍ２マクロファージの培養上清を含む、骨および／または軟骨の疾患の処置および／または予防用の組成物を提供する。
ある態様では、本開示は、Ｍ２マクロファージを培養し、培養上清を回収することを含む、骨および／または軟骨再生用の組成物の製造方法を提供する。
ある態様では、本開示は、Ｍ２マクロファージを培養し、培養上清を回収することを含む、骨および／または軟骨の疾患の処置および／または予防用の組成物の製造方法を提供する。
【発明の効果】
【０００６】
本開示により、骨および／または軟骨の再生方法、または、骨および／または軟骨の疾患の処置および／または予防方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
マウス骨髄間質細胞から分化誘導した骨髄マクロファージ（ＢＭＭ）を、ＤＭＥＭ単独、またはＩＬ－４もしくはＳＨＥＤ－ＣＭとともに培養した後、ＦＡＣＳ分析した結果を示す。
マウス顎関節症モデルの実験デザインおよびワークフローの概要を示す。
Ｍ２－ＣＭ、Ｍ０－ＣＭまたはＤＭＥＭを静脈投与したマウス変形性顎関節症（ＴＭＪＯＡ）モデルにおいて、顎関節の骨および軟骨の損傷をマイクロコンピュータトモグラフィー（マイクロＣＴ）および組織染色により分析した結果を示す。
Ｍ２－ＣＭ、Ｍ０－ＣＭまたはＤＭＥＭを静脈投与したマウスＴＭＪＯＡモデルにおいて、顎関節のＩＬ－１ｂ、ＭＭＰ１３およびＰＣＮＡを免疫組織染色により測定した結果を示す。
ＩＬ－１ｂで刺激したマウス初代軟骨細胞をＭ２－ＣＭで処理し、ｉＮＯＳ、ＭＭＰ１３、ＣｏｌＩＩ、ＡＣＡＮ、ＲＡＮＫＬの発現を測定した効果を示す。
骨髄マクロファージの破骨細胞分化に対するＭ２－ＣＭの効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本願実施例において、幹細胞培養上清を用いてマクロファージを抗炎症性Ｍ２マクロファージに誘導し、分化誘導後のＭ２マクロファージの培養上清を変形性関節症モデルに静脈内投与したところ、関節骨および軟骨の破壊を抑止し、損傷関節の回復を促すことが明らかとなった。インビトロ実験では、この培養上清は、軟骨細胞の炎症反応、軟骨基質破壊酵素ＭＭＰ１３の産生、軟骨細胞によるＲＡＮＫＬ産生を直接抑制するとともに、軟骨基質ＩＩ型コラーゲンやアグリカンの産生を促進した。さらに破骨細胞分化も抑制した。
【０００９】
マクロファージは、Ｍ１マクロファージ（古典的活性化マクロファージ）またはＭ２マクロファージ（代替活性化マクロファージ）に分化する。マクロファージをＭ２マクロファージに分化させる要因として、寄生虫、真菌感染、免疫複合体、アポトーシス細胞、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）、ＩＬ－１３、ＴＧＦ－ｂ、ヘルパーＴ２（Ｔｈ２）サイトカインＩＬ－４、ならびにＴｈ２細胞を介したＩＬ－３３およびＩＬ－２５などが知られている。Ｍ２マクロファージにはさらに４つのサブタイプ、即ち、Ｍ２ａ、Ｍ２ｂ、Ｍ２ｃおよびＭ２ｄマクロファージが知られている。ヒトＭ２マクロファージのマーカーとして、例えば、ＩＤＯ、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－ｂ、ＣＤ１１５、ＣＤ２０４、ＣＤ１６３、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＦｃｅＲ１、ＶＳＩＧ４、ＩＲＦ４およびＳＴＡＴ６が知られている。マウスＭ２マクロファージのマーカーとして、例えば、アルギナーゼ、ＩＤＯ、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－ｂ、ＹＭ１、ＣＤ１４、ＣＤ１１５、ＣＤ１６３、ＣＤ２０４、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＳＦ１Ｒ、ＦｃｅＲ１、Ｌｙ－６Ｃ、ＩＲＦ４、ＲＥＬＭ－ａおよびＳＴＡＴ６が知られている。
【００１０】
Ｍ２マクロファージは、組成物を適用する対象と同一生物種に由来しても、異なる生物種に由来してもよく、好ましくは同一生物種に由来し（例えば、対象がヒトであれば、ヒト由来のＭ２マクロファージを用いる）、より好ましくは自己Ｍ２マクロファージである。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許