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公開番号2024103704
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-08-01
出願番号2024090068,2023067817
出願日2024-06-03,2016-02-08
発明の名称調整可能な光学特性を有するヒドロゲル粒子およびその使用の方法
出願人スリングショットバイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド
代理人個人,個人,個人,個人,個人
主分類G01N 15/00 20240101AFI20240725BHJP(測定;試験)
要約【課題】調整可能な光学特性を有するヒドロゲル粒子およびその使用の方法を提供すること。
【解決手段】ヒドロゲル粒子およびサイトメトリーの用途におけるこれらの使用が記載されている。本明細書に記載されているヒドロゲル粒子は、標的細胞の少なくとも1種の光学特性と実質的に同様の少なくとも1種の光学特性を有するように選択的に調整可能である。この関連で、一態様では、本明細書に提供されているヒドロゲル粒子は、試料中の標的細胞の検出のための較正試薬として使用される。本発明の一態様では、重合モノマーを含み、少なくとも1つの表面を有するヒドロゲル粒子が提供される。ヒドロゲル粒子は、標的細胞の少なくとも1種の光学特性と実質的に同様の少なくとも1種の光学特性を有する。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
組成物であって、
懸濁流体；
生物学的細胞；および
少なくとも１つの細胞模倣物であって、
赤血球模倣物、
血小板（ｐｌａｔｅｌｅｔ）模倣物、
リンパ球模倣物、
単球模倣物、
網状赤血球模倣物、
顆粒球模倣物、
血小板（ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｅ）模倣物、および
核細胞模倣物
からなる群から選択される細胞模倣物
を含み、ここで、前記細胞模倣物は、重合モノマーを含むヒドロゲル粒子であり；そして
ここで、前記細胞模倣物は、前記細胞模倣物の天然の生物学的細胞対応物の対応する光学特性と実質的に類似する光学特性を含む、
組成物。
続きを表示（約 590 文字）【請求項２】
少なくとも２つの細胞模倣物が、前記組成物中に存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
少なくとも３つの細胞模倣物が、前記組成物中に存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記生物学的細胞が、血液細胞である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記光学特性が、側方散乱、前方散乱、またはその組み合わせである、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
少なくとも１つの細胞模倣物が、少なくとも１つの細胞表面マーカーで官能化されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
少なくとも１つの細胞模倣物が、少なくとも１つの血液群抗原で官能化されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも１つの細胞模倣物が、少なくとも１つの血液群抗原で官能化され、そして前記組成物中に存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
少なくとも１つの細胞模倣物が、血液群抗原Ａ、血液群抗原Ｂ、またはその組み合わせで官能化されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記細胞模倣物が、官能化された表面または散乱モジュレート添加物の少なくとも１つを有する、請求項１に記載の組成物。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１５年２月９日に出願された米国仮出願第６２／１１４，００４号および２０１５年６月２４日に出願された米国仮出願第６２／１８４，１９２号への優先権を主張し、それぞれの開示は、その全体が本明細書において参考として援用される。
続きを表示（約 1,800 文字）【背景技術】
【０００２】
フローサイトメトリーは、個々の細胞の急速な分離、計数、および特徴付けを可能にし、臨床および実験の状況において様々な用途に対して常法として使用されている技術である。この技術は、光線を、流体力学的に集束された液体のストリームに方向付けることに依存している。よって、いくつかの検出器は、ストリームが光線を通過するポイントを標的としている：一つは光線と直列（前方散乱またはＦＳＣ）、いくつかは光線と垂直（側方散乱またはＳＳＣ）である。ＦＳＣは細胞容積と相関し、ＳＳＣは粒子内側の複雑性（例えば、核の形状、細胞質顆粒の量およびタイプまたは膜の粗さ）に依存する。これらの相関関係の結果として、異なる特定の細胞型は異なるＦＳＣおよびＳＳＣを示し、フローサイトメトリーで細胞型を区別することが可能となる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、特定の細胞型を特定する能力は、装置の適切な較正、すなわち、目的の細胞型の精製された細胞の使用を頼りとするプロセスに依存する。これら精製された細胞を入手することは、バッチごとにばらつきが生じやすい高価で面倒な手順が必要となる可能性がある。したがって、フローサイトメーターなどのデバイスにおいて特定の細胞型を模倣できる調整可能な光学特性を有する合成組成物に対する必要性が当技術分野において存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明の一態様では、重合モノマーを含み、少なくとも１つの表面を有するヒドロゲル粒子が提供される。ヒドロゲル粒子は、標的細胞の少なくとも１種の光学特性と実質的に同様の少なくとも１種の光学特性を有する。一実施形態では、光学特性は、側方散乱プロファイル（ＳＳＣ）、前方散乱プロファイル（ＦＳＣ）、蛍光発光プロファイル、またはこれらの組合せである。標的細胞は、ユーザーが特定する任意の標的細胞であることができる。例えば、一実施形態では、標的細胞は免疫細胞、幹細胞またはがん細胞である。
【０００５】
別の態様では、標的細胞の分析に対してサイトメトリーデバイスを較正するための方法が提供される。一実施形態では、本方法は、標的細胞と実質的に同様の少なくとも１種の光学特性を有するヒドロゲル粒子をデバイスに挿入するステップを含み、ヒドロゲル粒子は、重合モノマーを含み、少なくとも１つの表面を有する。本方法は、サイトメトリーデバイスを使用してヒドロゲル粒子の少なくとも１種の光学特性を測定するステップをさらに含む。一実施形態では、少なくとも１種の光学特性は、試料中の標的細胞を検出するための基準として使用される。
【０００６】
さらに別の態様では、試料中の標的細胞を検出するための方法が提供される。本方法は、標的細胞と実質的に同様の少なくとも１種の光学特性を有するヒドロゲル粒子をデバイスに挿入するステップを含み、ヒドロゲル粒子は重合モノマーを含む。本方法は、サイトメトリーデバイスを使用して、ヒドロゲル粒子の少なくとも１種の光学特性を測定するステップをさらに含む。複数の細胞を含む試料がサイトメトリーデバイスに挿入され、複数
の細胞の個々の細胞の少なくとも１種の光学特性が測定される。最後に、光学特性の測定値に基づき、標的細胞またはその複数が試料中に存在するかどうかについての決定がなされる。
【０００７】
本明細書に提供されている方法の一実施形態では、ヒドロゲル粒子は、生分解性モノマーを含む。さらなる実施形態では、生分解性モノマーは、単糖、二糖、多糖、ペプチド、タンパク質、またはタンパク質ドメインである。またさらなる実施形態では、生分解性モノマーはアクリルアミドまたはアクリレートで官能化されている。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
図１は、開示されたヒドロゲル粒子の光学特性をポリスチレンビーズと比較して図示している。
【０００９】
図２は、本開示の標識したヒドロゲル粒子を生成するプロセスを描いている。
【００１０】
図３は、本開示の標識したヒドロゲル粒子の明視野および蛍光画像を提供している。
（【００１１】以降は省略されています）

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