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公開番号2025134829
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-09-17
出願番号2025101365,2021570358
出願日2025-06-17,2020-05-28
発明の名称吸枝が低減または消失したタバコ植物および製品を産生するための組成物および方法
出願人アルトリアクライアントサーヴィシーズリミテッドライアビリティカンパニー
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類A01H 6/82 20180101AFI20250909BHJP(農業;林業;畜産;狩猟;捕獲;漁業)
要約【課題】異なる標的遺伝子の発現を変化させることによってタバコにおける吸枝成長を調節するための方法および組成物を提供する。
【解決手段】サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ(CDK)、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性遺伝子中に変異を含む改変タバコ植物であって、前記変異が、同一品種の対照タバコ植物中の前記内在性遺伝子中には存在せず、前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、前記対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物を提供する。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性遺伝子中に変異を含む改変タバコ植物であって、
前記変異が、同一品種の対照タバコ植物中の前記内在性遺伝子中には存在せず、前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、前記対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物。
続きを表示（約 1,400 文字）【請求項２】
サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性遺伝子中に変異を含む改変タバコ植物であって、
前記変異が、同一品種の対照タバコ植物中の前記内在性遺伝子中には存在しない、改変タバコ植物。
【請求項３】
異種プロモーターに機能的に連結された、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む改変タバコ植物であって、
前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物。
【請求項４】
異種プロモーターに機能的に連結された、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、改変タバコ植物。
【請求項５】
サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性mRNAの発現を低減させることができる少なくとも1つの小RNA分子をコードする核酸に機能的に連結された異種プロモーターを含む組換えDNA構築物を含む改変タバコ植物であって、
前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物。
【請求項６】
サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性mRNAの発現を低減させることができる少なくとも1つの小RNA分子をコードする核酸に機能的に連結された異種プロモーターを含む組換えDNA構築物
を含む、改変タバコ植物。
【請求項７】
前記内在性遺伝子が、配列番号1～44および113からなる群より選択されるポリヌクレオチド配列と少なくとも80％同一のポリヌクレオチド配列を含む、請求項1または2記載の改変タバコ植物。
【請求項８】
前記内在性遺伝子が、配列番号45～88および114からなる群より選択されるアミノ酸配列と少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、請求項1または2記載の改変タバコ植物。
【請求項９】
前記異種プロモーターが、配列番号89～109からなる群より選択されるポリヌクレオチド配列と少なくとも90％同一のポリヌクレオチド配列を含む、請求項3～6のいずれか一項記載の改変タバコ植物。
【請求項１０】
前記小RNA分子が、配列番号1～44および113からなる群より選択されるポリヌクレオチド配列と少なくとも90％の同一性または相補性を有するポリヌクレオチド配列を含む、請求項5または6記載の改変タバコ植物。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2019年5月29日に出願された米国仮出願第62/854,139号の恩典を主張する。この出願の内容全体は、参照により、本明細書に組み込まれる。
続きを表示（約 2,100 文字）【０００２】
分野
本開示は、植物中の吸枝の低減または消失のために有用な、核酸およびタンパク質の発現を改良するための方法および組成物を提供する。
【０００３】
配列表の組み込み
本出願は、ASCII形式で電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。2020年5月21日に作成された前記ASCIIコピーの名称はP34703WO00＿SL.txtあり、サイズは380,869バイトである。
【背景技術】
【０００４】
背景
タバコは、非常に強い頂芽優勢を示す植物種である。シュート頂端分裂組織（SAM）からの分子シグナルは、腋芽の成長を効果的に阻害するホルモンシグナルを媒介する。SAMを除去すると（「摘芯」としても知られる）、生理学的および分子的変化が起こり、腋芽分裂組織（芽）からの新しいシュート（または「吸枝」）の成長を可能にする。吸枝の成長は、収量および葉品質の低下をもたらす。吸枝は、手作業による除去および化学物質の適用によって除かれてきた。マレイン酸ヒドラジドおよびフルメトラリンは、腋芽の成長（「吸枝発育」）を阻害するために、摘芯された植物に対して日常的に使用されている。しかしながら、吸枝を除くための労働力および化学薬剤は非常に高価である。従来の育種、突然変異育種および遺伝子導入アプローチを通じたタバコにおける吸枝発育の抑制は、数十年にわたって大きな目標であったが、今日まで、これらのアプローチを通じた吸枝発育の阻害または消失の成功は達成されていない。最近の分子的研究により、吸枝が低減または消失されたトランスジェニック植物が作製されたが、腋芽分解遺伝子の漏出性発現は、種子および胚の死をもたらし得、トランスジェニック植物の継続的世代の産生を妨げる。したがって、所望されない組織および/または器官中で腋芽分解遺伝子が発現されるのを防ぐための方法および組成物の開発は、化学薬剤の使用の低下をもたらし、タバコ生産に関連するコストおよび労力を低減するであろう。
【発明の概要】
【０００５】
概要
一局面において、本開示は、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性遺伝子中に変異を含む改変タバコ植物であって、前記変異が、同一品種の対照タバコ植物中の前記内在性遺伝子中には存在せず、前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、前記対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物を提供する。
【０００６】
一局面において、本開示は、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性遺伝子中に変異を含む改変タバコ植物であって、前記変異が、同一品種の対照タバコ植物中の前記内在性遺伝子中には存在しない、改変タバコ植物を提供する。
【０００７】
一局面において、本開示は、異種プロモーターに機能的に連結された、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む改変タバコ植物であって、前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物を提供する。
【０００８】
一局面において、本開示は、異種プロモーターに機能的に連結された、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、改変タバコ植物を提供する。
【０００９】
一局面において、本開示は、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性mRNAの発現を低減させることができる少なくとも1つの小RNA分子をコードする核酸に機能的に連結された異種プロモーターを含む組換えDNA構築物を含む改変タバコ植物であって、前記改変タバコ植物が、同等の栽培条件下で栽培された場合に、対照タバコ植物と比較して、摘芯後に吸枝を含まないまたは低減した吸枝を含む、改変タバコ植物を提供する。
【００１０】
一局面において、本開示は、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（CDK）、CDK阻害剤、MYB、およびWRKY転写因子からなる群より選択されるポリペプチドをコードする内在性mRNAの発現を低減させることができる少なくとも1つの小RNA分子をコードする核酸に機能的に連結された異種プロモーターを含む組換えDNA構築物を含む、改変タバコ植物を提供する。
（【００１１】以降は省略されています）

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