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公開番号2024178476
公報種別公開特許公報(A)
公開日2024-12-25
出願番号2021160158
出願日2021-09-29
発明の名称α線放出抗体薬物複合体
出願人国立大学法人大阪大学,公益財団法人野口研究所
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類C07K 16/00 20060101AFI20241218BHJP(有機化学)
要約【課題】α線放出抗体薬物複合体、その製造方法、その使用、並びに、当該α線放出抗体薬物複合体を含む医薬組成物および検査、診断、治療方法を提供する。
【解決手段】抗体分子中のN結合型糖鎖結合部位(Asn297)に、糖オキサゾリン誘導体を利用するリンカーを介して211Atを導入することで、211Atの導入位置が制御された抗体薬物複合体。該抗体薬物複合体は、
(1)糖加水分解酵素の存在下で、抗体またはその抗原結合断片Bと、第1のリンカーL1とを結合する工程;
(2)アスタチン結合構造Aと、第1のリンカーL1とを、第2のリンカーL2を介して、あるいは介さずに結合する工程;
(3)工程(1)および(2)により製造されたアスタチン結合構造含有抗体複合体に、211Atを結合する工程
を含む製造方法によって製造することが出来る。
【選択図】図7
特許請求の範囲【請求項１】
下記式（１）を有する複合体。
式（１）（Ｎ
ｍ
－Ａ－Ｌ
２
－Ｌ
１
）
ｎ
－Ｂ
［式中、
Ｂは抗体またはその抗原結合断片であり；
Ｌ
１
は下記式（２）を有する第１のリンカーであり；
式（２）
TIFF
2024178476000118.tif
39
150
［式中、
Ｘはそれぞれ独立して、単結合、酸素原子、－ＮＨ－、－ＣＯＨＮ－、－ＣＯＯ－、又は式（４）又は（５）：
TIFF
2024178476000119.tif
46
155
［式中、Ｒ
１
は、炭素数１～６の３価の分岐炭化水素基であり、Ｒ
２
及びＲ
３
は、それぞれ独立して炭素数１～３のアルキレン基である］で表される基であり；
Ｙ１～３はいずれか１つ以上は存在し、それぞれ独立して、ＰＥＧ鎖、置換されたＰＥＧ鎖、又は酸素原子、－ＮＨ－、－ＣＯＨＮ－、又は－ＣＯＯ－を主鎖に含むＰＥＧ鎖であり、ＰＥＧ鎖の構造は直鎖構造又は分岐構造であり、分岐構造の場合は、分岐数は２～１０であり；
Ｚはそれぞれ独立して、－O－、－CH
２
－、―N－、場合により置換されることのあるテトラジン基、ノルボルネン基、ｔｒａｎｓ－シクロオクテン基、ジベンジルシクロオクチル基、又はビシクロ［６．１．０］ノナ－４－イン－９－イルメチル基、又は場合により置換されることのあるシアノベンゾチアゾール基であり、；
ＲはＬ－フコース又は水素原子であり；
Ｙ１～３のいずれかが存在しない場合、Ｚは水素そしてＸは酸素であり；
Ｘが前記式（５）又は（６）で表される基の場合、Ｙ１～３は分岐鎖のＲ
２
及びＲ
３
にそれぞれ結合しており、ＰＥＧ鎖が分岐構造の場合、それぞれの分岐鎖にＺが結合しており、
＃ＢはＢへの結合点であって、抗体分子に存在するアスパラギン残基に結合する結合点を表し；
＃Ｌ
２－１
、＃Ｌ
２－２
および＃Ｌ
２－３
は、それぞれ独立してＹ１～３が存在するときには存在し、それぞれ独立してＬ
２
への結合点または水素を表し；
存在する＃Ｌ
２－１
、＃Ｌ
２－２
および＃Ｌ
２－３
の少なくとも１つはＬ
２
への結合点を表す。］
Ｌ
２
は結合または第２のリンカーであり；
Ａはアスタチン結合構造であり；
Ｎは
２１１
Ａｔであり；
ｍは１以上の整数であり；
ｎは１～１０の整数である。］
続きを表示（約 3,300 文字）【請求項２】
式（２）の＃Ｂは、
抗体のクラスがＩｇＧである場合、２９７番目のアスパラギン残基に結合する結合点を表し；
抗体のクラスがＩｇＡである場合、１４４番目及び３４０番目のアスパラギン残基からなる群の少なくとも１つに結合する結合点を表し；
抗体のクラスがＩｇＡ２である場合、１３１番目、２０５番目、及び３２７番目のアスパラギン残基からなる群の少なくとも１つに結合する結合点を表し；
抗体のクラスがＩｇＥである場合、１４０番目、１６８番目、２１８番目、２６５番目、３７１番目、３８３番目、及び３９４番目のアスパラギン残基からなる群の少なくとも１つに結合する結合点を表し；
