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公開番号2025089842
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-06-16
出願番号2023204749
出願日2023-12-04
発明の名称ペプチドのスクリーニング方法及びペプチド
出願人三井化学株式会社
代理人個人,個人,個人
主分類C12Q 1/6869 20180101AFI20250609BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法及びペプチドを提供する。
【解決手段】生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法であって、非ヒト生体に、ペプチドライブラリを提示するファージ集団を投与する工程(a)と、対象部位結合ファージ集団及び非対象部位結合ファージ集団をそれぞれ回収する工程(b)と、対象部位結合ファージ集団及び非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列を次世代シーケンサで解読し、対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団(対象部位リード集団)及び非対象部位リード集団を得る工程(c)と、を含み、対象部位リード集団に含まれるリードのうち、非対象部位リード集団に含まれないリードにコードされるペプチドが、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドである、方法。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法であって、
非ヒト生体に、ペプチドライブラリを提示するファージ集団を投与する工程（ａ）と、
前記非ヒト生体の前記対象部位に結合したファージ集団（対象部位結合ファージ集団）及び非対象部位に結合したファージ集団（非対象部位結合ファージ集団）をそれぞれ回収する工程（ｂ）と、
工程（ｂ）で回収した、前記対象部位結合ファージ集団及び前記非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列を次世代シーケンサで解読し、前記対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団（対象部位リード集団）及び前記非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団（非対象部位リード集団）を得る工程（ｃ）と、
を含み、工程（ｃ）で得られた対象部位リード集団に含まれるリードのうち、非対象部位リード集団に含まれないリードにコードされるペプチドが、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドである、方法。
続きを表示（約 440 文字）【請求項２】
前記工程（ａ）及び（ｂ）を２回以上繰り返す、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ペプチドが７アミノ酸からなるペプチドである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記生体が、動物又は植物である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
前記対象部位が、臓器、組織又は単一細胞である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
配列番号５７～６６のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、脳特異的結合剤。
【請求項７】
配列番号６７～７５のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、腎臓特異的結合剤。
【請求項８】
配列番号７６～８４のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、肝臓特異的結合剤。
【請求項９】
配列番号８５～９４のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、骨髄特異的結合剤。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、ペプチドのスクリーニング方法及びペプチドに関する。
続きを表示（約 2,400 文字）【背景技術】
【０００２】
特定の臓器を標的化する技術は、例えば薬物を送達するためのドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）等への応用が期待されている。例えば、特許文献１には、新生血管特異的なペプチドが記載されている。また、特許文献２には、心臓特異的なペプチドが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
国際公開第２０００／０２３４７６号
米国特許第６，３０３，５７３号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法及びペプチドを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は以下の態様を含む。
［１］生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法であって、非ヒト生体に、ペプチドライブラリを提示するファージ集団を投与する工程（ａ）と、前記非ヒト生体の前記対象部位に結合したファージ集団（対象部位結合ファージ集団）及び非対象部位に結合したファージ集団（非対象部位結合ファージ集団）をそれぞれ回収する工程（ｂ）と、工程（ｂ）で回収した、前記対象部位結合ファージ集団及び前記非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列を次世代シーケンサで解読し、前記対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団（対象部位リード集団）及び前記非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団（非対象部位リード集団）を得る工程（ｃ）と、を含み、工程（ｃ）で得られた対象部位リード集団に含まれるリードのうち、非対象部位リード集団に含まれないリードにコードされるペプチドが、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドである、方法。
［２］前記工程（ａ）及び（ｂ）を２回以上繰り返す、［１］に記載の方法。
［３］前記ペプチドが７アミノ酸からなるペプチドである、［１］又は［２］に記載の方法。
［４］前記生体が、動物又は植物である、［１］～［３］のいずれかに記載の方法。
［５］前記対象部位が、臓器、組織又は単一細胞である、［１］～［４］のいずれかに記載の方法。
［６］配列番号５７～６６のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、脳特異的結合剤。
［７］配列番号６７～７５のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、腎臓特異的結合剤。
［８］配列番号７６～８４のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、肝臓特異的結合剤。
［９］配列番号８５～９４のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドからなる、骨髄特異的結合剤。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法及びペプチドを提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
［スクリーニング方法］
一実施形態において、本発明は、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドのスクリーニング方法であって、非ヒト生体に、ペプチドライブラリを提示するファージ集団を投与する工程（ａ）と、前記非ヒト生体の前記対象部位に結合したファージ集団（対象部位結合ファージ集団）及び非対象部位に結合したファージ集団（非対象部位結合ファージ集団）をそれぞれ回収する工程（ｂ）と、工程（ｂ）で回収した、前記対象部位結合ファージ集団及び前記非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列を次世代シーケンサで解読し、前記対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団（対象部位リード集団）及び前記非対象部位結合ファージ集団が提示するペプチドをコードする塩基配列のリードの集団（非対象部位リード集団）を得る工程（ｃ）と、を含み、工程（ｃ）で得られた対象部位リード集団に含まれるリードのうち、非対象部位リード集団に含まれないリードにコードされるペプチドが、生体の対象部位に特異的に結合するペプチドである、方法を提供する。
【０００８】
生体としては、特に限定されず、動物、植物等が挙げられる。動物としては、脊椎動物、無脊椎動物等が挙げられる。脊椎動物としては、哺乳類、鳥類、爬虫類、両生類、魚類等が挙げられる。哺乳類としては、例えば、マウス、ラット、ハムスター、モルモット等のげっ歯類；ブタ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ等の有蹄類；イヌ、ネコ等の食肉類；アカゲザル、カニクイザル、マーモセット、オランウータン、チンパンジー、ヒト等の霊長類等が挙げられる。無脊椎動物としては、節足動物、軟体動物等が挙げられる。
【０００９】
植物としては、食用作物、非食用植物等が挙げられる。食用作物としては、果樹類、野菜類、きのこ類、穀類、飼料作物等が挙げられる。非食用植物としては、薬用作物、花き類・観葉植物、樹木類等が挙げられる。
【００１０】
工程（ａ）では、非ヒト生体にペプチドライブラリを提示するファージ集団を投与する。ファージとしては、通常、ファージディスプレイライブラリに利用されるものであれば特に限定されないが、例えばＭ１３ファージを利用することができる。ペプチドライブラリを提示するファージ集団としては、Ｍ１３ファージのｐＩＩＩコートタンパク質をコードする遺伝子に、ペプチドライブラリをコードする遺伝子を挿入した、ファージディスプレイライブラリを利用することができる。ペプチドライブラリとしては、７アミノ酸からなるランダムペプチドのライブラリが好ましい。
（【００１１】以降は省略されています）

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