抗体のクラスがＩｇＭである場合、１７１番目、３３２番目、３９５番目、４０２番目、及び５６３番目のアスパラギン残基からなる群の少なくとも１つに結合する結合点を表し、
上記アスパラギン残基の位置は、ＫａｂａｔのＥＵインデックスに従う番号付けによるものである、請求項１に記載の複合体。
【請求項３】
アスタチン結合構造Ａがデカボランおよびホウ素クラスター脂質構造からなる群から選択される、請求項１または２のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項４】
請求項１～３のいずれか一項に記載の複合体を含む医薬組成物。
【請求項５】
がん治療のために用いられる請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記がんが、リンパ腫、甲状腺癌、メラノーマ、前立腺癌、大腸癌、膵臓癌、肝臓癌、乳癌、子宮頸癌、肺癌、頭頸部癌、癌幹細胞からなる群から選択される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
請求項１に記載の抗体薬物複合体の製造方法であって、
（１）糖加水分解酵素の存在下で、抗体またはその抗原結合断片Bと、第１ノリンカーL
1
とを結合する工程；
（２）アスタチン結合構造Aと、第１のリンカーL
1
とを、第２のリンカーL
2
を介して、あるいは介さずに結合する工程；
（３）工程（１）および（２）により製造されたアスタチン結合構造含有抗体複合体に、
２１１
Ａｔを結合する工程
を含む製造方法。
【請求項８】
下記式（５）で表される化合物。
式（５）（Ａ－Ｌ
２
－Ｌ
１
）
ｎ
－Ｂ
［式中、
Ｂは抗体またはその抗原結合断片であり；
Ｌ
１
は第１のリンカーであり；
Ｌ
２
は結合または第２のリンカーであり；
Ａはアスタチン結合構造であり；
ｎは１～１０の整数であり、
第１のリンカーＬ
１
は下記式（２）を有する。
式（２）
TIFF
2024178476000120.tif
35
157
［式中、
＃Bは抗体分子または抗原結合断片への結合点であり；
Ｘはそれぞれ独立して、単結合、酸素原子、－ＮＨ－、－ＣＯＨＮ－、－ＣＯＯ－、又は式（３）又は（４）：
TIFF
2024178476000121.tif
45
156
［式中、Ｒ
１
は、炭素数１～６の３価の分岐炭化水素基であり、Ｒ
２
及びＲ
３
は、それぞれ独立して炭素数１～３のアルキレン基である］で表される基であり；
Ｙ１～３はいずれか１つ以上は存在し、それぞれ独立して、ＰＥＧ鎖、置換されたＰＥＧ鎖、又は酸素原子、－ＮＨ－、－ＣＯＨＮ－、又は－ＣＯＯ－を主鎖に含むＰＥＧ鎖であり、ＰＥＧ鎖の構造は直鎖構造又は分岐構造であり、分岐構造の場合は、分岐数は２～１０であり；
Ｚはそれぞれ独立して、－O－、－CH
２
－、―N－、置換されてもよいテトラジン基、ノルボルネン基、ｔｒａｎｓ－シクロオクテン基、ジベンジルシクロオクチル基、又はビシクロ［６．１．０］ノナ－４－イン－９－イルメチル基、又は置換されてもよいシアノベンゾチアゾール基であり；
ＲはＬ－フコース又は水素原子であり；
Ｙ１～３のいずれかが存在しない場合、Ｚは水素そしてＸは酸素であり；
Ｘが前記式（３）又は（４）で表される基の場合、Ｙ１～３は分岐鎖のＲ
２
及びＲ
３
にそれぞれ結合しており、ＰＥＧ鎖が分岐構造の場合、それぞれの分岐鎖にＺが結合しており、
＃ＢはＢへの結合点であって、抗体分子に存在するアスパラギン残基に結合する結合点を表し；
＃Ｌ
２－１
、＃Ｌ
２－２
および＃Ｌ
２－３
は、それぞれ独立してＹ１～３が存在するときには存在し、それぞれ独立してＬ
２
への結合点または水素を表し；
存在する＃Ｌ
２－１
、＃Ｌ
２－２
および＃Ｌ
２－３
の少なくとも１つはＬ
２
への結合点を表す。］
【請求項９】
下記式（６）を有する化合物。
式（６）Ａ－Ｌ
２
－Ｌ
１
［式中、
Ｌ
１
は第１のリンカーであり；
Ｌ
２
は結合または第２のリンカーであり；
Ａはアスタチン結合構造であり；
第１のリンカーＬ
１
は下記式（７）を有する。
式（７）
TIFF
2024178476000122.tif
32
149
［式中、
Ｘはそれぞれ独立して、単結合、酸素原子、－ＮＨ－、－ＣＯＨＮ－、－ＣＯＯ－、又は式（３）又は（４）：
TIFF
2024178476000123.tif
46
157
［式中、Ｒ
１
は、炭素数１～６の３価の分岐炭化水素基であり、Ｒ
２
及びＲ
３
は、それぞれ独立して炭素数１～３のアルキレン基である］で表される基であり；
Ｙ１～３はいずれか１つ以上は存在し、それぞれ独立して、ＰＥＧ鎖、置換されたＰＥＧ鎖、又は酸素原子、－ＮＨ－、－ＣＯＨＮ－、又は－ＣＯＯ－を主鎖に含むＰＥＧ鎖であり、ＰＥＧ鎖の構造は直鎖構造又は分岐構造であり、分岐構造の場合は、分岐数は２～１０であり；
Ｚはそれぞれ独立して、－O－、－CH
２
－、―N－、置換されてもよいテトラジン基、ノルボルネン基、ｔｒａｎｓ－シクロオクテン基、ジベンジルシクロオクチル基、又はビシクロ［６．１．０］ノナ－４－イン－９－イルメチル基、又は置換されてもよいシアノベンゾチアゾール基であり；
ＲはＬ－フコース又は水素原子であり；
Ｙ１～３のいずれかが存在しない場合、Ｚは水素そしてＸは酸素であり；
Ｘが前記式（３）又は（４）で表される基の場合、Ｙ１～３は分岐鎖のＲ
２
及びＲ
３
にそれぞれ結合しており、ＰＥＧ鎖が分岐構造の場合、それぞれの分岐鎖にＺが結合しており、
＃Ｌ
２－１
、＃Ｌ
２－２
および＃Ｌ
２－３
は、それぞれ独立してＹ１～３が存在するときには存在し、それぞれ独立してＬ
２
への結合点または水素を表し；
存在する＃Ｌ
２－１
、＃Ｌ
２－２
および＃Ｌ
２－３
の少なくとも１つはＬ
２
への結合点を表す。］

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本明細書において、国際出願ＰＣＴ／ＪＰ／２０２１－０１２９９７号の内容を、本明細書の一部を構成するものとして援用する。
本開示は、α線放出抗体薬物複合体、その製造方法、その使用、並びに、当該α線放出抗体薬物複合体を含む医薬組成物および検査、診断、治療方法に関係する。
続きを表示（約 2,600 文字）【背景技術】
【０００２】
核医学治療は体内に投与（静注、経口）した放射性同位元素（ＲＩ）やこれを組み込んだ薬剤を用いた放射線治療で、ＲＩ内用療法とも呼ばれる。従来は核医学治療にβ線を放出する核種が主として用いられてきた。β線に比して、α線はより飛程が短く、高いエネルギーを放出することから、がん細胞に対する高い毒性を持ち、正常細胞に対する副作用が小さいという特徴を有している。このような特徴を有するα線を放出する核種を、がん細胞などの標的細胞に特異的に発現している抗原に対して特異的に結合する抗体と結合させ、抗体薬物複合体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇｃｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）として用いることが試みられている。
【０００３】
発明者らは、デカボランを担持したポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカーを、抗体中にランダムに存在するリジン残基と非特異的に縮合させる方法で、α線放出核種である
２１１
Ａｔで標識した抗体の作成に成功している（第一世代
２１１
Ａｔ標識抗体）。当該第一世代
２１１
Ａｔ標識抗体は担がんマウスを用いた抗腫瘍効果試験で、強い腫瘍成長抑制効果を持つことが示唆された。発明者以外の研究グループにおいても、
２１１
Ａｔ標識抗体を作成し、抗腫瘍薬剤や造血幹細胞移植の前処理用薬剤として使用することが試みられている（非特許文献１～５）。
【０００４】
一方で、α線放出医薬を医薬品として使用するためには、抗体に対する
２１１
Ａｔなどのα線放出核種の導入位置を制御することが必須である。例えば、第一世代
２１１
Ａｔ標識抗体でも用いられた、ＩｇＧ抗体の側鎖アミノ基やチオール基に対してリンカーを介してα線放出核種を結合させる一般的な手法では、α線放出核種の導入位置を制御することは困難である。これらの一般的な手法では、α線放出核種が抗体上に複数箇所存在するアミノ基やチオール基にランダムに導入されるため、導入の位置や数に幅広い分布を有する多様なＡＤＣ異性体群が得られる。このようなＡＤＣ異性体群は品質管理、及び薬効（循環半減期や有効性の低下）等、臨床的な問題が懸念される。
【０００５】
この問題点を解決する方法の１つとして、ＩｇＧ抗体のＦｃ領域のＮ結合型糖鎖を足掛かりとして、位置選択的に薬物を導入する方法が報告されている（非特許文献６、７）。これらの方法は抗体上の糖鎖部分にのみ選択的に薬物を導入することができるため、従来のランダムに薬物を導入する方法よりも高い位置選択性と薬物の導入数の制御が可能な利点を持つ。
【０００６】
これらの方法ではいずれも糖鎖非還元末端のＮ－アセチルノイラミン酸に対して薬物導入のための官能基を導入する必要がある。しかしＮ－アセチルノイラミン酸は血液中で糖鎖から遊離する可能性が指摘されており、薬物が標的細胞外でＡＤＣから放出されてしまう危険性が懸念される。また、これらの方法で使用されている糖鎖は鶏卵より調製されているため卵由来のアレルゲンが薬剤製造においては問題となり得る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
特開２０１９－１５６７９６号公報
国際公開第２０１９／１５１３８４号
特開２０２０－１００８６５号公報
【非特許文献】
【０００８】
Ｗｉｌｂｕｒ，Ｄ．ｅｔａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．２００９，２０，１９８３－１９９１．
Ｗｉｌｂｕｒ，Ｄ．ｅｔａｌ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２００９，５０，３９．
Ｗｉｌｂｕｒ，Ｄ．ｅｔａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．２０１１，２２，１０８９－１１０２．
Ｗｉｌｂｕｒ，Ｄ．ｅｔａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．２００７，１８，１２２６－１２４０．
ＦｕｊｉｋｉＫ．ｅｔａｌ．ＣｈｅｍｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１９，１０，１９３６－１９４４．
Ｆ．Ｔａｎｇｅｔａｌ．，Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１４，９５０１（２０１６）
Ｍ．Ｉｗａｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．，２９，２８２９（２０１８）
Ｋ．Ｇｏｔｏｅｔａｌ．，ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．，６１，１５１４７５（２０２０）
Ａｏｙａｍａ，Ｍ．，ｅｔａｌ．，Ｍａｂｓ，１１：８２６－８３６（２０１９）
Ｋｕｚｍｉｎ，Ａ，ｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２１，２０７６－２０８５（２０１０）
Ｅ．Ａｕｒｌｉｅｎ，ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＣａｎｃｅｒ，８３（１０），１３７５－１３７９（２０００）
Ｙ．Ｓｈｉｒａｋａｍｉｅｔａｌ．，ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｐｏｒｔｓ，１１，Ａｒｔｉｃｌｅｎｕｍｂｅｒ：１２９８２（２０２１）
Ｋ．Ｇｏｔｏ，ｅｔａｌ，ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．，６１，１５１４７５（２０２０）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本開示は、上記背景を踏まえて、α線放出のもたらす生理学的効果を十分に維持しつつ、抗体分子上のα線放出核種の導入位置が制御された、新規のα線放出ＡＤＣを提供することを課題とする。本開示は別の態様において、前記α線放出ＡＤＣの製造方法、α線放出ＡＤＣを含有する医薬、α線放出ＡＤＣを用いた治療方法を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本開示の発明者は鋭意研究を進めた結果、抗体分子中のＮ結合型糖鎖結合部位（Ａｓｎ２９７）に、糖オキサゾリン誘導体を利用するリンカーを介して
２１１
Ａｔを導入することで、
２１１
Ａｔの導入位置が制御された抗体薬物複合体を得られること、当該抗体薬物複合体が優れた生理学的効果を奏することを発見することにより、上記課題を解決し得ることを見出した。
（【００１１】以降は省略されています）

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